浙江省科技厅重点科研国际合作项目(2008C14029)
- 作品数：9 被引量：46H指数：3
- 相关作者：许爱娥洪为松傅丽芳钱国培尉晓冬更多>>
- 相关机构：杭州市第三人民医院浙江中医药大学浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重点科研国际合作项目浙江省医药卫生科学研究基金杭州市医学重点专科专病项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 白癜风表皮黑素细胞超微结构及小眼畸形相关转录因子转录调控研究被引量：5
- 2010年
- 目的 研究白癜风黑素细胞超微结构和小眼畸形相关转录因子（MITF）及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白（TRP）与白癜风临床类型与病程的相关性.方法 选择不同病程的寻常型白癜风（VV）12例和节段型白癜风（SV）8例,分别取白斑区、白斑边缘正常肤色区和远离白斑正常肤色区的表皮片,经组织学确定其表皮的完整性.透射电镜观察10例患者（VV 6例,SV 4例）不同区表皮黑素细胞的超微结构特点.对所有20例远离白斑正常肤色区的表皮片黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测MITF及其转录调控的酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TYRP2）的表达水平.结果 白癜风表皮黑素细胞超微结构病理改变：10例中7例白斑区表皮内未见黑素细胞,1例短病程和2例长病程VV分别可见少量黑素体显著减少或缺失的黑素细胞;白斑边缘正常肤色区,6例VV中,3例病程小于15个月者可见黑素细胞超微结构异常,而4例SV中仅1例异常;远离白斑正常肤色区,10例黑素细胞超微结构均正常.白癜风表皮黑素细胞MITF及其转录调控TRP的表达：VV的MITF表达下调与TYR、TYRP1、TYRP2的表达下调一致;SV存在MITF显著表达下调.而TYR、TYRP1、TYRP2几均正常表达.结论 VV和SV可能存在不同的表皮黑素细胞超微结构病理改变和MITF转录调控机制.
- 王平洪为松章莉洪健郑俊惠许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞
- 超低温液氮冷冻技术冻存复苏黑素细胞移植治疗大面积白癜风
- 2012年
- 目的:研究应用超低温液氮冷冻技术冻存复苏黑素细胞的生物学活性及分析自体黑素细胞移植治疗大面积白癜风的疗效。方法:负压吸疱获取患者正常表皮片,Hu16培养基体外培养黑素细胞,应用超低温液氮冷冻技术冻存复苏黑素细胞,检测黑素细胞的分裂时间(DOT)、黑素含量(M)、黑素制造量(MP)和树突数。受皮区应用超脉冲二氧化碳激光磨削去表皮后,以黑素细胞密度6～10×104个/cm2进行移植。所有患者均至少跟踪观察疗效6个月。结果:11例患者黑素细胞培养至第二代进行超低温液氮冷冻,15例患者黑素细胞培养至第三代进行冷冻,所有的26例患者冻存6、12和24个月复苏黑素细胞的生物学活性指标DOT、M、MP和树突数均与未冻存的细胞无明显差异。未冻存、冻存6、12和24个月的黑素细胞移植治疗的痊愈率为57.69%、61.54%、57.69%和53.85%,有效率为84.61%、88.46%、80.77%和80.77%。冻存6、12和24个月的黑素细胞移植的痊愈率和有效率与未冻存的黑素细胞移植的痊愈率和有效率均无显著性差异。结论:超低温液氮冷冻技术能很好的储存白癜风患者体外培养的黑素细胞,应用冻存复苏的黑素细胞自体移植治疗大面积白癜风皮损疗效确切。
- 洪为松傅丽芳尉晓冬钱国培许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞液氮冷冻
- 表皮黑素细胞专用培养基组分与细胞外信号调节激酶蛋白磷酸化关系初步观察
