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转外源法呢基焦磷酸合酶基因烟草抗赤星病研究被引量：20: 2006年; 将已克隆的薄荷(Mentha spicataL.)法呢基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,fps)的cDNA插入载体,构建CaMV35S启动子驱动下的植物表达载体pBinARfps。用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养,并在附加30 mg/L Kan的MS+0.1 mg/L IAA+1.5 mg/L BA培养基上诱导植株分化,再生芽在附加30 mg/L Kan的MS培养基上生根,再生植株。Kan阳性植株经PCR-Southern检测筛选,得到5株PCR阳性植株(K-4,K-6,K-17,K-19,K-35),证明外源fps基因在烟草基因组中的整合;Northern blot检测证明外源fps基因在转录水平进行了表达;离体叶片接种实验表明,转基因植株(T1代)对赤星病抗性明显提高。这表明fps基因在植物抗病基因工程中具有潜在应用价值。; 崔红刘海礁李雪君; 关键词：烟草基因转导赤星病

fps转基因烤烟类胡萝卜素及其降解产物的研究被引量：31: 2006年; 为探索法呢基焦磷酸合酶(fps)对烤烟中类胡萝卜素及其降解产物的影响,利用常规和GS/MS方法,对转fps基因烟草株系(K-4、K-6、K-17、K-35)烤后烟叶中类胡萝卜素含量及萜烯类香气物质含量进行了分析,结果发现,烤后烟叶类胡萝卜素含量有较大差异,与未转基因对照相比普遍有所提高,其中K-35含量最高;8种类胡萝卜素降解产物及茄酮、新植二烯含量有不同程度的提高,其中K-35香气降解产物含量整体较高,表明外源fps基因在烟草中的表达对类胡萝卜素合成具有促进作用,从而有利于烟叶品质的提高。; 李雪君崔红刘海礁王燕萍; 关键词：转基因烟草类胡萝卜素香气物质

Ri质粒介导fps基因对烟草的转化及表达被引量：5: 2007年; 为了探讨外源fps基因表达对发状根合成抗菌物质能力的影响,将含有薄荷(Mentha spicataL.)fps基因的双元表达载体质粒,通过冻融法转化到发根农杆菌菌株Ar1334中,转化菌株与烟草叶圆片共培养诱导发状根产生,共获得18个稳定的发状根无性系,在附加20 mg·L-1卡那霉素的MS培养基上,筛选到4个生长旺盛的无性系.经PCR扩增得到大小为1 kb的目的片段,PCR-Southern检测表明外源fps基因已整合到烟草发状根的基因组中,Northern blot检测证明外源fps基因在转录水平进行了表达;酶活分析显示转基因发状根株系中FPS酶活性明显高于对照,抑菌试验也发现转基因发状根汁液对赤星病菌具有较高水平的抗性,表明外源fps基因在发状根中的表达有利于抗菌物质的合成与积累.; 崔红慕平利李雪君刘梦林王哲; 关键词：烟草发状根赤星病菌

Ri质粒转化烟草影响因素的研究被引量：8: 2004年; Ri质粒转化烟草形成发状根的效率,受发根农杆菌种类、浓度、生理状态及烟草品种、叶片发育时期、叶片在菌液中浸泡时间、共培养时间、基本培养基及pH值、乙酰丁香酮不同加入方式等多种因素的影响.采用稀释5倍的处于对数生长期的ATCC15834菌株,感染Sumxun无菌苗幼嫩叶圆片5min,在pH值5.8的MS培养基上共培养2d,可达最大转化效率93.1%.; 宋志红崔红刘国顺周冀衡; 关键词：烟草 RI质粒发根农杆菌发状根基因转化

不同理化因子对烟草发状根生长及烟碱合成的影响: 烟草发状根的生长及烟碱合成受到光照条件、基本培养基浓度、初始pH值、激素种类和浓度等诸多因素的影响。固体培养条件下,发状根在黑暗中比在光下生长更为旺盛,但烟碱含量相对较低;液体悬浮培养条件下,1/2 MS培养基中生长的发...; 慕萍丽崔红宋志红刘国顺; 关键词：烟草发状根烟碱; 文献传递

烟草fps转基因发状根的离体培养及其抗菌性被引量：5: 2008年; 为研究fps基因在烟草发状根中的表达对发状根生长及物质代谢的影响,对fps转基因发状根株系k-3离体培养条件下的生长特性及抗菌性进行了研究.在摇瓶悬浮培养过程中,发状根生长呈现"S"型曲线,最初生长缓慢,到第10天开始迅速生长,25 d进入生长平台期;利用气升式内环流生物器,在25℃通气量为2 L/min,接种量为1 g的条件下培养25 d,发状根鲜重达94.7 g/L;以赤星病菌(Alternaria alternata)粗毒素为诱导子对发状根诱导培养,转基因发状根浸提液在黑胫病根刺接种试验中,能够明显提高烟草幼苗对黑胫病的抗性.; 崔红慕平利李雪君刘梦林; 关键词：离体培养抗病性

法呢基焦磷酸合酶基因的克隆及双元载体的构建被引量：9: 2004年; 以留兰香(MenthaspicataL)为材料,利用RT PCR方法克隆法呢基焦磷酸合酶基因(fps)的cDNA,核酸序列分析表明,该基因的编码区长1050bp,编码349个氨基酸.进一步将fps基因插入植物表达载体BinAR,酶切鉴定及测序结果都证明fps的植物双元表达载体构建成功,为fps基因在烟草中的异源表达奠定了基础.; 崔红郭小玲时向东刘国顺; 关键词：克隆双元载体烟草

烟草发状根的诱导和植株再生被引量：7: 2003年; 发根农杆菌Ar1334工程菌株与烟草叶片共培养,诱导的根在MS无激素培养基上呈现旺盛的生长态势和典型的发状根结构特点,并在附加0.5mg/mL KT的MS培养基上实现了植株再生。发状根经PCR检测扩增出了500bp的rolC目的片断,组织化学检测也证实了GUS基因在发状根及再生植株叶片中的表达。该体系为利用发状根进行外源基因表达,并通过大量培养进行物质生产奠定了基础。; 崔红宋志红史向东刘国顺; 关键词：烟草发根农杆菌植株再生 PCR检测 GUS基因

悬浮培养中不同理化因子对烟草发状根生长及烟碱合成的影响被引量：9: 2005年; 悬浮培养中烟草(Nicotianatabacum)发状根的生长及烟碱合成受到基本培养基浓度、初始pH值、激素种类和浓度等因素的影响。一个5cm长的根尖,悬浮在40mL、pH值为6.0、附加1.0mg.L-1IAA的1/2MS液体培养基中,28℃、散光条件下培养30天,烟碱产量可达0.241mg.mL-1。; 慕平丽崔红刘海礁赵百东; 关键词：烟草发状根烟碱根生长初始PH值基本培养基

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国家烟草专卖局基金(110200101005)