大连市科技计划项目(2010E13SF138)
- 作品数:3 被引量:4H指数:1
- 相关作者:伦永志王雪蕾冯洁迟庆张小莉更多>>
- 相关机构:大连大学北京市理化分析测试中心更多>>
- 发文基金:大连市科技计划项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 人丝氨酸蛋白酶抑制因子抗肿瘤作用的研究进展被引量:4
- 2014年
- 丝氨酸蛋白酶抑制因子在不同的生命活动调节中均具有重要意义,可调节凝血(血栓形成和血栓溶解)、血管再生、神经生长、激素转运、血压、补体和炎症。不同的丝氨酸蛋白酶抑制因子与对应的不同恶性肿瘤的进展和缓解有一定关联,使之在肿瘤治疗和诊断中具有一定意义。开展对丝氨酸蛋白酶抑制因子介导抗肿瘤活性的疗效和机制的进一步研究,有望发展成为肿瘤治疗的新方法。
- 王雪蕾伦永志
- 关键词:恶性肿瘤色素上皮细胞衍生因子
- 重组人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor Kazal结构域的原核表达、纯化及活性鉴定
- 2013年
- Hespintor是应用抑制消减杂交技术(SSH)从肝母细胞瘤细胞系HepG2中筛选得到的一未知功能蛋白,序列分析表明该蛋白属于Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(Serine proteinase inhibitor,Serpin)家族中的一个分泌型新成员,具有与食管癌相关基因2(Esophageal cancer related gene 2,ECRG2)高度同源的Serpin基本结构。为了进一步阐明Hespintor的生物学功能,必须得到纯化的Hespintor蛋白。先将Hespintor Kazal结构域编码序列亚克隆至原核表达载体pET-40b(+),转化至Rosetta(DE3)表达宿主菌中。经0.25 mmol/L IPTG,30℃诱导5 h获得了分子量约为42 kDa的Hespintor-Kazal重组融合蛋白的优化表达,Western blotting证实了重组蛋白的特异性。Hespintor-Kazal重组融合蛋白以包涵体形式在宿主菌中表达,利用金属螯合亲和层析和阴离子交换层析柱对重组蛋白进行两步纯化。初步的活性鉴定表明,纯化的Hespintor-Kazal重组融合蛋白能特异性抑制胰蛋白酶的水解活性,提示Hespintor具有作为一种新型抗肿瘤药物的潜在开发价值。
- 冯洁伦永志李越武会娟李宝明魏玲张小莉王雪蕾迟庆
- 关键词:原核表达
- 人Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子抗肿瘤作用研究进展
- 2012年
- 围绕人Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子的结构、主要成员及其抗肿瘤作用做一综述。Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子在机体内发挥重要的生理作用,具有广泛的研究和应用价值。它们在各种肿瘤中有着或高或低的表达,与肿瘤发生、发展相关,可能成为肿瘤治疗的新标靶。
- 冯洁伦永志
- 关键词:抗肿瘤作用