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牡山羊草Aegilops juvenalis Puroindoline b基因的克隆: 2005年; Puro indo line a(P ina)和puro indo line b(P inb)是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报道的小麦P inb基因的保守序列,设计合成了一对特异性引物,对六倍体牡山羊草A eg ilop s juvena lis(UUMM DD)的基因组DNA和胚乳cDNA进行P inb基因扩增、克隆和序列测定,发现了两个新型P inb等位基因P inb-a lle le-1和P inb-a lle le-2。该基因全长360 bp,编码119个氨基酸残基。它编码的蛋白和麦类作物Puro indo line B(P inB)的成熟蛋白有非常高的同源性,具有麦类作物P inB蛋白所特有的W PTKWW K的色氨酸结构域和10个半胱氨酸所形成的5个二硫键结构。与软粒小麦cv.C ap ito le的P inb-D 1a相比较,其核苷酸同源性为93.1%、93.3%,氨基酸同源性为90.8%、92.4%。P inb-a lle le-1和P inb-a lle le-2分别含有11和9个氨基酸变异位点。RT-PCR证实了P inb-a lle le-2基因在籽粒胚乳中的表达。Sou thern B lot分析结果表明,牡山羊草中含有两个拷贝的P inb基因,其中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因。; 陈明洁方倜罗立廷杨广笑何光源; 关键词：PUROINDOLINE 籽粒硬度克隆

消毒剂对小麦组织培养的影响被引量：10: 2005年; 通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20 min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10 min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.; 覃建兵汪越胜何光源; 关键词：消毒剂家用洗涤剂小麦

粘果山羊草Aegilops kotschyi puroindoline a基因的研究: 2005年; 根据已报道的小麦籽粒硬度主效基因之一puroindoline a(Pina)基因的保守序列,设计并合成了一对特异性引物ForA1和RevA1,对粘果山羊草Aegilops kotschyi的三个材料的基因组DNA和互补DNA进行Pina基因克隆、序列测定和表达分析,发现了三个新型Pina突变体,基因序列与六倍体小麦的同源基因存在较大的差异.RT-PCR证实了Pina基因在籽粒胚乳中表达.Southern blot分析结果表明,三种材料中该基因均含有两个拷贝.研究结果显示山羊草是一个丰富的遗传资源库,为小麦籽粒硬度的基因工程改良奠定了基础.; 陈明洁方倜刘勇何光源; 关键词：基因工程粘果山羊草籽粒硬度 PUROINDOLINE

水稻悬浮细胞诱导生成植保素的研究被引量：3: 2006年; 运用化学试剂处理水稻悬浮细胞诱导生成植保素Sakuranetin（SA）和Momilactone A（MA）．结果表明，在悬浮培养液中添加1．5mmoL／L的金属阳离子Ag^＋、Ca^2＋、Zn^2＋、Mg^2＋和Cu^2＋，都可以在一定程度上诱导悬浮细胞产生SA或MA，其中以K^＋处理效果最好；添加1．5mmoL／L的NH；也可诱导产生MA；MA的产生量显著高于SA，每20mL悬浮液中的产量可以分别高达158．9～1337．9μg和0．16～7．6μg，说明水稻悬浮细胞中存在这些阳离子的高效防御识别系统，从而开发新型绿色环保农药是可行的．; 覃建兵汪越胜何光源; 关键词：植保素水稻悬浮细胞

突变野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的整合表达: 2007年; 用定向进化的一种新方法,对野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris pv.campestris)的α-淀粉酶基因(XAMY)进行PCR体外诱变后获得了一个编码的酶活性提高的突变基因,将其克隆到由rDNA序列介导的酵母整合型表达载体pHBM368上,得到重组质粒pHBM368XA.将pHBM368XA转化酿酒酵母S.cerevi-siaeINVScI,获得了整合型分泌表达α-淀粉酶的酵母重组菌株XA01.对选择的3个工程菌α-淀粉酶表达的稳定性进行了检测,结果表明在完全培养基中连续培养80代,淀粉酶的酶活性仍然保持稳定.在淀粉酶自身信号肽引导下,胞外分泌效率可达50%.; 马向东柯涛马立新何光源; 关键词：Α-淀粉酶啤酒酵母

