国家自然科学基金(30270374)
- 作品数：8 被引量：58H指数：6
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- 相关机构：解放军第306医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人牙源性间充质细胞与胶原类材料复合培养的体外实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :评价胶原类材料作为牙齿组织工程研究的支架材料的可行性。方法 :将生长因子诱导后的人牙源性间充质细胞与胶原类材料复合后进行体外三维培养 ,观察细胞生长和增殖情况。结果 :细胞在胶原凝胶中生长良好 ,并保持了分化表型。细胞在胶原膜表面伸展充分 ,生长良好 ,增殖活跃 ,细胞表面可见多数分泌颗粒。结论 :胶原类材料适宜牙源性间充质细胞的生长。然而 ,它们坚韧性不高 ,而且无法为矿化组织细胞的生长提供充足的矿物离子环境。因此 。
- 包柳郁金岩史俊南牛忠英汪平赵守亮郝建军王捍国
- 关键词：胶原间充质细胞
- 人牙源性间充质细胞构建牙本质-牙髓复合体样结构的实验研究被引量：13
- 2005年
- 目的以复合生长因子的陶瓷化骨和Collagraft为载体建立人牙源性间充质细胞的体内立体培养模型,构建牙本质-牙髓复合体样结构。方法将经生长因子诱导的人牙源性间充质细胞接种于复合同种生长因子的陶瓷化骨和Collagraft复合材料上,将细胞-支架复合物移植到裸鼠皮下,建立牙源性间充质细胞的体内立体培养模型。4周和10周后取材,对移植物进行组织学观察和人牙本质涎蛋白(DSP)的免疫组化染色。结果10周的实验组标本中,植入细胞在复合生长因子支架上形成了较典型的牙本质-牙髓复合体样结构,人DSP在新生牙本质样组织中呈阳性表达。对照组及4周标本中未观察到此现象。结论用人牙源性间充质细胞和复合生长因子的陶瓷化骨或Collagraft支架材料在裸鼠体内可成功构建出牙本质-牙髓复合体样结构。
- 包柳郁金岩史俊南牛忠英汪平王捍国
- 关键词：牙本质牙髓牙本质-牙髓复合体细胞构建
- 人牙源性上皮细胞的体外培养研究被引量：9
- 2003年
- 目的 :建立人牙源性上皮细胞的体外培养方法 ,为牙齿组织工程研究提供可靠的种子细胞来源。方法 :采用组织块法原代培养人牙源性上皮细胞 ,用更换培养液类型、多次差别消化法和反复贴壁法进行纯化 ,在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况 ,用免疫荧光法检测细胞表达角蛋白和成釉蛋白的情况。结果 :原代培养的人牙源性上皮细胞生长良好 ,但有少量成纤维细胞混杂 ,经纯化后明显好转 ,上皮细胞呈片状生长 ,表达角蛋白及成釉蛋白。传至第 5代后 ,细胞逐渐变为长梭形 ,失去上皮细胞形态。结论 :体外培养的人牙源性上皮细胞在较长时间内可保持其特性 ,有望作为牙齿组织工程研究的种子细胞。
- 包柳郁金岩牛忠英史俊南汪平赵守亮王捍国
- 关键词：细胞培养免疫荧光
- 人牙源性间充质细胞向成牙本质细胞的诱导分化被引量：11
- 2005年
- 目的:建立人牙源性间充质细胞向成牙本质细胞分化的体外诱导方案。方法:应用bFGF+IGF 1或TGF β1分别对培养早期的人牙源性间充质细胞进行平面定向诱导,观察诱导后细胞的形态学改变,采用免疫荧光染色和RT PCR方法检测成牙本质细胞标志物———DSP蛋白和DSPPmRNA在诱导后细胞中的表达,并通过VonKossa染色检测诱导后细胞的矿化能力。结果:诱导后部分细胞出现单侧较长的细胞突起,表达DSP蛋白和DSPPmRNA,体外连续培养可自发形成矿化结节,出现较典型的成牙本质细胞的形态和功能特征。结论:bFGF+IGF 1或TGF β1可促进牙源性间充质细胞向成牙本质细胞分化。
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- 关键词：成牙本质细胞分化