- 2010年
- 目的了解表皮黑素细胞专用培养基HU16中维持细胞生长的主要物质人重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、FBS和环腺苷酸激动剂与细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白磷酸化的关系。方法从环切包皮原代培养人表皮黑素细胞,用western blot检测去bFGF、去FBS以及去环腺苷酸激动剂培养基培养后ERK1/2蛋白磷酸化水平的改变。结果去bFGF和去FBS处理后,表皮黑素细胞ERK1/2蛋白的磷酸化水平明显下降(P<0.05),恢复完全培养基培养后0.5h,ERK1/2蛋白的磷酸化水平即重新上升至处理前水平。去环腺苷酸激动剂处理后,ERK1/2蛋白的磷酸化水平无明显改变。结论 HU16培养基中bFGF和FBS的浓度可影响体外培养的人表皮黑素细胞中ERK1/2蛋白的磷酸化水平。
- 周妙妮许文傅丽芳洪为松关翠萍许爱娥
- 关键词：表皮黑素细胞原代培养细胞外信号调节激酶磷酸化胎牛血清
- 白癜风患者表皮角质形成细胞凋亡及其与表皮片移植疗效的关系
- 2010年
- 目的 探讨稳定期白癜风患者皮肤角质形成细胞（KC）的凋亡与表皮片移植疗效的相关性.方法 取44例稳定期白癜风患者的正常腹部皮肤和白斑区皮肤,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）检测KC的凋亡状况,同时采用免疫组化法检测28例稳定期白癜风患者KC凋亡相关蛋白Caspase 3、8、9及bcl-2、P53的表达情况.结果 TUNEL结果显示,皮损区阳性细胞数与供皮区皮肤相比差异有统计学意义.免疫组化结果：阳性反应定位于KC的胞膜与胞质,阳性细胞主要分布于表皮的中下层.白斑区Caspase 3有19例表达为阳性,而供皮区皮肤为9例.白斑区Caspase 8和9的阳性表达分别为15和16例,供皮区皮肤分别为5和4例.P53在两组标本中的表达都为阴性;Bcl-2在皮损区为阴性,供皮区皮肤中表达为弱阳性.表皮片移植失败组供皮区皮肤中凋亡的KC数目（15.83±2.69）明显多于移植成功组供皮区皮肤（9.24±1.80）.结论 白癜风患者皮损区KC凋亡比供皮区皮肤明显,凋亡相关蛋白Caspase 3、8、9表达升高.KC凋亡可能与移植疗效存在一定的相关性.
- 罗显雁许爱娥关翠萍尉晓冬郑俊惠胡晶晶
- 关键词：白癜风角质形成细胞细胞凋亡
- 个体化培养自体黑素细胞移植治疗白癜风被引量：31
- 2010年
- 目的 探讨使用个体化培养基进行自体黑素细胞培养移植治疗白癜风的疗效.方法 负压吸疱获取患者正常表皮片,制成细胞悬液,在Hu16黑素细胞选择性培养基中培养.检测黑素细胞分裂时间（DOT）和黑素含量,根据DOT的大小、黑素含量和细胞形态,调整血清、细胞因子浓度及补充内皮素-1,进行个体化黑素细胞培养.经2～5次传代后收集黑素细胞,白斑区用超脉冲CO2激光磨削后进行黑素细胞移植,随访观察复色效果.结果 共治疗155例稳定期白癜风患者的204处皮损,进行1次移植119例,进行2～4次移植36例.应用个体化黑素细胞培养后细胞扩增可达50～80倍.84.80%的皮损复色面积超过50%,其中52.94%的皮损复色画积超过90%,且复色均匀,未见瘢痕及其他不良反应.性别、年龄、病程长短和皮损面积大小对疗效没有影响.节段型白癜风移植疗效好于寻常型白癜风,两组有效率分别为93.62%和82.16%,痊愈率分别为65.96%和49.04%.手臂和腿部的皮损（不包括肘部和膝盖）移植后痊愈率达73.08%,疗效好于躯干、面颈;肢端皮损疗效最差,痊愈率仅为25.93%.结论 个体化培养技术能提高白癜风患者黑素细胞的培养成功率与细胞扩增倍数.体外培养的自体黑素细胞移植治疗稳定期白癜风疗效肯定,用少量供皮区即可治疗大面积皮损,值得临床应用.
