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国家高技术研究发展计划(2011AA02A114)

作品数：41 被引量：161H指数：8
相关作者：严延生翁育伟朱乃硕欧剑鸣张智芳更多>>
相关机构：福建省疾病预防控制中心福建医科大学复旦大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
相关领域：医药卫生生物学一般工业技术理学更多>>

文献类型

  • 41篇期刊文章
  • 7篇会议论文

领域

  • 26篇医药卫生
  • 10篇生物学
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  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 20篇病毒
  • 6篇肿瘤
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  • 5篇基因
  • 5篇分子
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  • 4篇疾病
  • 4篇肝炎
  • 4篇肝炎病毒
  • 3篇蛋白质
  • 3篇蛋白质组
  • 3篇蛋白质组学
  • 3篇荧光
  • 3篇流行病
  • 3篇流行病学
  • 3篇基因组
  • 3篇甲型

机构

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作者

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  • 4篇林志龙
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传媒

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年份

  • 1篇2021
  • 3篇2020
  • 2篇2018
  • 8篇2017
  • 4篇2016
  • 1篇2015
  • 11篇2014
  • 13篇2013
  • 5篇2012
共 41 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
毕赤酵母工程菌表达乙肝表面抗原结合蛋白(SBP)的发酵纯化工艺研究
2014年
乙肝表面抗原结合蛋白(HBs Ag binding protein,SBP)是以HBs Ag为探针,通过人肝c DNA噬菌体表达库筛选的一种人源蛋白。SBP可特异性结合乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen,HBs Ag),增强乙肝疫苗的免疫效果,是一种潜在快速高效的免疫佐剂。成功构建了分泌型高表达SBP的毕赤酵母工程菌。对该菌株进行了放大规模发酵表达,并对纯化工艺进行了研究。在发酵实时检测过程中,自诱导剂甲醇加入开始,SBP蛋白的分泌表达量随时间推移而逐渐增加,发现于38h达到最佳水平且此时杂蛋白含量最少,是放罐收集菌液的最佳时间。18L发酵液在低温离心除菌体和沉淀物后可得到15L的上清液,再利用截留量为5k Da的超滤膜包将上清液浓缩至2L,将浓缩后的上清液依次通过S200分子筛柱和TDEAE阴离子交换柱进行分离纯化,可得到300ml浓度为1.125mg/ml、纯度达98%的目标蛋白液,发酵液得率为22.5mg/L;最后将蛋白液定量分装冻干低温保存。所获得的放大规模SBP发酵诱导表达条件和SBP蛋白的分离纯化工艺,为SBP蛋白大规模生产奠定了坚实的基础。
董越苏彩霞杨艳朱乃硕
关键词：毕赤酵母发酵纯化工艺
基于ChIP-Seq进行肿瘤/睾丸抗原XAGE-1b的DNA结合位点鉴定被引量：1
2014年
XAGE-1b(X antigen family member 1B)属于XAGE亚家族,是一种肿瘤-睾丸抗原(cancer/testis antigen,CTA),表达于正常人睾丸组织和多种类型的肿瘤细胞中.本实验室前期研究发现,该基因在涎腺腺样囊性癌高转移细胞系中呈高表达.为了进一步研究XAGE-1b下游调控基因,本实验采用ChIP-Seq技术筛查XAGE-1b蛋白质可能存在的DNA结合片段.结果发现,XAGE-1b下游调控基因富集于细胞分裂(cell division,P-Value=7.95e-04)、细胞周期调控(cell cycle,P-Value=5.532e-03)、及癌症相关基因(GESA/MSigDB module_11,P-Value=2.010e-06)中.同时发现,XAGE-1b下游调控多个基因的表达产物(NCBI/interactions 22827,P-Value=4.678e-06)能与原癌基因c-Myc的启动子抑制蛋白PUF60发生蛋白质相互作用,并通过qPCR进行了验证.这些研究对阐明XAGE-1b在肿瘤细胞的增殖和转移中的作用有重要意义.
