国家高技术研究发展计划(2003AA205102)
- 作品数：3 被引量：53H指数：3
- 相关作者：李宁李燕张运海潘登科孙秀柱更多>>
- 相关机构：中国农业大学北京济普霖生物技术有限公司更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 低氧培养早期胚胎克隆小型猪(Sus Scrofa)被引量：26
- 2006年
- 猪的体细胞克隆在人类的异种器官移植方面有着巨大的应用前景.以中国实验用小型猪胎儿成纤维细胞为核供体,从屠宰场采集初情期前母猪的卵巢,卵母细胞体外成熟后去核构建克隆胚胎,重构卵电融合并激活,在7%O2,5%CO2及88%N2的气相条件下NCSU-23或PZM-3培养基培养.给3头代孕母猪移植230枚克隆胚胎,其中一头妊娠足月并产下3头仔猪,生产克隆猪的效率达到1.3%;其中一头健康状况良好,存活至今,毛色及DNA微卫星遗传分析证实为克隆个体.以上结果表明,利用初情期前母猪的卵母细胞,克隆胚胎培养在低氧条件下,是生产克隆猪的一条有效途径.
- 潘登科张运海孙秀柱张健李旭阳李燕顾志良戴蕴平吴常信李宁
- 关键词：卵母细胞体外成熟核移植胚胎培养低氧
- 供体细胞对猪体细胞克隆胚胎早期发育的影响被引量：12
- 2006年
- 以中国农业大学实验用小型猪香猪胎儿成纤维细胞、成年耳成纤维细胞和颗粒细胞3种细胞系为供体细胞进行核移植。比较了血清饥饿法和接触抑制法处理胎儿成纤维细胞诱导进入G0/G1期的效率,发现二者差异不显著(P>0.05),血清饥饿2d和4d差异不明显,同样接触抑制2d和4d差异也不显著(P>0.05)。系统研究了影响克隆胚胎发育的供体因素:血清饥饿与否、细胞形态、细胞类型及个体差异等,结果表明:血清饥饿处理对克隆胚的早期发育没有明显的促进作用;圆形光滑细胞有利于细胞融合,对早期发育无显著影响(P>0.05);不同个体、不同类型的供体细胞对克隆胚囊胚发育率有一定的影响。
- 潘登科张运海孙秀柱李燕吴常信李宁
- 关键词：胎儿成纤维细胞血清饥饿细胞类型克隆胚胎
- 猪体外受精胚胎、孤雌激活胚胎以及体细胞核移植胚胎的体外培养被引量：16
- 2007年
- 目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs,开展体外培养。结果(1)IVFEs、PAEs和NTEs的卵裂率分别为72.0%,66.0%和63.5%,各组间没有显著差异(P>0.05);囊胚形成率分别为11.0%,22.6%和16.9%,也不存在明显不同(P>0.05);然而,在囊胚质量,即ICM细胞数/总细胞数的比例上,IVFEs和NTEs均优于PAEs(0.448%,0.356%vs 0.122%,P<0.05)。(2)对PAEs来讲,以PZM-3为基础培养基时囊胚率明显高于以NCSU-23为基础培养基时的处理组(35.4%vs.22.6%,P<0.05);而对NTEs而言,两种培养基在支持胚胎形成囊胚方面的效果相当(26.6%vs.21.1%,P>0.05),虽然PZM-3培养时胚胎卵裂率显著低于NCSU-23培养组(47.5%vs.63.5%,P<0.05)。结论(1)PAEs的囊胚质量在3种来源的胚胎中最差;(2)对PAEs理想的培养基,当用于NTEs培养时却不一定是最佳的选择。
- 张运海潘登科孙国杰孙秀柱李燕戴蕴平李宁
- 关键词：体外受精体细胞核移植孤雌激活体外培养
