国家自然科学基金(3017025)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：于湘晖孔维赵丽辉姜春来吴永革更多>>
- 相关机构：吉林大学长春理工大学解放军第302医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-1嵌合抗原的纯化及免疫原性分析被引量：2
- 2005年
- 为获得高效的H IV诊断试剂,选定H IV-1的外膜蛋白env中469-511 aa,538-674 aa和700-734 aa 3处包含较多抗原位点的区域作为免疫抗原,用PCR的方法从H IV-1全基因扩增编码这3处片段的基因序列,将它们克隆到原核表达载体中,利用大肠杆菌表达系统表达嵌合蛋白.结果发现,3段嵌合基因能在大肠杆菌BL21(Star)中表达,通过N i-sepharose 4B金属N i螯合层析柱分离纯化目的产物,酶联免疫检测结果表明,纯化抗原有较强的抗原特异性.
- 蒋静赵丽辉于湘晖姜春来吴永革貌盼勇李惟孔维
- 关键词：ENV基因免疫原性免疫学诊断
- HIV-1膜蛋白在甲醇型酵母中的表达和抗原性的研究被引量：3
- 2007年
- 通过计算机辅助分析了中国广西B/C重组亚型HIV-1病毒株的Env蛋白(共851氨基酸残基)氨基酸的疏水性、潜在的抗原表位,与其它亚型的Env蛋白在氨基酸组成的保守性方面进行了比较,选择了env基因的469-511aa,538-674aa和700-734aa三段保守性及抗原性都较强的氨基酸序列构建成嵌合基因,将嵌合基因构建到毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPICZαB中,利用甲醇诱导表达,对表达的蛋白进行了Wester blot和SDS-PAGE分析,结果表明,三段基因能在毕赤酵母Pichia pastoris中表达,产物为40kD的特异性诱导糖蛋白,通过Ni-sepharose 4B金属Ni螯合层析柱分离纯化表达蛋白,酶联免疫检测结果表明,纯化的抗原有很强的抗原特异性,可以用于HIV检测试剂的研制和开发。
- 赵丽辉于湘晖姜春来吴永革沈家骢孔维
- 关键词：毕赤酵母ENV基因嵌合基因抗原特异性
- HIV-1 gagpol重组腺病毒疫苗的构建及其免疫原性的研究
- 2013年
- 目的:构建HIV-1重组腺病毒疫苗并初步鉴定其免疫原性。方法:用Adeno-X Expression System试剂盒将HIV-1 gagpol基因片段插入到腺病毒载体上,通过脂质体介导将获得的重组腺病毒质粒Adeno-X-gagpol转染至293细胞,使之自主包装成有感染活性的重组腺病毒rAd-gagpol,用western-blotting法鉴定其表达情况;用CsCl密度梯度离心法纯化该重组腺病毒,以5×108pfu/mL的滴度1 mL单次免疫小鼠,15天后测小鼠体液免疫效果。结果:克隆序列与设计相符,重组腺病毒疫苗能稳定表达gagpol蛋白,体液免疫中检测出抗p55和p24的特异性抗体。结论:HIV-1 gagpol重组腺病毒构建成功,具有一定的体液免疫原性。
- 吕帅然丁琦姜广志于湘晖孔维张喜珍
- 关键词：重组腺病毒疫苗