- 人牙源性间充质细胞与陶瓷化骨支架材料相容性的实验研究被引量：9
- 2004年
- 目的:观察人牙源性间充质细胞在陶瓷化骨表面的贴附、生长和增殖情况,探讨陶瓷化骨作为支架材料应用于构建组织工程牙本质的可行性。方法:组织块法原代培养人牙源性间充质细胞并传代扩增,将经过诱导的牙源性间充质细胞接种于陶瓷化骨三维支架上,通过细胞计数和扫描电镜观察细胞在陶瓷化骨表面的生长和增殖情况。结果:人牙源性间充质细胞在陶瓷化骨表面贴附良好,有较强的增殖能力,扫描电镜见细胞在支架上伸展充分,生长旺盛,细胞表面可见多数分泌颗粒。结论:陶瓷化骨具有良好的生物相容性,可望作为人牙源性间充质细胞的载体用于构建组织工程牙本质的研究。
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- 关键词：陶瓷化骨生物材料生物相容性生物医学工程
- 牙齿组织工程无机和复合型支架材料的优选被引量：5
- 2004年
- 目的 :优选应用于牙齿组织工程的无机和复合型支架材料。方法 :将生长因子诱导后的人牙源性间充质细胞与天然珊瑚、陶瓷化骨以及Collagraft复合材料相复合进行体外培养 ,采用扫描电镜和细胞计数法观察和比较细胞在各种三维支架中的生长、增殖情况。结果 :细胞在陶瓷化骨和Collagraft复合材料表面伸展充分 ,生长良好 ,增殖活跃 ,细胞表面可见多数分泌颗粒 ,而天然珊瑚表面附着细胞很少 ,伸展不够充分 ,增殖也不明显。结论 :陶瓷化骨和Collagraft复合材料适宜牙源性间充质细胞的生长 ,可以作为构建组织工程牙齿样结构的支架材料。
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- 人牙源性间充质细胞体内立体培养模型的建立——构建组织工程化牙本质和牙髓组织被引量：6
- 2004年
- 目的 :以陶瓷化骨和Collagraft复合材料为载体建立人牙源性间充质细胞的体内立体培养模型 ,构建组织工程化牙本质和牙髓组织。方法 :将经生长因子诱导的人牙源性间充质细胞接种于陶瓷化骨和Collagraft复合材料上 ,将细胞 /支架复合物移植到裸鼠皮下 ,建立牙源性间充质细胞的体内立体培养模型。 4周和 10周后取材 ,对移植物进行组织学观察和DSP的免疫组化染色。结果 :10周的实验组标本中 ,植入的细胞在支架上形成了不太典型的牙本质和牙髓样组织 ,新生的牙本质样组织和其内侧出现极化的细胞均表达人DSP。对照组和 4周标本中未观察到此现象。结论 :用人牙源性间充质细胞和Collagraft或CBB载体在裸鼠体内可成功构建出组织工程化牙本质和牙髓样组织。
- 包柳郁金岩史俊南牛忠英汪平赵守亮郝建军王捍国
- 关键词：牙本质牙髓
- 用人牙源性上皮和间充质细胞构建组织工程化牙齿样结构的实验研究被引量：10
- 2004年
- 目的 :以人牙源性上皮和间充质细胞作为种子细胞在裸鼠体内构建牙齿样结构。方法 :将体外培养的人牙源性上皮细胞和经生长因子诱导后的牙源性间充质细胞分层接种于经塑形的陶瓷化骨或Colla graft三维支架上 ,将形成的细胞 /支架复合物移植到免疫缺陷小鼠的皮下 ,建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的体内立体培养模型。 14～ 18周后取材 ,采用HE染色、改良丽春红三色法、免疫组化和原位杂交方法检测移植物中的组织新生情况。结果 :细胞在三维支架上形成了包含釉质样组织和牙本质牙髓复合体的牙齿样结构。新生的釉质样组织表达人成釉蛋白 ,其周围残留的牙源性上皮细胞表达人釉原蛋白mRNA。同时 ,人DSP蛋白在牙本质样组织中呈阳性表达。所有对照组标本中均未观察到该现象。结论 :以优选出并经塑形的三维支架为载体 ,在裸鼠体内建立牙源性上皮细胞复合间充质细胞的立体培养模型 ,成功构建出组织工程化牙齿样结构。
- 包柳郁金岩史俊南牛忠英汪平赵守亮郝建军王捍国
