国家自然科学基金(81172070)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
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- 自噬在A549肺腺癌细胞耐厄洛替尼中的作用研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨自噬在A549肺腺癌细胞耐厄洛替尼中的作用。方法不同水平厄洛替尼处理A549细胞及其获得性耐厄洛替尼细胞(A549/ER)后,细胞免疫荧光和Western blot观察自噬标记蛋白微血管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(MAP1-LC3-Ⅱ)的变化;应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬,流式细胞仪(FCM)检测用药后细胞周期及凋亡率。结果低水平(1、5μmol/L)厄洛替尼作用下两种细胞MAP1-LC3-Ⅱ表达水平较对照组(0.1%DMSO)均升高,高水平(25μmol/L)厄洛替尼作用下A549细胞MAP1-LC3-Ⅱ表达水平较低水平时降低,而A549/ER细胞MAP1-LC3-Ⅱ表达水平较低水平时仍升高。厄洛替尼水平提高至100μmol/L可诱导A549/ER细胞凋亡,3-MA抑制自噬后A549/ER细胞的凋亡率从7.76%上升至18.85%。结论自噬增强了A549/ER的耐厄洛替尼作用,抑制自噬可增强厄洛替尼的抗肿瘤作用。
- 徐睿孙建国陈正堂
- 关键词：肺肿瘤自噬厄洛替尼细胞凋亡
- 30例晚期非小细胞肺癌胸腔积液KRAS基因突变的检测被引量：3
- 2012年
- 目的通过对合并胸腔积液的非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液KRAS基因的检测,建立非组织来源KRAS检测的替代方法,探讨KRAS突变情况及主要临床病理特征。方法收集30例NSCLC胸腔积液标本,用焦磷酸测序法和锁核酸探针-桑格测序法(LNA-PCR sanger)检测各标本中KRAS突变情况,统计分析KRAS突变与临床病理特征之间的关系。结果焦磷酸测序法检出3例突变,而LNA-PCR sanger测序法则检出6例突变。6例突变中有4例位于第2外显子第12号密码子,2例位于第2外显子第14号密码子。统计学分析KRAS突变与性别、吸烟史、年龄、病理类型及体力状况(PS)评分无关。结论 LNA-PCR sanger测序和焦磷酸测序法均可用于胸腔积液标本KRAS突变检测,可为NSCLC基因检测提供良好的非组织标本替代方法。
- 明华孙洁孙建国张晓晶王欣欣刘佳陈正堂
- 关键词：肺肿瘤癌基因点突变
- 焦磷酸测序技术检测63例晚期NSCLC患者血浆KRAS基因突变被引量：5
- 2012年
- 目的探讨应用焦磷酸测序技术检测血浆KRAS基因突变的实用性,了解晚期非小细胞肺癌(NSCLC)血浆KRAS基因突变率和突变特征。方法收集63例晚期NSCLC患者的外周血标本,分离血浆并提取DNA,采用巢式PCR结合焦磷酸测序分析KRAS基因12和13号密码子突变。结果在63例晚期NSCLC患者中,3例存在血浆KRAS基因突变(4.76%),突变率较低,与亚裔组织KRAS突变率一致,低于西方人KRAS突变率,其突变类型均为单碱基替换突变。其中2例为12密码子突变,1例为13密码子突变。统计学分析未发现血浆KRAS突变与性别、吸烟史、年龄、病理类型、肿瘤分期、体力状况(PS)评分存在相关性。结论焦磷酸测序技术操作简便,可以快速、高通量地进行外周血循环KRAS基因突变检测,可广泛用于筛选对酪氨酸激酶抑制剂耐药的NSCLC患者,更有利于指导患者的个体化分子靶向治疗。
- 孙洁明华孙建国张晓晶王欣欣刘佳陈正堂
- 关键词：血浆突变焦磷酸测序
- 非小细胞肺癌分子靶向药物转化医学研究的过去、现状与未来被引量：8
- 2012年
- 非小细胞肺癌（NSCLC）的病死率高,治疗颇为棘手。令人欣慰的是,近年来,随着基础医学研究的深入,在NSCLC发病中起重要作用的相关分子靶点陆续被发现,并且,这些基础研究的重大进展已转化为临床实际应用的成果。
- 王欣欣陈正堂
- 关键词：非小细胞肺癌靶向药物
- 人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞PC9/ER的建立及奥曲肽改善耐药机制研究被引量：6
- 2015年
- 目的探讨人肺腺癌耐厄洛替尼细胞系PC9/ER的耐药机制,及奥曲肽(OCT)改善PC9/ER耐药的可能机制。方法采用CCK-8法检测PC9/ER的耐药指数,奥曲肽(OCT)对PC9/ER改善耐药的倍数,Western bolt方法比较PC9、PC9/ER及OCT作用后PC9/ER细胞IGF-1R、p-IGF-1R、Akt、p-Akt的表达。实时荧光定量PCR法检测IGF-1,IGF-1R的mRNA表达量。酶联免疫吸附方法(ELISA)检测OCT作用后IGF-1的表达变化。结果 PC9/ER的耐药指数为10.4。厄洛替尼和OCT对PC9/ER的抑制作用增强,改善倍数为9.62。单独用药OCT可抑制PC9/ER细胞IGF-1,联合用药可抑制PC9/ER细胞IGF-1R、p-IGF-1R、Akt、p-Akt蛋白的表达。结论 OCT可通过抑制IGF-1,进而通过抑制IGF-1R、PI3KAkt信号通路来提高PC9/ER对厄洛替尼的敏感性。
- 江飞龙韩静朱海振陈光朋孙建国陈正堂
- 关键词：肺腺癌奥曲肽厄洛替尼耐药
- 索拉菲尼三线治疗酪氨酸激酶抑制剂耐药的晚期肺腺癌1例被引量：1
- 2013年
- 男，66岁，无吸烟史，2008年12月因咳嗽、胸痛、痰中带血丝，到贵州当地医院就诊，查体发现右锁骨上窝约3cm肿大淋巴结，胸部CT提示右肺门增大并右侧胸腔少量积液，纤支镜检查提示右肺下叶基底段新生物，组织活检示低分化腺癌。临床分期为ⅢB期，随即给予吉西他滨联合奈达铂方案（吉西他滨2000mgdL，奈达铂50mgdL-3）化疗两周期，并序贯给予右肺病灶适形放射治疗，8mVX线片DT66Gy／33F／TW。
- 阎吕军徐燕梅孙建国
- 关键词：适形放射治疗酪氨酸激酶抑制剂晚期肺腺癌索拉菲尼吉西他滨肿大淋巴结
