国家自然科学基金(30871627)
- 作品数：9 被引量：42H指数：4
- 相关作者：黄文坤彭德良彭焕胡先奇王高峰更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所云南农业大学中国农业科学院更多>>
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- 马铃薯腐烂茎线虫ISSR标记引物的筛选及反应体系的建立
- 本文利用马铃薯腐烂茎线虫rDNA-ITS区分别为A型、B型的两个种群的DNA，从35对ISSR通用引物中筛选出适用于马铃薯腐烂茎线虫多态性分析的引物10对，再用5个地理距离相隔较远的种群的DNA从10对引物中筛选出多态性...
- 黄文坤彭德良龙海波彭焕王高峰
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫基因筛选种群结构遗传分化
- 马铃薯腐烂茎线虫L型半胱氨酸蛋白酶新基因（Dd-cpl-1）的克隆与序列分析
- L型半胱氨酸蛋白酶基因（cathepsin L-like cysteine proteinase gene）为与植物寄生线虫寄生能力相关的多功能基因。然而,它们的具体生物学功能仍有待进一步的研究。运用RT-PCR结合RA...
- 王高峰彭德良孙建华黄文坤彭焕龙海波
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫
- 文献传递
- 重要植物寄生线虫内切葡聚糖酶基因研究进展被引量：1
- 2012年
- 在线虫与植物互作的过程中,降解寄主细胞壁是植物线虫成功建立寄生关系的关键环节。β-1,4-内切葡聚糖酶(β-1,4-endoglucanase,ENG)是由线虫食道腺细胞产生并由口针分泌、对细胞壁降解起关键作用的酶类之一。本文对近年来植物寄生线虫eng基因的克隆、组织定位、表达分析、基因、编码蛋白的结构功能以及ENG来源、进化及在线虫与植物互作中的潜在作用等进行了概述。
- 彭焕彭德良胡先奇黄文坤贺文婷
- 关键词：内切葡聚糖酶水平基因转移植物寄生线虫基因克隆
- 冬前处理及冬后处理对甘薯茎线虫的化学防治效果评价
- 为了探索防治甘薯茎线虫的安全、低毒、高效的化学防治药剂及综合防治技术，2007～2008年，在北京市大兴区庞各庄甘薯种植基地进行了冬前翻耕、浇水与药剂处理，冬后翻耕、药剂处理与浇水的田间药剂试验，就市场上使用较多的化学防...
- 黄文坤张金良张桂娟张超龙海波王高峰王琼彭德良
- 关键词：甘薯茎线虫化学防治药剂处理
- 马铃薯腐烂茎线虫L型半胱氨酸蛋白酶新基因(Dd-cpl-1)的克隆与序列分析被引量：6
- 2011年
- L型半胱氨酸蛋白酶基因(Cathepsin L-like cysteine proteinase gene)为与植物寄生线虫寄生能力相关的多功能基因。运用RT-PCR和RACE的方法从马铃薯腐烂茎线虫Ditylenchus destructor中克隆出1个L型半胱氨酸蛋白酶新基因Dd-cpl-1(GenBank登录号为GQ180107)。该基因Dd-cpl-1 cDNA全长序列含有1个1 131 bp的开放性阅读框(ORF),编码376个氨基酸残基,其5′末端及3′末端分别含有29 bp和159 bp的非编码区(UTR)。Dd-cpl-1内含子外显子结构分析结果表明,其基因组序列包含7个内含子,且各内含子两端剪接位点序列遵守GT/AG规则。Dd-cpl-1基因推定的蛋白Dd-CPL-1与松材线虫L型半胱氨酸蛋白酶高度同源,一致性达到77%。以不同物种中L型半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列进行比对分析,推测推定的蛋白Dd-CPL-1含有L型半胱氨酸蛋白酶基因家族高度保守的催化三联体(Cys183,His322和Asn343)以及ERFNIN基系和GNFD基系。半胱氨酸蛋白酶系统发育分析表明,Dd-cpl-1属于由L型半胱氨酸蛋白酶组成的进化分支。Dd-cpl-1的这些序列特征进一步表明其为L型半胱氨酸蛋白酶基因。这是首次在马铃薯腐烂茎线虫中克隆到的L型半胱氨酸蛋白酶,为今后在蛋白水平对其进行进一步的功能分析提供基础。
- 王高峰彭德良孙建华黄文坤彭焕龙海波
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫
- 马铃薯腐烂茎线虫28S rDNA-D2/D3区序列分析被引量：12
- 2009年
