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国家重点基础研究发展计划(G1999012002): 作品数：44 被引量：439H指数：15; 相关作者：黄倢宋晓玲杨冰战文斌刘庆慧更多>>; 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所中国海洋大学青岛海洋大学更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

对虾组织膜蛋白制备方法及其多肽组成被引量：3: 2005年; 选取凡纳缤对虾(Litopenaeusvannamei)的4种组织(鳃、血淋巴、肝胰腺、肌肉),着重对膜蛋白的提取方法及其多肽组成进行分析。在对虾组织膜蛋白提取过程中,使用了5种蛋白酶抑制剂(苯甲基磺酰氟PMSF、胃酶抑制剂、亮抑酶肽、胰凝乳蛋白酶抑制剂、胰蛋白酶抑制剂),以减少组织自身的酶将蛋白降解的可能。电镜观察,可见纯度较高的、细胞膜结构卷曲形成的小泡样、封闭的结构。使用Gel Pro软件对提取产物的SDS PAGE图谱分析,确定了这几种组织的特征多肽分子量分别为75 0kD、70 5kD、26 7kD和71 2kD。; 梁艳黄倢易志刚张培军; 关键词：凡纳滨对虾膜蛋白

WSSV-VAP1基因克隆与序列分析被引量：5: 2005年; 根据已测序的WSSV VAP1全基因序列设计1对引物,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析,扩增出约838bp的特异条带,将其回收后克隆入pGAPZαA载体中,并进行序列测定与分析。结果表明,扩增序列与GeneBank登录序列(GenBankNo AF411634)核苷酸同源性100%。序列分析表明,WSSV VAP1基因编码蛋白无跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和糖基化位点,并含有RGD序列,预示其为WSSV浸染中的一个重要蛋白。; 刘庆慧黄倢韩文君王清印; 关键词：基因克隆中国明对虾

硝酸纤维素膜印迹法测定对虾微量血淋巴碱性磷酸酶相对活性被引量：1: 2002年; 用硝酸纤维素膜(NCM)印迹法测定日本对虾(Penaeusjaponicus)血淋巴碱性磷酸酶(ALP)的相对活性,以标准ALP梯度稀释液为参照,比较NCM印迹法与ALP测定试剂盒法对标准ALP梯度液的测定结果。数据回归分析显示,NCM印迹法所得结果同标准ALP梯度稀释液活性的回归关系极显著(P<0.01);用NCM印迹法测定ALP相对活性的灵敏度为试剂盒的100倍。分别用NCM印迹法与ALP测定试剂盒测定对虾血淋巴的ALP相对活性,测得结果呈强直线相关性(P<0.01),说明用NCM印迹法测定对虾血淋巴ALP相对活性具可行性。; 王秀华杨冰黄倢雷质文; 关键词：血淋巴日本对虾碱性磷酸酶酶活性非特异性免疫

白斑综合征病毒(WSSV)提取物中43kDa蛋白来源的MALDI-TOF分析被引量：1: 2006年; 将纯化的WSSV粒子蛋白经SDS-PAGE分离后,对图谱中出现的43kDa蛋白进行质谱分析,发现该蛋白不是WSSV基因组编码,是来自其宿主的蛋白成分,与肌动蛋白有很高的同源性。提示该蛋白的有无及含量多少与纯化病毒粒子的状态有很大关系,可以作为纯化WSSV完整性的参考指标。; 梁艳黄倢张培军; 关键词：白斑综合征病毒宿主肌动蛋白质谱分析

