国家自然科学基金(30400517)
- 作品数：6 被引量：36H指数：3
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- 骨髓成体干细胞在心血管疾病细胞替代治疗中的研究进展被引量：1
- 2005年
- 骨髓成体干细胞移植在心血管疾病细胞替代治疗中已经显示了强大的优越性,但目前干细胞移植还存在发生严重并发症的可能。将来成体干细胞移植用于临床还有赖于干细胞体内增殖、分化调控机制的进一步阐明和大规模前瞻性、临床随机对照试验的验证。
- 武晓静黄岚
- 关键词：病理学与病理生理学细胞替代治疗心血管疾病
- 基质细胞衍生因子1α介导小鼠内皮祖细胞修复损伤血管内膜被引量：14
- 2007年
- 目的探讨损伤血管局部表达的基质细胞衍生因子1α是否能介导内皮祖细胞参与损伤血管的再内皮化,抑制新生内膜的增生。方法培养、获取小鼠骨髓源性内皮祖细胞,采用改良的Boyden小室测定基质细胞衍生因子1α诱导的内皮祖细胞迁移及AMD3100(CXCR4的拮抗剂)对其的影响。分别将内皮祖细胞培养基、内皮祖细胞及AMD3100孵育过的内皮祖细胞经心脏穿刺注射给颈动脉损伤小鼠,在14天后取损伤血管检测内皮祖细胞募集情况、再内皮化情况及新生内膜增生情况。结果基质细胞衍生因子1α能诱导内皮祖细胞迁移(与对照组比较P<0.01),AMD3100能有效阻断该作用(AMD3100组与对照组比较P>0.05)。较多注射的内皮祖细胞成功归巢到损伤血管处(14.2±3.6个/切片),AMD3100孵育过的内皮祖细胞仅少量可成功归巢(4.0±2.5个/切片);内皮祖细胞注射能加速损伤血管的再内皮化(内皮祖细胞移植组比对照组:83.45%±5.44%比66.46%±6.16%,P<0.01),AMD3100孵育过的内皮祖细胞注射则无效(68.02%±6.68%,与对照组比较P>0.05);内皮祖细胞移植组新生内膜增生厚度(19237±1875μm2)和内膜中膜比值(0.94±0.12)均小于对照组(34676±2412μm2和1.77±0.18)及AMD3100组(32451±2081μm2和1.60±0.17)(P<0.01)。结论基质细胞衍生因子1/CXCR-4在介导移植的内皮祖细胞修复损伤血管内膜中起重要作用。
- 尹扬光黄岚赵晓辉于世勇方玉强赵景红崔斌
- 关键词：病理学与病理生理学基质细胞衍生因子1内皮祖细胞再内皮化
- 不同年龄段大鼠血清影响内皮祖细胞向成熟内皮诱导分化被引量：3
- 2007年
- 目的观察不同年龄段大鼠血清对骨髓内皮祖细胞向成熟内皮细胞诱导分化的影响。方法无菌取1-2月龄、19-26月龄Sprague-Dawley大鼠股骨和胫骨,获取骨髓单个核细胞,用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,经差速贴壁法对二次贴壁细胞在纤维连接蛋白包被的培养板或培养瓶进行体外培养,以DiI-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色和FITC-CD31染色进行鉴定;收集制备相应年龄段（1-2月龄、19-26月龄）大鼠血清,将内皮祖细胞分为老年大鼠内皮祖细胞＋老年大鼠血清组、老年大鼠内皮祖细胞＋年轻大鼠血清组、年轻大鼠内皮祖细胞＋老年大鼠血清组、年轻大鼠内皮祖细胞＋年轻大鼠血清组。体外培养的内皮祖细胞经含20%不同年龄段大鼠血清的内皮条件培养基诱导培养后,激光共聚焦显微镜检测DiI-acLDLF、ITC-UEA-1双染色阳性率,免疫组织化学检测假血友病因子表达、逆转录聚合酶链反应分别检测内皮一氧化氮合酶、血管内皮生长因子受体2表达,体外血管生成实验观察内皮祖细胞参与管形生成能力。结果年轻大鼠血清显著提高老年大鼠内皮祖细胞在内皮条件培养基诱导培养后的DiI-acLDLF、ITC-UEA-1双染色阳性率（P〈0.05）,而老年大鼠血清显著降低年轻大鼠内皮祖细胞双染阳性率（P〈0.05）;年轻大鼠血清明显促进老年大鼠内皮祖细胞在内皮条件培养基诱导培养后的血管性血友病因子、内皮型一氧化氮合酶（P〈0.01）及血管内皮生长因子受体2表达（P〈0.05）;年轻大鼠血清显著减少内皮条件培养基诱导培养后未参与血管生成的老年大鼠内皮祖细胞数（P〈0.05）。结论年轻大鼠血清可显著增强老年大鼠内皮祖细胞向内皮细胞诱导分化的能力,而老年大鼠血清可部分抑制年轻大鼠内皮祖细胞向成熟内皮细胞诱导分化;年轻大鼠血清中可能存在激发衰老个体内皮祖细胞活力的系统性血
- 朱光旭黄岚武晓静宋明宝晋军赵刚于世勇赵晓辉方玉强
- 关键词：内皮祖细胞诱导分化血管内皮生长因子受体2假血友病因子
- 骨髓基质干细胞种植体外修复内皮及对血管平滑肌细胞增生的影响被引量：15
- 2005年
