广东省科技计划工业攻关项目(2007A060305013)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：帅丽芳赵勇唐博恒银涛张若霜更多>>
- 相关机构：广州军区疾病预防控制中心中山大学更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- tTS真核表达载体构建及稳定转染HepG2细胞系的建立
- 2010年
- 为了构建tTS真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系,采用PCR方法,以质粒pTet-tTS为模板扩增tTS基因的编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pApoE-rtTA-Neo,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用RT-PCR、Western blot法检年测tTS的表达,成功构建了pApoE-rtTA-tTS-Neo真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的基因。真核表达载体成功构建和稳定转染HepG2细胞系的建立为进一步研究tTS的功能奠定良好的实验基础。
- 帅丽芳赵勇张若霜银涛唐博恒
- 关键词：TTS基因表达真核表达载体HEPG2细胞系