中国对虾血细胞单克隆抗体研制及对虾血细胞类型的鉴别被引量：24: 2001年; 选用聚乙二醇 (PEG)作为细胞融合剂 ,将免疫的Balb/c小鼠的脾细胞与P3 X63 Ag8U1骨髓瘤细胞融合 ,制备产生抗中国对虾血细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞。运用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和间接免疫荧光抗体技术 (IIFA)进行了杂交瘤细胞的筛选 ,最后建立了分泌抗中国对虾血细胞单抗的 2 3株杂交瘤细胞。其中以 3A3、3B3和 3B6为代表的三组单抗能够鉴别中国对虾的三类血细胞亚群。这为今后进一步研究中国对虾血细胞不同亚群的免疫特性提供了有利手段。; 战文斌张利峰张志栋周丽宋微波; 关键词：中国对虾血细胞单克隆抗体抗病能力

WSSV-Vp281基因克隆及在毕赤酵母中的表达: 本研究根据Gene Bank WSSV-Vp281基因序列设计一对引物,在5’引物和3’引物中分别引入EcoRI和XbaI酶切位点。经PCR扩增,将Vp281克隆至穿梭载体pGAPZα-A之GAP启动子下游位点,构建成含...; 刘庆慧韩文君黄倢; 关键词：基因克隆毕赤酵母分泌表达

基于PC/Linux蛋白序列分析系统的构建及应用被引量：2: 2004年; 介绍利用常见的x86PC,Linux操作系统配合BLAST、PHYLIB和EMBOSS等常见的生物分析软件构建可以完成多种蛋白数据分析的大规模自动分析系统。该系统可自动完成从DNA序列中获取读码框、核酸序列向蛋白序列的转化、在蛋白序列数据库中查找同源序列、序列录入数据库以及蛋白序列的等电点、亲疏水位点、二级结构等性质的分析、多个序列之间相似度和进化地位的分析,并对输出的结果数据利用Web服务器进行发布。与传统的序列分析模式相比,此分析系统大大加速了对大规模数据信息的分析和利用。; 寸树健邓百煌邓日强杨彦臻吴文言; 关键词：LINUX BLAST

应用PCR和RT-PCR技术对4种对虾病毒的检测被引量：20: 2003年; 探讨了应用PCR和RT PCR技术对 4种主要的对虾病毒进行检测的方法 ,同时使用该方法检测了对虾天然饵料———卤虫中的 4种对虾病毒。结果显示 ,含病毒核酸的阳性对照样品分别扩增出了大小为 82 4bp、70 5bp、2 6 0bp和 2 16bp的预期产物 ,但未能从卤虫样品中检测到此 4种病毒的存在。本文报道的病毒检测方法具有快速、灵敏、准确的特点 ,可以用于进出口贸易中对活体或冰冻对虾、虾苗、对虾饵料等进行相关对虾病毒的检疫。; 史成银黄倢杨冰宋晓玲徐怀恕; 关键词：聚合酶链式反应逆转录聚合酶链式反应对虾病毒

桡足类浮游动物细胞膜与白斑综合症病毒的结合研究被引量：3: 2005年; 通过差速离心法提取桡足类组织细胞膜,依照本实验室确立的细胞膜与WSSV特异性的结合关系,进行了桡足类细胞膜与白斑综合症病毒(WSSV)结合实验。结果表明,桡足类细胞膜与WSSV之间存在着特异性的结合,二者的结合说明了桡足类细胞膜上存在有WSSV的受体蛋白,其为确定桡足类属于WSSV感染宿主提供了重要证据。同时,比较了凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)鳃细胞膜对桡足类细胞膜与WSSV结合的影响作用,证实了凡纳滨对虾鳃细胞膜对二者的结合具有明显的封闭作用,侧面说明了WSSV在二者细胞膜上存在有相同的受体蛋白或结合位点。桡足类细胞膜经表面活性剂TritonX100处理后,与WSSV的结合活性没有受到影响,而经Tween20处理能显著提高与WSSV的结合活性,提示受体蛋白在细胞膜上可能占有一段较小的跨膜区域。经SDSPAGE分析确定了桡足类细胞膜由分子量为18～207kD范围的约33条蛋白条带组成。; 冯书营黄倢张士璀; 关键词：桡足类细胞膜 WSSV

国家重点基础研究发展计划(G1999012002)