- 目的探讨骨髓基质干细胞(MSCs)种植体外修复内皮的可行性及对血管平滑肌细胞增生的影响。方法培养兔血管内皮、平滑肌和人MSCs,通过细胞共培养模拟血管内皮修复过程,用流式细胞仪分析MSCs分子表型特征,免疫荧光细胞化学法观察与内皮共培养的MSCsFlk1和vWF蛋白表达,根据下室内皮生长状态及是否接种MSCs将其分为对照组、单纯MSCs组、融合内皮组、对数内皮组和MSCs种植组。氚胸腺嘧啶脱氧核苷(3HTdR)掺入检测平滑肌细胞DNA合成,Westernblot检测平滑肌细胞中增殖细胞核抗原蛋白表达。结果分离的MSCs表达基质细胞标志CD105和CD166,不表达造血干祖细胞和内皮细胞标志CD34、Flk1、vWF;与内皮共培养5天时,vWF染色仍为阴性,但约25.71%MSCs开始表达Flk1;MSCs种植组平滑肌细胞3HTdR掺入虽高于融合内皮组,但与对数内皮组比较显著降低;MSCs种植组平滑肌细胞PCNA蛋白吸光度相对值虽高于融合内皮组,但与对数内皮组比较明显减少。结论MSCs种植能抑制平滑肌细胞增生,种植在成熟内皮中的MSCs具有微环境依赖向内皮分化的能力。
- 武晓静黄岚周骐宋耀明李爱民晋军
- 关键词：干细胞骨髓内皮血管增生
- 骨髓基质干细胞种植体外修复内皮及对血管平滑肌增生的影响
- 目的探讨骨髓基质干细胞种植体外修复内皮的可行性及对血管平滑肌细胞增生的影响。方法培养兔血管内皮、平滑肌和人骨髓基质干细胞,通过细胞共培养模拟血管内皮修复过程,用流式细胞仪分析骨髓基质干细胞分子表型特征,免疫荧光细胞化学法...
- 武晓静黄岚周骐宋耀明李爱民晋军
- 文献传递
- 不同诱导条件对人骨髓基质干细胞向内皮分化的影响被引量：4
- 2005年
- 目的探讨不同诱导条件对人骨髓基质干细胞向内皮分化的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养人骨髓基质干细胞,用荧光激活细胞分选法分析骨髓基质干细胞CD34、CD105和CD166的表达率;用免疫荧光细胞化学法观察骨髓基质干细胞在细胞因子(50μgL血管内皮细胞生长因子、5μgL碱性成纤维细胞生长因子、100mgL内皮细胞生长补充因子)、内皮条件培养基或与成熟兔主动脉内皮共培养5天时vWF或和Flk1蛋白的表达。结果分离培养的骨髓基质干细胞CD34表达率为4.16%±0.16%,与阴性对照(4.06%±0.23%)相比无统计学差异,CD105表达率为90.20%±2.35%,CD166表达率为82.30%±3.22%,均明显高于阴性对照(P<0.05)。诱导前骨髓基质干细胞不表达vWF和Flk1蛋白,经血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和内皮细胞生长补充因子等细胞因子联合诱导5天时,33.42%骨髓基质干细胞开始表达vWF蛋白;与成熟内皮共培养5天时,vWF染色仍为阴性,但25.71%骨髓基质干细胞开始表达Flk1;用内皮条件培养基培养5天时,骨髓基质干细胞vWF和Flk1染色均为阴性。结论细胞因子和成熟内皮细胞均能诱导骨髓基质干细胞向内皮分化,而内皮条件培养基不能诱导骨髓基质干细胞向内皮分化。
- 武晓静黄岚周骐崔斌董红梅周音频
- 关键词：细胞生物学骨髓基质干细胞分化免疫细胞化学诱导分化
- 老年大鼠损伤血管过度增殖与内皮Jagged1表达的关系
- 2008年
- 目的探讨增龄促进大鼠损伤血管过度增殖与内皮Jagged1表达的关系。方法健康雄性SD大鼠（幼年3月龄，老年22月龄）40只随机分为对照组和胸主动脉球囊损伤组各20只，胸主动脉球囊损伤组分别于术后，术后7、14、28d（每个时间点老年与幼年组分别为5只）取靶血管行免疫组化染色观察内皮Jagged1和新生内膜增殖细胞核抗原（PCNA）的动态变化，计算28d时新生内膜与中膜比值。培养大鼠主动脉内皮和平滑肌细胞，用流式细胞法分析年龄对内皮Jagged1表达率的影响，并将内皮接种于下室、平滑肌和上室建立共培养体系，用^3H-TdR掺入和平滑肌迁移计数检测不同月龄大鼠内皮对血小板源生长因子（PDGF）刺激的平滑肌增生迁移的影响。结果老年大鼠新生内膜与中膜比值明显高于幼年大鼠（分别为0．35±0．02与0．28±0．01，P〈0．01）；与幼年大鼠比较，老年大鼠再生内皮Jagged1呈上调延迟并迅速下降的变化模式，而PCNA升高幅度大、维持时间长；流式细胞分析结果表明，老年大鼠内皮Jagged1表达率（46．6±6．3）％，低于幼年大鼠的（85．4±4．0）％，P〈0．05；PDGF（10ng／ml）能显著促进幼年和老年内皮组平滑肌细胞增生迁移，但与老年大鼠内皮共培养的平滑肌增生迁移更明显[^3H—TdR掺入：（26438±1857）cpm／孔与（16698±2076）cpm／孔，P〈0．05；迁移：（32±4）个／高倍视野与（18±5）个／高倍视野，P〈0．05]。结论老年大鼠血管损伤后内皮Jagged1上调障碍，与老龄促进平滑肌增生迁移密切相关，提示Jagged1可能参与了老龄加重损伤血管过度增殖的调控。
- 武晓静周骐孙爱军王克强邹云增葛均波
- 关键词：血管内膜内皮血管
