国家教育部博士点基金(20120001120132)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：王晶克晓燕朱明霞万文丽王艳芳更多>>
- 相关机构：北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同的胞外基质对人胚胎干细胞分化为造血祖细胞的影响被引量：2
- 2014年
- 本研究建立人胚胎干细胞分化为造血细胞的新诱导体系,并探讨不同的胞外基质对产生造血祖细胞的影响。选择3种胞外基质——matrigel、纤维黏连蛋白(fibronectin)和IV型胶原蛋白(collagen IV)包被培养板,采用直接贴壁培养的诱导方法,分步添加造血生长因子诱导人胚胎干细胞向造血祖细胞分化,用造血集落形成试验检测集落形成细胞数,流式细胞术以及实时定量PCR方法检测造血特异性标志物的表达,比较这3种胞外基质对生成造血祖细胞的差异。结果表明,诱导14 d时IV型胶原蛋白组形成造血集落形成细胞数目、产生CD34阳性细胞数以及造血特异性基因SCL和CD34的表达量均明显高于matrigel和纤维黏连蛋白两组(P<0.05)。结论:人胚胎干细胞在胞外基质上直接贴壁诱导能有效地分化为造血祖细胞,且IV型胶原蛋白更有利于向造血系的分化。
- 朱明霞王晶克晓燕
- 关键词：人胚胎干细胞造血祖细胞胞外基质
- 45例多发性骨髓瘤患者细胞免疫功能变化及其临床意义被引量：7
- 2014年
- 目的 探讨多发性骨髓瘤（MM）患者细胞免疫功能变化及其临床意义.方法 45例MM患者分为初诊组（18例）、治疗后病情稳定期组（17例）和复发/难治组（10例）,以20名健康志愿者为正常对照组.采用流式细胞术检测外周血T细胞亚群、NK细胞、树突细胞（DC）、辅助性T细胞（Th1和Th2）、调节性T细胞（Treg）和Th17细胞在CD4＋细胞中所占比率.结合患者血清β2微球蛋白（β2-MG）、LDH和HGB水平进行分析.结果 ①初诊组患者Treg、NK细胞比率及CD4＋/CD8＋细胞、DC1/DC2、Th1/Th2比值较正常对照组和病情稳定期组均降低,IL-17A/Treg比值显著升高（P值均＜0.05）;与病情稳定期组相比,复发/难治组患者CD4＋/CD8＋细胞、Th1/Th2比值显著下降,IL-17A/Treg比值显著升高（P值均＜0.05）.②随着临床ISS分期增高,CD4＋/CD8＋细胞、Th 1/Th2比值明显降低,IL-17A/Treg比值明显升高（P值均＜0.05）.③MM患者CD4＋/CD8＋细胞、Th 1/Th2、DC 1/DC2比值与血清β2-MG和LDH的表达水平呈显著负相关（P值均＜0.05）;IL-17A/Treg比值与两者呈显著正相关（P值均＜0.05）;各项免疫指标与HGB水平无明显相关性（P值均＞0.05）.结论 CD4＋/CD8＋细胞、Th 1/Th2、DC1/DC2以及IL-17A/Treg比值的异常与MM患者的病情分期、疗效、发展以及预后密切相关.
- 朱明霞万文丽王晶王艳芳李海申克晓燕
- 关键词：多发性骨髓瘤树突细胞白细胞介素17
- microRNA-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化
- 2017年
- 目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向造血干/祖细胞、共同髓系祖细胞和树突细胞诱导的方案,通过形态学、流式细胞术和造血集落形成实验鉴定分化细胞;人胚胎干细胞经慢病毒转染过表达miR-223或抑制其表达后启动向树突细胞分化,比较不同miR-223表达水平下分化细胞中造血集落形成的数目和表面标记物的表达量;应用双荧光素酶报告基因检测验证TGFBR3是miR-223发挥作用的直接靶标。结果:人ES细胞成功诱导为树突细胞,分化细胞中表达CD83比例可达82%,在整个分化过程中miR-223表达呈上调趋势;添加miR-223模拟物组分化细胞表达CD34^+CD45^+、CD34^+CD45^+以及CD83^+的比例均显著高于添加miR-223抑制剂组和阴性对照组(P<0.05);添加miR-223抑制剂组分化细胞表达各阶段细胞标记物显著低于阴性对照组(P<0.05);添加miR-223模拟物组分化细胞出现大约759个CFU/105细胞数,显著高于其它各组(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示,miR-223显著抑制TGFBR3-3'UTR结构的荧光素酶活性(下降了37%)(P<0.05),而且TGFBR3-3'UTR突变型的荧光素酶活性显著高于野生型(P<0.01);随着向树突细胞分化成熟,添加miR-223模拟物组分化细胞表达TGFBR3水平逐渐下降,而添加miR-223抑制剂组由于内源性miR-223受到抑制而明显上调TGFBR3的表达。结论:miR-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化,可能通过直接作用于靶标TGFBR3而促进胚胎干细胞源树突细胞的产生。
- 朱明霞万文丽胡凯王艳芳王晶朱晓雯闫新星景红梅克晓燕
- 关键词：人胚胎干细胞树突细胞诱导分化
