福建省教育厅资助项目(JA09084) 作品数:7 被引量:97 H指数:6 相关作者: 林瑞余 肖清铁 林文雄 刘杰 周丽英 更多>> 相关机构: 福建农林大学 更多>> 发文基金: 福建省教育厅资助项目 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
水稻根际耐镉细菌碳源代谢功能分析 被引量:1 2012年 为探明前期分离得到的3株水稻根际耐镉细菌碳源代谢特性,在进行生理生化鉴定的基础上,采用BIOLOG ECO微平板法,分析了3株细菌(菌株A、菌株B和菌株C)的碳源代谢功能。生理生化试验结果表明,3株菌均属于革兰氏阴性细菌,且均具有极生鞭毛,菌株C的生理生化鉴定为铜绿假单胞菌,菌株A与菌株B为假单胞菌属的其他种,结果与之前的分子生物学鉴定结果一致。BIOLOG分析结果表明,3株菌株在培养72 h的AWCD(平均颜色变化率)均接近最大值,在培养24 h时的AWCD存在显著差异,这种差异主要体现在对氨基酸的利用上。在对提供的31种单一碳源利用上,3株菌对N-乙酰-D-葡萄糖胺、L-精氨酸、L-天冬酰胺、甲叉丁二酸、腐胺、4-羟基苯甲酸、丙酮酸甲酯、吐温-40和吐温-80的利用率均较高,且对L-精氨酸、甲叉丁二酸、丙酮酸甲酯的利用率存在显著差异。本研究结果对深入了解耐镉菌株增殖所需要的碳源以及将来优化耐镉细菌最适培养基提供了理论依据,也为构建相应的基因工程菌提供了微生物资源。 周丽英 林素兰 李艺 林淑婷 刘杰 肖清铁 叶仁杰 林文雄 林瑞余关键词:镉 生理生化特性 BIOLOG 碳源利用 功能分析 紫苏对不同浓度镉胁迫的生理响应 被引量:29 2011年 为探讨紫苏的耐镉生理机制,通过水培试验,研究了镉离子浓度为0 mg.L-1(对照)、2.0 mg.L-1、5.0 mg.L-1、10.0 mg.L-1条件下紫苏的生长、镉富集作用及叶片的保护酶活性。结果表明,2.0 mg.L-1、5.0 mg.L-1、10.0 mg.L-1镉胁迫下,紫苏单株生物量比对照分别减少28.4%、42.4%、66.0%,不同处理间均存在极显著差异;3个镉离浓度下紫苏的镉富集量依次为462.4μg.株-1、705.0μg.株-1、609.7μg.株-1,富集系数依次为91.9、70.0、51.1,具备镉超积累能力。此外,SOD、POD、CAT酶活测定结果显示,随镉离子浓度升高,紫苏叶片的SOD活性和MDA含量显著升高,POD和CAT活性显著下降,破坏了体内保护酶系统的平衡,抑制紫苏生长。 谢惠玲 陈爱萍 张凤英 熊颖 陈艳玲 刘杰 周丽英 林瑞余关键词:紫苏 镉胁迫 生理响应 保护酶 丙二醛 紫苏叶片响应镉胁迫的蛋白质差异表达分析 被引量:8 2014年 为阐明紫苏[Perilla frutescens(L.)Britt.]响应镉胁迫的分子机制,应用营养液加镉法,采用蛋白质组学技术分析了紫苏叶片响应镉胁迫3周的蛋白质表达差异。结果表明,镉胁迫下紫苏叶片有25个蛋白发生差异表达,其中20个蛋白质得到LC-MS/MS鉴定:光合作用相关蛋白3个,能量代谢相关蛋白11个,胁迫相关蛋白1个,蛋白质代谢相关蛋白2个,基因表达相关蛋白1个,结构蛋白1个,生物合成与解毒相关蛋白1个。在浓度为2.0 mg·kg-1、5.0 mg·kg-1、10.0mg·kg-1镉胁迫下,紫苏叶片中ATP合成酶、丝氨酸羧肽酶、植物细胞色素P450均上调表达,Rubisco大亚基、核糖体蛋白S3和肌动蛋白表达均下调。