中国博士后科学基金(20080440910)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 相关作者：吴德全林雨佳高峰李国良仇公才更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
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- 同系大鼠骨髓间充质干细胞对同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞的免疫调节作用
- 2012年
- 目的:研究同系大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)对同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞的免疫调节作用,以及对共培养胰岛胰岛素分泌的影响。方法:以Wistar大鼠胰岛作为刺激原,Lewis大鼠MSC及外周血T淋巴细胞作为共培养细胞,分为三组:实验组(A)20IEQ胰岛细胞、1×108 L-1 T淋巴细胞和1×107 L-1 MSCs共培养;药物对照组(B)20IEQ胰岛细胞与1×108 L-1 T淋巴细胞共培养并加入0.25μg/ml CsA;阳性对照组(C)20IEQ胰岛细胞与1×108 L-1 T淋巴细胞共培养。CCK-8检测共培养3天时T淋巴细胞对同种异体胰岛刺激的反应性,ELISA检测共培养3天时上清液IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的含量,以及共培养胰岛的胰岛素分泌功能。结果:MSC与CsA均可抑制同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞增殖,A组T淋巴细胞增殖率(17.10±2.7)%与B组(14.65±1.8)%间差异无统计学意义(P>0.05);C组IFN-γ、IL-2含量显著高于A组及B组,IL-10含量显著低于A及B组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4含量在A、B、C三组间差异均无统计学意义(P>0.05)。A组胰岛的胰岛素分泌水平显著高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);胰岛素刺激指数(2.37±0.52)显著高于B组(1.80±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MSC与CsA均可通过减少Th1类细胞因子的表达使受者Th1/Th2平衡向Th2方向偏移,抑制同种异体胰岛刺激的T淋巴细胞增殖。相对于CsA,MSC可以保持胰岛素高分泌水平和良好的糖刺激反应性,避免了CsA可能带来的毒性和副作用,具有一定的临床应用优势及前景。
- 林雨佳吴德全李国良高峰
- 关键词：骨髓间充质干细胞胰岛环孢素ATH1/TH2
- 大鼠骨髓间充质干细胞和免疫调节作用被引量：3
- 2011年
- 目的 研究一氧化氮（nitric oxide,NO）在骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的免疫调节作用.方法 贴壁筛选法分离培养Lewis大鼠骨髓间充质干细胞.以刀豆蛋白A（concanavalin A,ConA）作为刺激因素,SD大鼠外周血分离的T淋巴细胞作为反应细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞与MSCs共培养后其增殖能力的变化.然后采用RT-PCR、Western blot检测MSCs诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）mRNA与蛋白的表达;Griess法检测上清液亚硝酸盐含量;ELISA检测上清液Th1细胞因子IFN-γ和Th2细胞因子IL-4的水平.结果 MSCs明显抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖,抑制作用因细胞比例的不同而有所区别.当实验组MSC：T为1：10时最明显,增殖率为（33.83±2.10）%,而1：80组[（78.62±3.80）%]与不含MSCs的阳性对照组[（79.03±1.70）%]差异无统计学意义（P＞0.05）.实验组MSCs的iNOS mRNA与蛋白的表达以及上清液中亚硝酸盐含量均较阳性对照组明显上调,1：10～1：40的范围内呈明显递增趋势,但1：80组与1：40组差异无统计学意义（P＞0.05）.在加入iNOS特异性抑制剂2-甲基-2-巯基硫酸脲（S-methylisothiourea sulfate,SMT）后,各组T淋巴细胞增殖率基本恢复.实验组IFN-γ含量随MSCs所占比例的降低而增加,各组IL-4含最差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 MSCs对同种异体外周血T淋巴细胞的增殖有免疫调节作用,机制可能与其分泌的可溶性因子NO影响了 Th1/Th2平衡有关.
- 高峰林雨佳李国良吴德全
- 关键词：间充质干细胞一氧化氮TH1/TH2免疫调节
- 与大鼠胰岛细胞联合移植的骨髓间充质干细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2011年
- 目的研究同种异体或自体的大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）与胰岛肝内联合移植对胰岛移植物的免疫调节作用及其机制。方法以链佐星制备Lewis大鼠的糖尿病模型，作为胰岛移植受者，分为3组：单纯移植组大鼠经门静脉单独移植SD大鼠胰岛6000 IEQ／kg；同系MSC组大鼠经门静脉共同移植1×10^9／L的Lewis大鼠MSC 1ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ／kg；同种MSC组大鼠经门静脉共同移植1×10^9／L的SD大鼠MSC 1ml与SD大鼠胰岛6000IEQ／kg。检测受鼠的血糖变化，术后1、3d大鼠外周血γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-2、IL-4和IL-10的含量。结果3组大鼠术后第1天血糖均下降到13．9mmol／L以下。同系MSC组移植物存活时间为（11．38±4．03）d，同种MSC组为（5．50±2，07）d，单纯移植组为（2．88±1．25）d（P〈0．01）。术后1、3d，单纯移植组IFN-γ和IL-2的含量显著高于同系MSC组和同种MSC组（P〈0．01），同种MSC组IFN-γ和IL-2的含量高于同系MSC组（P〈0．05）；单纯移植组IL-10的含量低于同系MSC组和同种MSC组（P〈0．01），同系MSC组IL-10的含量与同种MSC组相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；各组IL-4含量的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MSC与同种胰岛共移植可以延长胰岛移植物存活时间，应用同系MSC的效果优于同种异体MSC。共移植的MSC主要通过减少TH1类细胞因子（IFN-7和IL-2）的表达使受者TH1／TH2平衡向TH2方向偏移。
- 林雨佳高峰吴德全
- 关键词：胰岛移植间质干细胞免疫耐受
- 骨髓间充质干细胞移植途径对胰岛移植物免疫排斥反应的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛共移植对诱导胰岛移植物免疫耐受的作用,并比较MSC不同途径移植的效果。方法:SD大鼠和Lewis大鼠分别作为供、受体。取SD大鼠股骨,贴壁培养法分离和扩增MSC,胶原酶V分离胰岛。应用链脲佐菌素制备Lewis大鼠糖尿病模型后,将其随机均分为A组(将BrdU标记的MSC与胰岛经门静脉混合输入),B组(将胰岛经门静脉输入,BrdU标记的MSC经尾静脉输入),C组(胰岛经门静脉输入,联合应用环孢素A)和D组(单纯胰岛门静脉移植)。观察各组术后血糖变化,比较各组胰岛移植物存活时间。术后第7天切取各组部分存活大鼠肝脏、胸腺、脾脏行免疫组化染色观察MSC归巢位置。结果:A,B两组大鼠术后正常血糖维持时间最长,C组次之,D组最短;各组胰岛存活时间A组为(12.1±2.3)d,B组为(8.6±1.4)d,C组为(13.2±1.9)d,D组为(2.2±0.6)d;MSC归巢部位观察显示,A组BrdU阳性的MSC主要分布于肝脏,并在植入胰岛周围形成"类微囊化效应",B组BrdU阳性的MSC主要分布于胸腺、脾脏。结论:MSC与胰岛共移植能诱导胰岛移植物免疫耐受,且MSC和胰岛混合经门静脉移植效果优于胰岛门静脉移植联合MSC外周静脉移植。
- 高峰李国良林雨佳仇公才吴德全
- 关键词：间充质干细胞胰岛移植免疫耐受