高学鹏朱嗣博赵瑞华朱乃硕
关键词：肿瘤睾丸抗原C-MYC
相对和绝对定量同位素标记技术在肝细胞癌蛋白质组学中的应用研究进展
2016年
肝细胞癌以其异质性强、早期诊断难、预后不良和致死率高等特点，成为危害我国国民健康的重要疾病。准确的早期诊断对于提高肝癌切除手术的成功率和降低术后复发与转移至关重要，其关键是早期诊断生物标志物的筛选和验证。以同位素标记相对和绝对定量技术、基于预定同位素标记氨基酸的细胞培养技术等为代表的定量蛋白质组学技术是蛋白质组学技术重要的组成部分，其中前者因其通量高、定量精度高、不受样品来源限制等优势成为定量蛋白质组学技术中的支柱型技术。现就该技术在肝细胞癌发生、发展过程的分子机制及其标志物的筛选研究进展进行综述，为深入理解肝细胞癌发生发展的分子机制和这些新发现的生物标志物的开发创造条件。
齐英姿陈凌声徐平
关键词：肝肿瘤蛋白质组学同位素标记肿瘤标志物
基于Poly(A)/二氧化硅纳米颗粒的pH可控释放抗肿瘤药物载体被引量：2
2014年
利用异喹啉类生物碱小分子化合物与腺嘌呤(A碱基)在酸性条件结合力下降的特点,以具有良好生物相容性、DNA酶切保护性以及易于生物修饰的二氧化硅纳米颗粒为载体,发展了一种基于聚A链(Poly(A))/二氧化硅纳米颗粒(Poly(A)/SiNPs)的pH可控释放抗肿瘤药物体系.在该体系中,选择了甲氧檗因(coralyne)作为药物模式分子,通过共价修饰方法在二氧化硅纳米颗粒表面修饰Poly(A),获得Poly(A)/SiNPs颗粒,通过A碱基-甲氧檗因-A碱基结合方式构建了甲氧檗因载药体系.采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜以及荧光光谱等方法对载药体系进行了表征,考察了载药体系的稳定性和在不同pH缓冲液中的释放情况,并采用激光共聚焦成像技术和MTT方法分别考察了该体系在Hela细胞内的定位以及杀伤效果.结果表明:Poly(A)被成功修饰在二氧化硅纳米颗粒上后能很好地与甲氧檗因结合,构建甲氧檗因载药体系,该体系在中性条件具有较好的稳定性,而在酸性条件下(pH<6),由于甲氧檗因与A碱基的结合力减弱而被释放出来,实现pH的控制释放.细胞成像结果显示,该载药体系能被细胞内吞并聚集于溶酶体内,通过利用溶酶体的酸性环境释放药物,实现了对肿瘤细胞的杀伤.该体系较好地实现了甲氧檗因抗肿瘤药物的装载和释放,为发展这一类抗肿瘤药物的载体提供了新方法.
何晓晓陈素叶陈冕王柯敏邹振王玉双杨淑娜
诺如病毒新重组株GII.P16/GII.2引起福建省2016年冬季病毒性胃肠炎暴发被引量：13
2017年
目的本文旨在鉴定福建省2016年冬季导致病毒性胃肠炎暴发的病原体,并对病原体进行分子特征研究。方法对疫情暴发地上送的福建省2016年胃肠炎暴发急性病例标本,采用荧光PCR初步判定病原体,常规RT-PCR检测诺如病毒RNA聚合酶和衣壳蛋白基因片段,并进行序列测定和分子特征分析。结果在3起暴发疫情中18份标本经荧光PCR检测均为诺如病毒核酸阳性,其中15份标本RT-PCR检测判为GII型诺如病毒,9份标本成功测序。分析测序结果,证实引起本轮疫情为诺如病毒新重组株,该重组株有别于本地散发流行及全球暴发流行的优势基因型GII.4。毒株RNA聚合酶核苷酸序列与2016年日本的GII.4悉尼变异株Kawasaki194毒株的同源性最高,达98%,为GII.P16亚型;衣壳蛋白核苷酸序列与2008年比利时的IPH2161-08VG06毒株同源性最高(97.7%~98.8%),为GII.2亚型。结论这是福建省首次报道诺如病毒重组株GII.P16/GII.2的检出,并引起病毒性胃肠炎暴发。
吴冰珊黄枝妙欧剑鸣齐孝旗黄业伟翁育伟
关键词：病毒性胃肠炎诺如病毒分子特征
应用于侧向免疫层析方法学的高特异性抗吗啡单克隆抗体的制备被引量：1
2013年