光合系统Ⅱ稳定/装配因子HCF136及胁迫反应蛋白乙酰辅酶A硫酯酶在低浓度镉(2 mg·kg-1)处理下表达上调,在高浓度镉(5 mg·kg-1,10 mg·kg-1)处理下表达下调;磷酸核酮糖激酶/尿苷激酶家族蛋白在2 mg·kg-1和5 mg·kg-1镉处理时表达上调,10 mg·kg-1镉处理时不变;逆转录转座子蛋白在10 mg·kg-1镉处理时表达下调。可见,紫苏叶片通过增强能量代谢、降低光合作用、改变蛋白代谢与基因表达和提高解毒能力,增强了镉耐性。 谢惠玲 刘杰 陈珊 王经源 傅伟 李圆萍 王微 肖清铁 郑新宇 黄锦文 林瑞余 林文雄关键词:紫苏 镉胁迫 重金属污染 蛋白质组学 水稻根系响应镉胁迫的蛋白质差异表达 被引量:20 2015年 为探讨水稻根系对镉胁迫的分子生理响应,以抗镉水稻PI312777和镉敏感水稻IR24为材料,设置Cd^(2+)浓度为0、50和100μmol/L的水培试验,处理7 d后分析了水稻根系的蛋白质差异表达。结果表明,在镉胁迫下水稻PI312777和IR24根系有18个蛋白质发生了差异表达,其中的12个得到MALDI-TOF/MS鉴定。这些鉴定的蛋白功能可分四类:(1)与活性氧(ROS)胁迫相关的过氧化物酶(POD)、蛋氨酸腺苷转移酶(MAT)、类萌发素蛋白前体;(2)与谷胱甘肽(GSH)合成相关的S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)、谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(GDH);(3)与逆境胁迫相关的ABA胁迫诱导蛋白含HVA22域蛋白、ABA-胁迫-成熟诱导蛋白5(ASR5);(4)与细胞分裂调控相关的GTP结合核蛋白Ran-2。镉胁迫下SAMS和GTP结合核蛋白Ran-2在两种水稻根系均发生上调表达;MAT、POD、类萌发素蛋白前体和GS发生下调表达;依赖NADP-GDH、GDH和磷酸甘油酸变位酶在IR24根部均发生下调表达,在PI312777根部仅在100μmol/L Cd^(2+)处理发生下调表达;含HVA22域蛋白在PI312777根部上调表达,在IR24根部发生下调表达;ASR5在PI312777根部上调表达,在IR24根部的表达无显著差异;100μmol/L Cd^(2+)胁迫下60S酸性核糖体蛋白P0在水稻PI312777根部表达下调,在IR24根部表达上调。可见,镉胁迫使水稻根部ROS增加,形成氧化胁迫反应,造成毒害作用,而水稻根通过调节SAMS和GS提高GSH合成降低镉毒害。ASR5和HVA22蛋白等逆境胁迫蛋白的表达差异则是水稻品种间抗性差异的重要原因之一。 肖清铁 王经源 郑新宇 戎红 张国君 王良华 谢惠玲 李艺 陈珊 林瑞余 林文雄关键词:水稻 根系 镉 胁迫反应 蛋白质组学 铜绿假单胞菌菌剂载体的筛选 被引量:8 2016年 为将铜绿假单胞菌应用于重金属污染环境的生物修复,以硅藻土(1~3mm)、硅藻土(3~6mm)、活性炭和轻石为材料,通过测定不同材料的吸水率、菌体吸附与释放作用及制备菌剂的活菌数,筛选出适宜的菌剂载体.结果表明,在设定的载体浓度下(0~20g·L^-1),不同载体的菌体去除率随浓度提高而增大,Q值在4.90%~49.60%之间;载体负载量随浓度提高而减小,£值在923.33~82.83mg·g^-1之间;硅藻土、活性炭的Q值在30min达到最大.硅藻土(1~3mm)、硅藻土(3~6mm)、活性炭和轻石的吸水率依次为60.3%、43.3%、23.4%和33.1%;以上4种载体制备的菌剂(菌剂A、B、C和D)的活菌释放率依次为27.4%、28.8%、19.7%和37.1%.