国家重点基础研究发展计划(G1999012001)
- 作品数：27 被引量：170H指数：9
- 相关作者：王崇明宋微波王秀华李赟刘英杰更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学青岛海洋大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金长江学者奖励计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 栉孔扇贝大规模死亡致病病原的研究被引量：27
- 2004年
- 对2000-2002年山东沿海6个疫区患病栉孔扇贝进行电镜观察,在消化腺、外套膜、肾和肠的结缔组织细胞和间质细胞中发现一种球形病毒,并引起相应的病理学变化。该病毒具囊膜,直径为130～170nm,核衣壳直径为90～140nm。病毒分离纯化后,观察到的病毒囊膜表面覆有长20nm的纤突。病毒在细胞质中的囊泡样结构内完成装配,其内未发现包涵体存在。从发病疫区栉孔扇贝组织中分离出病毒毒种对健康扇贝进行人工感染。结果显示,各感染实验组发病扇贝表现出与自然海区发病扇贝相同的临床症状。病毒注射组死亡率为75%,病毒浸浴组死亡率为68.7%,灭活病毒注射组和空白对照组死亡率皆为12.5%。病毒注射、浸浴组与灭活病毒注射组、空白对照组死亡率差异显著。电镜复检结果显示,各感染实验组发病扇贝组织中分布有大量病毒粒子,与自然海区发病扇贝组织所观察到的病毒粒子在形态特征和病理学特征上完全一致。以上结果证明,病毒是导致栉孔扇贝大规模死亡的直接病原。
- 王崇明王秀华艾海新李赟贺桂珍黄剑宇宋微波
- 关键词：栉孔扇贝球形病毒病理学观察病原
- 栉孔扇贝不同组织SOD、CAT和MPO活力的比较分析被引量：8
- 2008年
- 对2龄和3龄栉孔扇贝外套膜、鳃、消化盲囊、肾、闭壳肌、性腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和髓过氧化物酶(MPO)活力分析表明,检测组织均存在这三种酶,且在不同组织中活力表现存在明显差别,其中肾组织SOD、CAT活力最高,而MPO在消化盲囊中表现最高活力,与其它组织相比均呈显著性差异(P<0.05)。不同贝龄的栉孔扇贝酶活力比较表明,三龄贝各组织SOD、CAT和MPO活力均高于二龄贝。
- 费来华邵雁群李赟
- 关键词：栉孔扇贝过氧化氢酶髓过氧化物酶
- 急性病毒性坏死症病毒基因克隆及初步分析
- ＜正＞ 使用传统的蛋白酶k裂解法提取造成栉孔扇贝大规模死亡的急性病毒性坏死症（Acute Virus Necrobiotic Virus,AVND）病毒核酸,分别用DNase、RNase和绿豆芽核酸酶处理表明,该病毒为单...
- 艾海新王崇明韩文君王秀华李赟宋微波
- 关键词：栉孔扇贝病毒核酸CDNA克隆
- 文献传递
- 栉孔扇贝感染急性病毒性坏死症病毒的组织病理学与免疫荧光检测被引量：16
- 2004年
- 应用组织学和单克隆抗体免疫荧光技术 (Immunofluorescenceassay ,IFA)对夏季养殖中后期大规模死亡 (“急性病毒性坏死症”Acutevirusnecrobioticdisease ,AVND)高峰期的患病栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)进行了检测。组织学检测结果显示 ,患病扇贝的大多数器官 (外套膜、鳃、胃、肾等 )的上皮组织细胞可见显著的细胞肿胀、嗜碱性增强、排列紊乱、部分脱落以至完全坏死脱落等显著的组织病理学变化。作为对照 ,利用针对AVND病毒的特异性单克隆抗体所建立的免疫荧光原位检测技术对患病扇贝进行检测发现 ,上皮组织的病理变化与病毒感染之间具有一致的对应关系。这一结果表明 ,AVND病毒的感染可以对栉孔扇贝造成严重的病理性破坏。
- 付崇罗宋微波李张永忠闫华超
- 关键词：组织病理学上皮组织单克隆抗体免疫荧光检测栉孔扇贝外套膜
- 栉孔扇贝急性病毒性坏死症(AVND)病理学观察与分析被引量：8
- 2007年
