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广东省科技计划工业攻关项目(20088030301078)
作品数:
2
被引量:6
H指数:1
相关作者:
许可慰
李奎庆
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相关机构:
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广东省科技计划工业攻关项目
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微小RNA-101对前列腺癌干细胞EZH2表达及增殖迁移的影响
被引量:5
2012年
目的调控前列腺癌干细胞(PCSCs)中微小RNA-101(miR-101)表达,观察细胞中EZH2表达及其增殖迁移能力的变化。方法通过流式分选从LNcap细胞株中获取PCSCs;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Westernblot、双荧光素酶、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移实验观察miR.101对前列腺癌干细胞EZH2表达及增殖迁移能力影响。结果在PCSCs中转染miR-101后,实验组较未处理组EZH2表达量下降46%(P〈0.05);双荧光素酶实验证实PCSCs中miR-101直接调控EZH2;凋亡实验中,实验组细胞凋亡率为(3.79±0.24)%,较对照组凋亡率明显增加(P〈0.05);周期实验中,实验组细胞G1期比例为(82.95±0.78)%,较对照组比例增加(P〈0.05),细胞被阻滞在G1/S期;迁移试验中,细胞迁移率为0.38±0.01,明显低于对照组(P〈0.05)。结论过表达miR-101能下调前列腺癌干细胞中EZH2的表达并能降低细胞的增殖迁移能力。
周邦奋
李奎庆
范新兰
毕良宽
刘成
许可慰
关键词:
前列腺癌
干细胞
人膀胱癌bcl-2-siRNA慢病毒载体的构建及稳定转染细胞株的建立
被引量:1
2011年
目的构建表达人膀胱癌bcl-2基因的小分子RNA(siRNA)的慢病毒载体并建立稳定转染细胞株。方法根据GenBank提供的bel-2eDNA序列,设计3条针对bcl-2siRNA序列,分别构建pSIHI—Hl-copGFP重组质粒。筛选出最有效沉默靶基因的siRNA后,将携带目的序列的慢病毒载体转染到293T细胞中,感染膀胱癌细胞株T24,建立稳定转染细胞株。结果设计的针对bcl-2的序列中第3条的抑制效果最好,下调59.0%。以此目的序列构建稳定转染细胞株,对bcl.2mRNA抑制率达65.6%,对bcl-2蛋白的抑制率高达74.5%。结论成功构建表达人膀胱癌bcl-2-siRNA的慢病毒载体,它能有效沉默bcl-2基因在膀胱癌细胞株T24中的表达并建立了稳定转染细胞株。
许可慰
董文
李奎庆
张彩霞
黄海
韩金利
关键词:
膀胱癌
BCL-2
SIRNA
慢病毒载体
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