室温保存30d后,菌剂A活菌数为6.25×10^8CFU·g^-1,减少了78.4%,菌剂B活菌数为1.12×10^10CFU·g^-1,是初始值的5.38倍,菌剂C的活菌数为2.95×10^CFU·g^-1,减少了73.9%,菌剂D的活菌数为3.61×10^9CFU·g^-1.增殖了127.0%.可见,载体浓度及吸附时间显著影响其对菌体的吸附作用,3~6mm硅藻土的负载量适中,菌体存活率高,活菌释放率高,可作为铜绿假单胞菌的菌剂载体. 王微 李圆萍 谢惠玲 肖清铁 郑梅琴 陈燊 何小三 郑新宇 林瑞余 林文雄关键词:铜绿假单胞菌 菌剂 硅藻土 活性炭 水稻根际耐镉细菌的筛选与鉴定 被引量:17 2012年 为获得稻田土壤镉污染修复的微生物,采用培养基加镉平板法,从水稻根际土壤分离耐镉细菌。本研究分离得到3株耐镉菌株,经16S rDNA测序、比对,鉴定为假单胞菌属细菌。对菌株细胞形态的电镜观察、菌株生长曲线的测定结果表明,在镉处理浓度为100 mg L 1条件下,菌株生长未受明显抑制,但菌株形态发生了适应性的变化;在镉处理浓度超过300 mg L 1时,菌株生长受到明显抑制;在镉处理浓度700 mg L 1条件下,菌株仍能生长,但生长延滞期延长,对数期后的生长量亦低;对菌体镉含量分析表明,在100 mg L 1镉处理下,3株菌株菌体中的镉含量分别为9.04 mg g 1、4.96 mg g 1和28.58 mg g 1,富集系数依次为90.4、49.6和285.8。可见,分离得到的3株菌株具有较强镉耐性和镉吸收能力,将为稻田土壤重金属镉污染的修复提供重要微生物资源。 周丽英 叶仁杰 林淑婷 刘杰 肖清铁 林素兰 李艺 林文雄 林瑞余关键词:水稻 根际土壤 镉污染 细菌 测序 生长量 紫苏修复稻田镉污染效果及镉胁迫响应相关基因的表达 农田重金属污染已威胁农业可持续发展及人类身体健康。农田重金属污染土壤的修复问题已受人们高度关注。本研究选择4个不同生态型的紫苏资源,设置0.0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg·L-1 6个镉处理浓度,分析不... 谢惠玲关键词:紫苏 超富集植物 生理响应 生物修复 土壤酶 文献传递 水稻叶片对镉胁迫响应的蛋白质差异表达 被引量:24 2011年 为揭示水稻镉抗性的分子机理,以抗镉水稻品种PI312777和镉敏感水稻品种IR24为材料,在镉离子浓度为0(对照)、50和100μmol·L-1条件下水培处理7 d,应用蛋白质组学方法分析了2种水稻叶片对镉胁迫响应的蛋白质差异表达.结果表明:镉胁迫下水稻PI312777叶片中共检测到差异表达蛋白质点31个,通过MALDI-TOF/MS分析,鉴定了其中的24个蛋白质(包括20个不同蛋白质,4个重复检出蛋白质);IR24叶片中共检测到差异表达蛋白质点19个,其中15个蛋白质得到鉴定.PI312777叶片鉴定出的20个蛋白质覆盖了IR24叶片鉴定的15个蛋白质,前者有4个与光合作用相关,11个与细胞防御代谢相关,3个与其他代谢相关,2个为功能未知蛋白.与对照相比,不同浓度镉胁迫下,抗镉水稻PI312777叶片中热激蛋白、谷胱甘肽还原酶、蛋白酶体α亚基6型、果糖1,6-二磷酸醛缩酶、硫氧还蛋白和DNA重组修复蛋白均上调表达;镉敏感水稻IR24叶片中热激蛋白、谷胱甘肽还原酶、蛋白酶体α亚基6型的表达无显著差异,果糖1,6-二磷酸醛缩酶和硫氧还蛋白则下调表达.此外,DNA重组修复蛋白仅在镉胁迫的PI312777叶片中表达.水稻PI312777比IR24具有更强的镉抗性与这些差异表达的蛋白质密切相关. 肖清铁 戎红 周丽英 刘杰 林文雄 林瑞余关键词:水稻 镉 蛋白质组学 胁迫反应 双向电泳