- 2000～2002年，应用光镜和电子显微技术对AVND发生期间栉孔扇贝（Chlamysfarreri）各主要组织器官病理变化进行了连续观察。光镜观察显示，除生殖腺、闭壳肌外，濒死栉孔扇贝的外套膜、鳃、肾、消化腺和肠组织都有不同程度的组织病理变化。病灶主要出现在上述各器官的结缔组织以及上皮组织，病理变化表现为细胞核肿大、固缩、破裂，核染色质边缘化或空泡化，受感染细胞崩解、脱落，留下大片均质无结构的空白区域，形成凝固性坏死，结缔组织细胞质中有嗜碱性包涵体样颗粒存在。电镜观察显示，在病灶出现的组织细胞内，细胞核染色质异常凝集和边缘化、核膜周隙扩张或溶解。细胞器病理变化明显，内质网扩张，核糖体脱落，有髓鞘样小体出现；线粒体肿大、嵴融解，整个细胞出现解体现象。病变的结缔组织细胞与间质细胞细胞质中有大量直径为130～170nm、具有囊膜的球形病毒粒子存在，负染电镜观察表明，病毒囊膜表面覆有长20nm放射状纤突。病毒的发生基质在细胞质内，并被一膜性结构所包围。病毒在宿主细胞中的繁殖分为3个阶段，即病毒发生期、病毒装配期和病毒释放期。病理学观察证明，病毒感染与病理变化具有明显的相关性。
- 王崇明刘英杰王秀华李赟
- 关键词：栉孔扇贝组织病理学细胞病理学
- 栉孔扇贝球形病毒的超微结构及细胞病理学观察被引量：4
- 2002年
- 对扇贝大规模死亡病因调查时,在栉孔扇贝体内发现一种球形病毒,大小为130—150nm,核心区电子密度较高,具双层囊膜,囊膜外具放射状纤突。病毒存在于消化腺、外套膜、肾脏、肠及鳃等组织的细胞质中。细胞超微病理变化表现为细胞核内染色质变性,凝聚于核膜内侧,线粒体外膜膨胀,内嵴溶解、消失。内质网膨胀,核糖体脱落。
- 刘英杰吴信忠朱壮王崇明张其中潘金培
- 关键词：细胞病理学栉孔扇贝球形病毒超微结构核糖体
- 间接免疫荧光法检测栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒被引量：6
- 2005年
- 用纯化栉孔扇贝(Chlamysfarreri)急性病毒性坏死症病毒(AVNV)免疫兔子,以兔抗血清为一抗,荧光标记的羊抗兔抗体为二抗,采用冰冻切片技术,建立了栉孔扇贝AVNV的间接免疫荧光检测方法。用该方法分析栉孔扇贝和海湾扇贝(Argopectenirradians)体内AVNV感染强度,并对感染率进行统计。结果表明,栉孔扇贝的肾脏、肝胰腺中,AVNV阳性信号最强,呈现中度到重度感染,其AVNV感染率100%。鳃丝、性腺及闭壳肌中未检测到阳性信号。在海湾扇贝的肝胰腺及肾中AVNV的感染率也较高。提示AVNV感染扇贝的靶器官主要是肾脏、肝胰腺。对与栉孔扇贝同一海区养殖的海湾扇贝在栉孔扇贝发病期间存活率较高的原因进行了讨论。
- 王秀华王崇明黄倢
- 关键词：栉孔扇贝
- 核酸杂交技术在海水养殖动物疾病诊断中的应用被引量：2
- 2006年
- 介绍了核酸杂交技术的发展历史背景、基本原理、杂交方法、标记方法、技术特点,概述了目前已报道的海水养殖动物病害的病原核酸杂交检测技术的进展,并对核酸杂交技术进行了展望。
- 艾海新王崇明任伟成王秀华李赟
- 关键词：核酸杂交探针海水养殖病害
- 栉孔扇贝类立克次体自然感染调查及人工感染试验被引量：13
- 2002年
- 从 1999年 10月至 2 0 0 1年 3月对导致栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)大规模死亡的可疑病原进行了系统调查 ,在栉孔扇贝体内发现 1种细胞内寄生原核生物。根据该原核生物超微形态结构及所形成的包涵体形态特征及染色性质分析 ,初步确定为类立克次体 (Rickettsia likeorganisms ,RLO)。该RLO大小为 (3.6 2 3± 1.4 35 ) μm× (1.343± 0 .32 6 ) μm (n =4 5 ) ,主要寄生在栉孔扇贝的鳃、消化腺的上皮组织中。其感染率和感染强度与水温及栉孔扇贝死亡率呈负相关关系。人工感染试验证明 ,RLO可引起栉孔扇贝感染 ,但不形成大面积明显的组织病理变化。本研究表明 ,RLO对栉孔扇贝不具明显的致病性 ,不是导致栉孔扇贝大规模死亡的主要原因。
- 刘英杰王崇明朱洺壮王秀华李赟张宏义任晴光潘金培
- 关键词：栉孔扇贝立克次体自然感染
- 海湾扇贝衣原体样生物超微结构观察被引量：1
- 2003年
- 对海湾扇贝生长不同阶段的样品进行了透射电镜观察 ,在样品消化腺上皮细胞内发现类衣原体感染。该类衣原体具有原体、网状体和中间体等典型发育阶段 ,原体个体小而致密 ,网状体大而疏松 ,以等体积分裂进行繁殖。在细胞质内形成单层膜包被的包涵体 ,包涵体发育晚期破裂 ,宿主细胞崩解 ,衣原体逸出。衣原体感染可导致细胞核变形 ,染色质凝聚 ,内质网核糖体脱落 ,线粒体内嵴消失。
- 刘英杰吴信忠王崇明潘金培
- 关键词：海湾扇贝包涵体超微结构