- 张迪敏洪为松傅丽芳钱国培许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞细胞培养技术
- 自体黑素细胞培养移植治疗肢端型白癜风及相关因素分析被引量：2
- 2012年
- 白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤病，病因复杂，治疗困难，肢端型白癜风治疗更困难。自体黑素细胞培养移植是治疗白癜风的一种有效方法，近年来国内外陆续有不少使用该方法成功治疗白癜风的报道。我们在先前的黑素细胞培养的基础上，对培养基和方法进行了改进和规范，检测和计算了黑素细胞的分裂时间（DOT）、
- 洪为松傅丽芳钱国培许爱娥
- 关键词：黑素细胞细胞培养白癜风肢端自体色素脱失性皮肤病
- 培养的自体黑素细胞移植治疗二例斑驳病面部白斑被引量：2
- 2010年
- 斑驳病（piebaldism）是以色素减少为特征的先天性常染色体显性遗传皮肤病,临床上尚无有效的治疗方法.我们采用培养的自体黑素细胞移植,成功治疗2例斑驳病患者的面部白斑,报道如下.
- 罗显雁傅丽芳许爱娥王涛
- 关键词：斑驳病白斑面部常染色体显性遗传
- 自体黑素细胞移植治疗243例面颈部白癜风疗效及相关因素分析被引量：11
- 2011年
- 目的评价自体纯培养黑素细胞移植治疗面颈部白癜风的疗效及其相关因素分析。方法负压吸疱获取患者正常表皮片,Hu16培养基体外培养黑素细胞,并检测黑素细胞的分裂时间。黑素细胞经2～5代体外培养后,受皮区应用超脉冲二氧化碳激光磨削去表皮后进行黑素细胞移植。所有患者均至少跟踪观察疗效6个月。结果共治疗243例面颈部白癜风患者,78.60%的皮损获得了50%以上的复色,55.97%的皮损获得了90%以上的复色。节段型白癜风患者移植痊愈率(66.13%)高于寻常型白癜风患者(52.49%,P=0.009);病情稳定时间大于5年的患者移植痊愈率(62.50%)高于病情稳定时间小于1年(53.13%)和1～5年(53.33%)患者(均P<0.05);面部白癜风患者移植痊愈率(59.80%)高于颈部白癜风患者(47.30%,P=0.048);黑素细胞分裂时间小于等于3.5d患者移植痊愈率(69.23%)高于黑素细胞分裂时间大于3.5d患者(49.70%,P=0.004)。移植疗效与患者年龄无明显相关性。结论自体纯培养黑素细胞移植是治疗面颈部白癜风的有效方法,其移植疗效与白癜风类型、病情稳定时间、皮损部位、黑素细胞分裂时间密切相关。
- 洪为松傅丽芳尉晓冬钱国培许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞自体移植皮损部位
- 玻璃酸钠对黑素细胞生物学活性的影响被引量：2
- 2011年
- 【摘要】目的观察玻璃酸钠对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响。方法噻唑蓝法和酪氨酸酶活性测定法分别检测不同浓度玻璃酸钠对正常人黑素细胞生长和黑素合成能力的影响。结果玻璃酸钠质量浓度为0、0．008、0．016、0-313、0．625、1．250、2．500、5．000、7．500、10．000g／L时，黑素细胞增殖活性（A。）分另0为0．14±0．02、0．37±0．08、0．45±0．11、0．49±0．07、0．55±0．12、O．52±0．11、0．49±0．07、0．39±0．05、0．19±0．03、0．01±0．01，玻璃酸钠质量浓度在0．08～5g／L范围内时，对黑素细胞的增殖有明显促进作用，达10g/L时会抑制黑素细胞的增长。玻璃酸钠质量浓度在0．2～5g／L时可明显促进酪氨酸酶活性，到10g／L时酪氨酸酶活性反而下降。在接种黑素细胞同时加入玻璃酸钠的黑素细胞增殖作用明显快于接种后8h再加入玻璃酸钠组。结论玻璃酸钠在浓度0．2～5g／L时既能促进黑素细胞的增殖，又能明显提高黑素细胞的酪氨酸酶活性。
- 洪为松钱国培许爱娥
- 关键词：白癜风黑素细胞透明质酸