目的:制备高特异性抗吗啡(morphine,MOP)单克隆抗体(mAb),用于建立快速检测MOP的侧向免疫层析方法。方法:用吗啡BSA偶联蛋白(MOP-BSA)免疫纯系Balb/c小鼠并测定免疫效价后,取其脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合制备杂交瘤,通过间接ELISA及竞争ELISA法,在筛选过程中即采用自建参考品进行灵敏度和药物交叉反应评价检测,获得能稳定分泌抗MOP的单克隆杂交瘤细胞株。制备腹水并纯化获得特异性抗MOP单克隆抗体(mAb),对抗体的效价、特异性、纯度、亚类进行鉴定分析后将其应用于侧向免疫层析方法检测尿液样本中的MOP。结果:成功获得1株稳定分泌抗体的阳性细胞株,用建立的侧向免疫层析方法检测临床样品达到国内、国际市场要求的灵敏度、特异性要求。结论:成功筛选出一株稳定分泌抗MOP抗体的杂交瘤细胞株,该细胞株分泌的抗体应用于侧向免疫层析检测方法中,能快速、特异、灵敏地检测出临床样品中的MOP,为MOP快速诊断试剂的研制提供了关键材料。
康可人黄绮玲谭仙桂李悦琳唐时幸王继华
关键词：吗啡单克隆抗体POCT免疫层析参考品
乙肝病毒X与Tab1蛋白相互作用的体内外验证
2018年
目的：借助实验室前期质谱分析技术和数据分析研究基础,采用免疫共沉淀（Co-IP）和蛋白质沉降实验（GST pull-down）验证HBV X蛋白与Tab1蛋白的相互作用,为进一步研究HBx在HBV慢性感染致癌机制中的作用提供一定的实验依据。方法：成功构建pGEX-2TK-GST-HBx质粒,对GST-HBx融合蛋白进行诱导表达,与GST-beads结合孵育,构建pcDNA3.1/myc-His（-）BTab1,转染293T细胞使其表达,然后GST pull-down体外试验验证二者的相互作用;构建pcDNA3.1/myc-His（-）B-Tab1和pcDNA3.1-3×flag-HBx真核表达质粒,共转染293T和HepG2细胞使其表达,通过Co-IP实验验证抗Myc抗体可以将HBx从细胞裂解液中沉淀下来,证实了它们在两种细胞系中存在相互作用。结果：显示了HBx和Tab1在体内外条件下能够发生相互作用,为进一步明确HBV X蛋白功能及作用机制奠定基础。
于丽丽胡博李雪朱乃硕
关键词：HBVX蛋白相互作用
流行性感冒被引量：16
2020年
流行性感冒(简称“流感”)可引起全球大流行。引起流感的病原体是分节段的RNA流感病毒,流感病毒每年在人群中循环,可引起季节性流感的发生。而流感病毒在流行过程中常引发抗原的“漂移”变异,是老年人等高危人群发病死亡的主要原因之一。因此需要WHO组织全球的流感监测,经过检测分析,推测次年流行的季节性流感病毒,以应疫苗的制备。
张智芳王晓欢梁小洁林志龙严延生
关键词：流行性感冒流感病毒疫苗
Glutathione-Mediated Intracellular Drug Release from MnO2 Nanosheet Coated Mesoporous Silica Nanoparticle
Glutathione(GSH)is the mo st abundant reducing agent in live cells(1-10mM in cytoplasm),and provide a potentia...
Xue YangXiaoxiao HeDinggeng HeZhen ZouKemin WangXuecai Li
关键词：MNO2NANOSHEETS
乙型肝炎病毒疫苗免疫不应答群体中蛋白质组表达差异性的初步研究
2014年
以往研究显示,人群中约有10%无法通过接种乙型肝炎病毒(HBV)疫苗而产生保护性水平的应答。为研究HBV疫苗免疫后不应答发生的机制,本研究对108例经正常免疫程序(大连汉信产HBV疫苗,10μg/支,共接种3针)后不同应答水平人群的血浆蛋白质组差异进行分析,将其分为无应答(抗体效价检测结果为阴性)组和高应答(抗体效价约1 000mIU/ml)组。用多重亲和去除系统(MARS)亲和柱去除14种高丰度蛋白后,采用双向荧光差异电泳(2D-DIGE)与基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)相结合的方法,鉴定获得11种差异表达蛋白质。在这些差异表达蛋白质中,α1微球蛋白、激肽原1的表达在无应答人群中较高应答人群上调,而α1抗胰凝乳蛋白酶、维生素D结合蛋白、afamin、抗凝血酶Ⅲ和玻连蛋白表达下调。其中,α1抗胰凝乳蛋白酶、激肽原1和α1微球蛋白的差异性表达进一步得到酶联免疫吸附试验(ELISA)或蛋白免疫印迹法验证。以上蛋白质的表达情况与HBV疫苗免疫应答状况相关,可能成为检测HBV疫苗免疫应答水平的分子标记,为进一步研究免疫不应答机制奠定基础。
常晓月朱嗣博高学鹏朱玮朱乃硕
关键词：分子标记乙型肝炎病毒疫苗血清
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