中国烟草总公司科技项目(110200902060)
- 作品数:9 被引量:32H指数:2
- 相关作者:夭建华李雪梅管莹高茜米其利更多>>
- 相关机构:云南烟草科学研究院昆明理工大学更多>>
- 发文基金:中国烟草总公司科技项目云南省烟草化学创新团队建设项目云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响
- 2012年
- 研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明:随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。
- 夭建华管莹高茜米其利朱洲海李雪梅缪明明
- 关键词:CHO细胞连续传代细胞毒性MTT比色法
- CHO细胞微核的激光扫描细胞仪自动化检测方法被引量:2
- 2012年
- 运用激光扫描细胞仪,采用FITC和PI两种荧光染料,结合细胞胞质分裂阻断微核技术,对环磷酰胺(CP)诱导的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞微核进行了检测,并将该方法与传统微核显微镜检法进行了比较,旨在探索CHO细胞体外微核的激光扫描细胞仪自动化检测方法.结果表明,激光扫描细胞仪方法能够准确识别胞质阻滞的双核细胞及双核细胞中的微核,环磷酰胺(CP)处理浓度与其诱导的双核细胞微核率成正相关,激光扫描细胞仪法与传统显微镜检法获得的微核率具有良好的相关性.激光扫描细胞仪检测方法能简便、经济、快速、高效地检测CHO细胞微核,适于体外培养细胞尤其是贴壁细胞微核的高通量检测.
- 龚婧婧高茜管莹李雪梅魏云林夭建华
- 关键词:自动化检测微核CHO细胞
- 微核技术研究进展被引量:17
- 2012年
- 微核试验作为检测染色体损伤最常用而有效的细胞遗传学检测方法之一,经济、简便、快速,在敏感性、特异性和准确性方面,与经典的染色体畸变分析方法基本相当。主要综述国内外微核检测技术的最新研究进展,尤其是微核的自动化检测技术。其中流式细胞仪自动化检测和激光扫描细胞仪自动化检测,以及微核试验高内涵筛选方法由于其特有的优势,应用和发展前景广阔。
- 龚婧婧黄海涛米其利倪红梅季秀玲夭建华
- 关键词:微核自动化流式细胞仪
- 卷烟主流烟气细胞毒性在5种细胞系中的反应差异被引量:2
- 2011年
- 为考察不同细胞系对卷烟主流烟气细胞毒性检测结果的影响,为我国进行烟气毒理学评价选用适合的细胞系提供试验依据,选用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)、中国仓鼠肺细胞系(CHL)、中国仓鼠肺成纤维细胞系(V79)、人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)和人肝癌细胞系(HepG2)共5种细胞系,采用中性红摄入法检测卷烟主流烟气总粒相物和气相物的细胞毒性。结果表明:5种细胞系对卷烟主流烟气总粒相物和气相物的反应敏感程度存在差异,对于烟气总粒相物,BEAS-2B最为敏感,HepG2最不敏感,CHL、V79和CHO产生的IC50差异无统计学意义;对于烟气气相物,CHO和BEAS-2B较为敏感,CHO产生的细胞抑制率与CHL、V79、BEAS-2B和HepG2的差异有统计学意义。综合考虑各细胞系对烟气总粒相物和气相物的敏感程度以及生长培养特点,认为CHO是较为理想的用于评价卷烟主流烟气细胞毒性的细胞系。
- 夭建华缪明明米其利李雪梅黄海涛唐萍
- 关键词:卷烟主流烟气总粒相物细胞毒性细胞系中性红
- CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响被引量:7
- 2012年
- 考察了CHO细胞初始接种密度对体外细胞毒性试验结果的影响。通过细胞倍增试验检测不同初始接种密度下CHO细胞倍增时间的差异,并分别采用中性红比色法及MTT比色法检测CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响。结果表明,CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验的结果存在一定影响:以2×104~6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,CHO细胞在48h内生长速度较为稳定;以4×104~6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,中性红比色法毒性试验结果较为稳定;以2×104~4×104个·mL-1为细胞初始接种密度,MTT比色法细胞毒性试验结果较为稳定。在不同的细胞毒性试验中选择适合的细胞初始接种密度有助于提高细胞毒性试验结果的可重复性。
- 管莹夭建华高茜曾婉俐黄海涛李雪梅缪明明
- 关键词:MTT比色法细胞毒性
- 应用流式细胞仪进行CHO细胞计数及存活率计算被引量:2
- 2012年
- 以CHO生物工程细胞为对象,探索了流式细胞仪在细胞计数和细胞存活率计算方面的应用。通过设定侧向角散射SS、电子体积EV及荧光强度FL3等3个参数,编制CHO细胞计数程序,再应用流式细胞仪进行细胞计数和存活率计算,其结果与血球计数板法基本一致,但操作更迅速、SD值更低,说明流式细胞仪法较血球计数板法更高效稳定。流式细胞仪法提高了生物工程的生产效率和毒理学评价的准确性,可应用于大规模细胞实验中。
- 高茜管莹米其利李雪梅缪明明夭建华
- 关键词:CHO细胞流式细胞仪血球计数板细胞计数细胞存活率
- 一种检测污染水体致突变性的快速简便方法被引量:1
- 2011年
- 采用鼠伤寒沙门氏菌TA98菌株为测试菌株,二氨基芴为阳性物,通过分析菌液体积分数、S9体积分数、阳性物质量浓度的配比关系,确定了用于污染水体致突变性检测的微量波动法的最佳反应条件。在最佳反应条件下测试TA97、TA100、TA102菌株在河流水样检测中的反应情况,确定了适用于鼠伤寒沙门氏菌系列菌株在污水检测中的反应条件。
- 胡明阳季秀玲倪红梅米其利夭建华
- 关键词:污水鼠伤寒沙门氏菌
- 体外连续传代培养对生物工程细胞CHO凋亡的影响被引量:1
- 2012年
- 采用Annexin V-FITC/PI双染法检测磷脂酰丝氨酸外翻、JC-1染色法检测线粒体膜电位、底物切割法检测Caspase-3及Caspase-8酶活性等4个指标来评估连续传代培养的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的凋亡情况。结果表明,随着连续传代培养代次的增加,CHO细胞发生内部凋亡途径介导的凋亡,同时对凋亡诱导剂的反应更为敏感。因此,可以采用凋亡指标来监测细胞状态,从而提高基因工程蛋白的生产效率及化学品毒理学评价的准确性。
- 高茜管莹曾婉俐朱洲海李雪梅缪明明夭建华
- 关键词:CHO细胞线粒体CASPASE
- FEMA对食用香料物质进行安全性评估概述被引量:2
- 2012年
- 文章综述介绍了FEMA GRAS名单的产生和由来、FEMA专家小组评估的对象、FEMA GRAS评估的四大要素、申请FEMA GRAS评估所需的数据以及FEMA GRAS基于化学组的评估方法。着重阐述了FEMA对食用香料物质进行GRAS评估时需要考虑的四大要素。包括:进行安全评估的专家必须是具有资格的权威科学家;评估应按照科学程序或1958年1月1日之前在食品中普遍使用原则进行;评估在预期的使用条件下进行;评估结果须得到普遍认同。
- 曾婉俐朱洲海高茜管莹李雪梅夭建华
- 关键词:FEMA