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稳定表达人乳头瘤病毒16E7蛋白HaCaT细胞株的建立被引量：2: 2011年; 目的建立稳定表达人乳头瘤病毒（HPV）16E7蛋白的HaCaT细胞株。方法利用PCR及酶切技术扩增出CaSki细胞中HPV16E7基因并定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3．1（＋）中．构建真核表达质粒pcDNA3．1（＋）-HPV16E7。将重组质粒转染人HaCaT细胞，经G418筛选稳定表达HPV16E7蛋白的细胞株并予以鉴定。结果经酶切、测序鉴定构建pcDNA3．1（＋）-HPV16E7成功。RT—PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后检测到HPV16E7mRNA表达的特异性297bp条带；Western印迹可检测到E7蛋白稳定表达。结论成功构建m稳定表达HPV16E7蛋白的HaCaT细胞株。; 缪飞王秀丽王宏伟丁蕙琳吕婷张玲琳; 关键词：人乳头瘤病毒16 HACAT细胞转染

光动力疗法对表达人乳头瘤病毒16E7蛋白的HaCaT细胞株增殖和凋亡的影响: 2015年; 目的探讨氨基酮戊酸光动力疗法（ALA—PDT）对表达人乳头瘤病毒16 E7蛋白的HaCaT细胞株（简称HaCaT／HPV16 E7）增殖和凋亡的影响。方法HaCaT／HPV16 E7细胞株分为4组，即空白组、单纯光敏剂组、单纯照射组（12J／cm^2）、不同光剂量（4、8、12J／cm^2）ALA—PDT组，细胞与氨基酮戊酸（ALA）共孵育5h，采用波长630nm、功率30mW／cm^2红光照射，CCK8法检测细胞24h后存活率，流式细胞仪检测细胞3h的凋亡率，显微镜观察细胞形态。结果空白组、单纯光敏剂组、单纯照射组（12J／cm^2）、不同光剂量（4、8、12J／cm^2）AIA—PDT照射细胞24h，细胞生长存活率分别为99．15％±0．64％、98．13％±0．83％、96．85％±1．37％、68．98％±1．03％、46．03％±2．96％、23．57％±3．83％，后3组ALA—PDT组与其他3组比较，差异有统计学意义（均P〈0．05）。随着光剂量升高，细胞凋亡逐渐增加，细胞形态发生明显改变，细胞皱缩。结论ALA光动力抑制HPV感染细胞增殖并促进细胞发生凋亡，在一定光剂量范围内，呈剂量依赖性。; 缪飞王秀丽吕婷石磊张玲琳王宏伟; 关键词：氨基酮戊酸光化学疗法人乳头瘤病毒16 E7蛋白

氨基酮戊酸光动力对表皮葡萄球菌生物膜作用被引量：8: 2012年; 目的探讨氨基酮戊酸光动力（ALA—PDT）对表皮葡萄球菌生物膜的作用。方法盖玻片上培养并形成表皮葡萄球菌生物膜，激光共聚焦显微镜（CLSM）观察其结构；将实验分为不同光剂量（100～300J／cm2）的ALA—PDT组和阴性对照组及单纯红光照射组。采用活菌计数法评估AIA—PDT对生物膜细菌的杀菌作用，CLSM观察ALA—PDT对生物膜细菌活力的影响，扫描电镜检测ALA—PDT对生物膜结构的影响。结果ALA—PDT组分别给予100、200、300J／cm2红光照射后，存活的细菌数分别为（210±7．55）X10^5、（91±1．53）×10^5、（16±1．52）X10s，经统计学分析，各组和阴性对照组及单纯红光照射组之间，差异均有统计学意义（P〈0．01）；死菌／活菌比例分别为1．254±0．096、1．301±0．160、3．410±1．140，各组与阴性对照组及单纯红光照射组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。扫描电镜结果显示，生物膜结构疏松、模糊，当光剂量达300J／cm^2时，生物膜结构消失，细菌呈单菌落分布。结论ALA—PDT对生物膜有一定的抗菌作用，不仅能降低生物膜的活力，还能破坏生物膜的结构。; 李欣王宏伟王秀丽; 关键词：氨基酮戊酸光化学疗法生物膜葡萄球菌

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国家自然科学基金(30972665)