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扬州市社会发展科技攻关计划项目(YZ2010082)
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1
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吴晶涛
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CD40突变体靶向MR分子成像探针制备及体外卵巢癌成像的实验研究
被引量:5
2012年
目的探讨超微超顺磁氧化铁(USPIO)粒子负载的,CD40突变体抗体分子探针的构建方法和其生物、理化性状,以及在体外对卵巢癌的靶向作用。方法采用化学交联法将单克隆抗体交联于二巯基丁二酸(DMSA)修饰的USPIO,形成具有免疫活性的分子探针,进行磁学性能鉴定。USPIO标记的抗人CD40突变体单克隆抗体5H6(5H6一USPIO)作为实验组,USPIO标记的抗人CD40单克隆抗体5C11(5C11-USPIO)及USPIO为对照组。通过流式细胞术、共聚焦显微镜及普鲁士蓝染色分析其体外生物学特性,采用3.0TMR对探针与高表达CD40突变体卵巢癌(H08910)进行体外细胞成像。信号变化数据组问比较采用单因素方差分析和LSD检验。采用CellCountingKit.8试剂盒检测探针对H08910细胞的增殖影响。结果携带USPIO的抗CD40突变体分子探针被成功构建并分离纯化。合成的探针同USPIO相比具有相似的磁学特性和良好的稳定性。流式细胞术、共聚焦显微镜及普鲁士蓝染色证实抗体分子探针能够特异性识别H08910细胞表面的CD40突变体,对细胞H08910的增殖无影响。体外MRI显示探针同H08910细胞结合后T1、T2。值明显缩短,T2图像较对照组明显变暗。5H6-USPIO组的T2、T2’弛豫时间分别为(40.05±1.62)、(3.08±0.11)ms,短于5C11-USPIO[分别为(85.38±4.74)和(11.82±1.00)ms]和USPIO组[分别为(91.62±3.35)和(13.60±1.92)ms],差异均有统计学意义(F值分别为196.29、60.73,P值均〈0.01),而5C11-USPIO、USPIO两组T2、T2*弛豫时间差异无统计学意义(P值均〉0.05)。结论化学交联法可制备出CD40突变体单克隆抗体超顺磁氧化铁粒子探针,该探针具有良好磁学特性及较高生物活性,能够特异性识别卵巢癌细胞H08910。
罗先富
吴晶涛
胡晓华
瞿秋霞
叶靖
陈明祥
陈文新
王守安
董颖
王军
关键词:
卵巢肿瘤
磁共振成像
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