广东省科技计划工业攻关项目(2007A060305001)
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
- 相关作者:弓莉王元占徐梅吴砂阳大庆更多>>
- 相关机构:南方医科大学南方医院南方医科大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- TLR7刺激对Balb/c小鼠树突状细胞免疫功能影响的体外研究
- 2011年
- 树突状细胞是迄今所知的功能最强的抗原提呈细胞,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。未成熟的DC主要发挥抗原摄取作用,摄取抗原后DC成熟并由非淋巴器官到归巢到淋巴结,活化机体初始性淋巴细胞,介导了细胞免疫和体液免疫。
- 弓莉王元占张志丽阳大庆徐梅吴砂卢晓
- 关键词:树突状细胞体外研究抗原提呈细胞适应性免疫
- 鼠TNF家族的B细胞活化因子ORF基因的克隆及原核表达
- 2010年
- 目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot分析。结果 RT-PCR扩增得到约930bp的cDNA,其序列与GenBank中登录的鼠BAFF ORF cDNA序列的同源性达99.9%;重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF经酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为76500,IPTG终浓度为0.9mmol/L,诱导时间为4h,目的蛋白的表达量最高,破菌上清和沉淀中均可见目的蛋白条带,可溶性蛋白的表达量占全菌总蛋白的49%;纯化的重组蛋白纯度可达90%,含量为0.9mg/ml,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了鼠BAFF ORF基因,并进行了原核表达及纯化,为进一步研究其生物功能奠定了基础。
- 弓莉王元占杨培梁刘谋荣朱玉峰曾俊岭吴湘慧
- 关键词:原核细胞基因表达
- TLR7刺激对系统性红斑狼疮易感型小鼠树突状细胞免疫功能的影响
- 2011年
- 目的研究TLR7通路对于系统性红斑狼疮易感Fas-/-MRLlpr/lpr小鼠树突状细胞免疫功能的影响。方法 从5周龄MRLlpr/lpr小鼠骨髓提取DC体外培养,以TLR7激活剂咪喹莫特处理48h,流式细胞仪检测细胞表面分子CD80、MHCⅡ表达。ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10。结果咪喹莫特处理后,树突状细胞表面抗原提呈相关分子MHCⅡ和CD80分子均降低,分泌的IFN-γ、TNF-α和IL-10均明显增加。结论 TLR7通路调节系统性红斑狼疮易感小鼠MRLlpr/lpr小鼠DC抗原呈递能力,具有影响免疫应答作用。
- 弓莉王元占张志丽阳大庆徐梅吴砂
- 关键词:树突状细胞系统性红斑狼疮