- 我国危害甘薯的马铃薯腐烂茎线虫rDNA-ITS基因片段长度存在A型(900bp)和B型(1100bp)2个类型,A型腐烂茎线虫群体的ITS片段比B型群体少200bp。为了进一步研究这2种类型群体的发育关系,本文用线虫通用引物D2A和D3B对来自国内的21个马铃薯腐烂茎线虫群体和1个韩国的马铃薯腐烂茎线虫28SrDNA-D2/D3区进行了PCR扩增,均产生大小一致的片段,长度约为780bp,克隆、测序后用DNAMAN5.2软件和MEGA4软件进行分析比对,结果表明我国21个马铃薯腐烂茎线虫群体28SrDNA-D2/D3区只有20余个碱基的差异,相似率达97.2%。基于UPGMA构建的系统发育树很好地区分了马铃薯腐烂茎线虫A型和B型群体,展现出了群体的来源及发育关系。
- 于海英彭德良胡先奇黄文坤
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫
- 植物寄生线虫分支酸变位酶基因的研究进展被引量：3
- 2009年
- 植物寄生线虫食道腺中表达的寄生基因编码的分泌蛋白在线虫侵入寄主植物、建立取食位点和抑制寄主的防御反应过程中起重要作用。利用植物寄生线虫食道腺削减cDNA文库及基于同源克隆等方法,鉴定了这些过程中起作用的分支酸变位酶(CM)基因。带有氨基酸末端信号肽的根结线虫CM、孢囊线虫CM与细菌CM的蛋白质序列非常相似。mRNA原位杂交表明,CM基因专门存在于植物寄生线虫的亚腹食道腺中。RT-PCR分析表明,它们的转录丰度在线虫寄生的早期丰度较高,在后期较低或者难以检测到。Southern杂交表明,这些CM基因为多基因家族。CM的蛋白质在专性内寄生线虫中广泛存在,表明这种多功能的酶在控制线虫侵染植物的过程中起重要作用。
- 黄文坤彭德良贺文婷
- 关键词：根结线虫孢囊线虫植物寄生线虫基因克隆
- 腐烂茎线虫热激蛋白新基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 热激蛋白90基因(heat shock protein 90genes,hsp90s)是与生物发育、生物防御反应以及生物抗环境胁迫等相关的多功能基因。本试验以RT-PCR结合RACE方法从腐烂茎线虫Ditylenchus destructor中克隆出1个hsp90,命名为Dd-hsp90-1,基因登录号为HQ901595。Dd-hsp90-1cDNA全长序列含有1个2 160bp的开放性阅读框(ORF),编码719个氨基酸残基,其5′末端和3′末端分别含有70bp和117bp的非编码区(UTR)。Dd-hsp90-1内含子外显子结构分析结果表明,其基因组序列包含9个内含子,且各内含子两端剪接位点序列遵守GT/AG规则。Dd-hsp90-1基因的推定蛋白Dd-HSP90-1分子质量约为82.79ku。该基因为单拷贝基因,并且与其他热激蛋白90基因高度同源。Dd-HSP90-1具有热激蛋白90家族保守的序列和基系。此外,该基因还具有胞质型热激蛋白90的5个特征序列和特异MEEVD基系,这表明Dd-hsp90-1为胞质型热激蛋白90。系统进化分析结果显示,Dd-hsp90-1与松材线虫热激蛋白90基因(GenBank登录号ACY01918)亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达到86.65%。同时,热激蛋白90基因的系统进化分析结果也体现了植物寄生线虫之间的取食行为差异。
- 耿甜彭德良李建洪黄文坤王高峰彭焕龙海波
- 关键词：腐烂茎线虫克隆
- 马铃薯腐烂茎线虫类毒液过敏原蛋白基因cDNA全长的克隆与序列分析被引量：7
- 2011年
- 以马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)为材料,用RACE方法,获得了类毒液过敏原蛋白新基因Dd-vap-2的cDNA全长(GenBank登录号为GU370352)。该cDNA全长序列为1 150 bp,包括1个912 bp的完整ORF,编码1个含303个氨基酸的蛋白,其理论分子质量为31.8 ku,等电点pI为6.76。序列比对分析表明,De-vap-2基因含有保守性结构域,属于富含半胱氨酸分泌蛋白(cysteine-rich secretory protein,CRISP)家族成员,N端具有21个氨基酸残基组成的信号肽。系统进化树分析表明,该基因与马铃薯金线虫(Globodera ros-tochiensis)和大豆孢囊线虫(Heterodera glycines)分泌的类毒液过敏原蛋白属于同一支,亲缘关系较近。
- 王秉宇彭德良黄文坤彭焕王高峰
- 关键词：马铃薯腐烂茎线虫
- 植物功能性成分杀线虫活性的研究与应用
- 植物功能性成分是植物源杀线虫剂的重要成分之一,具有易降解、残留低、线虫不易产生抗药性等特点,能干扰、抑制植物线虫的生理代谢和生长发育,已在植物线虫防治上开展了许多探索性应用。本文就植物功能性杀线虫成分的种类、分离提取方法...
- 周佳民彭德良黄文坤
- 关键词：杀线虫活性植物寄生线虫
- 文献传递