湖北推广小麦品种(系)高分子量麦谷蛋白亚基组成分析被引量：3: 2004年; 应用SDS-PAGE技术分析了45份湖北推广小麦品种(系)籽粒的高分子量麦谷蛋白亚基组成。40份材料的高分子量麦谷蛋白亚基组成为同质,5份为异质。在Glu-1位点共检测到9种等位基因变异类型,其中Glu-A1位点有"1、2*、Null"3种变异类型,Glu-B1位点有"7、7+8、7+9、14+15"4种,Glu-D1位点有"2+12、5+10"2种。"Null、7+8、2+12"是主要亚基,它们的频率分别是62.5%、60%和72.5%。亚基组合类型有12种,其中(Null,7+8,2+12)亚基组合占30.0%,(1,7+8,2+12)、(1,14+15,2+12)、(Null,7+9,2+12)、(Null,7+8,5+10)4种组合的频率都在10%以上,这5种亚基组合占总组合的72.5%。供试小麦材料品质评分在5～10之间,平均评分为7.0。含5+10亚基的品种(系)所占比例低,是湖北小麦烘烤品质较差的部分原因。; 刘勇何光源李同恩陈明洁何勇刚SHEWRY Peter Robert; 关键词：小麦高分子量麦谷蛋白亚基

胚龄对小麦盾片组织培养的影响被引量：2: 2005年; 研究了播种时间、取材时间和盾片大小对小麦愈伤组织诱导、器官分化和植株再生的影响.结果表明,元月初播种的材料具备很好的盾片组织培养效果,生根和绿点率都可达100%,植株再生频率平均为46%;开花后第16 d取材,生根和绿点率都达100%,植株再生频率平均达80%;达到最佳组织培养效果的的盾片大小为0.15～0.20 cm.; 覃建兵汪越胜何光源; 关键词：小麦组织培养幼胚分化

转基因小麦外源基因在主栽小麦种质中的遗传规律被引量：9: 2005年; 为了研究转基因小麦中外源品质基因1D x 5在我国主栽小麦种质中的遗传规律,以转基因小麦B 72-8-11b为父本,主栽品种川89-107和鄂麦18为母本进行杂交,采用SDS-PAGE技术检测并分析各组合亲本、F1、F2、BC1F2、BC2F1、BC2F2代的HMW-GS组成。结果表明,外源基因有效地整合到主栽小麦的基因组中,并能够遵循孟德尔遗传模式稳定地遗传给下一代。; 李三和林刚张金锐何光源; 关键词：转基因小麦

三种大肠杆菌高效感受态的制备及转化被引量：18: 2006年; 描述了一种改良的高效细菌感受态的制备和感受态细胞的保藏及细菌的转化方法.三种不同的大肠杆菌分别是DH5α,TG1和XL1blue,其中最有效的是XL1blue.每种菌株的感受态细胞制备的最佳光密度(OD600值)不同.对感受态细胞的存储时间及其与转化效率之间的关系也进行了研究,结果显示感受态细胞可以在-20℃存储7d,在-70℃存储15d.将常见的方法做了三种改进:首先是将CaCl2溶液改为TB溶液;其次是将培养基由LB换成S.O.C;再就是在质粒对感受态细胞的转化过程中加入DMSO或PEG8000.改良的细菌转化系统比常见的方法能提高转化效率约1000倍,是一种高效的细菌转化系统.; 涂知明陈明洁何光源常俊丽; 关键词：感受态细胞大肠杆菌质粒保藏

两个油菜种的染色体核型分析被引量：7: 2005年; 应用改进的染色体制片方法研究了甘蓝型油菜和芥菜型油菜的核型 .结果表明 :甘蓝型油菜和芥菜型油菜的各品种在染色体数目和核型对称性方面都是稳定不变的 .甘蓝型油菜“中双 4号”的核型公式为 2n =4x =38=2M +2 2m +14sm ,芥菜型油菜“望江凉亭”的核型公式为 2n =4x =36 =2 4m +8sm(2SAT) +4st ,它们的核型均为 2B型 .讨论了两个油菜种各栽培品种之间的核型差异 ,指出同一类型染色体在不同品种核型组成中的数量不同 ,随体存在与否及数目亦不相同 .; 刘勇林刚何光源李学宝; 关键词：油菜染色体核型

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国家高技术研究发展计划(2002AA224031)

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