广西北海市科学研究与技术开发计划项目(200901059)
- 作品数：16 被引量：18H指数：3
- 相关作者：钟宇华梁华晟薛耀明苏会璇黄宇更多>>
- 相关机构：广西医科大学南方医科大学南方医院北海市人民医院更多>>
- 发文基金：广西北海市科学研究与技术开发计划项目广西科技厅自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 间歇性高糖对NRK-52E细胞抗氧化能力作用研究
- 2010年
- 目的探讨间歇性高糖抑制大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E抗氧化能力。方法实验开始72 h后,Western blot检测空白组、正常葡萄糖组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖干预组(25 nmol/L葡萄糖)、间歇性高糖干预组(5 mmol/L葡萄糖与25 mmol/L葡萄糖交替)中氧化物歧化酶-1(SOD-1)、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)在NRK-52E细胞表达。一氧化氮合酶(eNOS)试剂盒应用液闪仪测定3[H]的放射强度,活性氧(ROS)含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果高浓度葡萄糖及间歇性高糖均下调SOD-1及NADPH表达,而提高ROS含量,间歇性高糖作用更显著。间歇性高糖eNOS含量低于持续性高糖组。结论间歇性高糖抑制肾小管导管上皮细胞抗氧化能力显著。
- 梁华晟钟宇华
- 关键词：间歇性高糖抗氧化应激NRK-52E细胞
- 高糖状态下甲状旁腺素受体1对乳腺癌的作用机制研究
- 2015年
- 目的阐明高糖状态下甲状旁腺受体1(PTH1R)对乳腺癌细胞株SHZ-88的作用机制。方法应用实时(real time)PCR分别检测0(对照组)、5、15、25mmol/L葡萄糖浓度下PTH1R mRNA水平;构建出PTH1R基因沉默(siPTH1R)的细胞模型后,分别应用MTT法、TUNEL-FITC/Hoechst33258及Western blot法检测对照组、25mmol/L葡萄糖处理组(高糖组)、25mmol/L葡萄糖处理的阴性PTH1R基因序列组(高糖siPTH1R-NC组)及高糖阳性PTH1R基因序列组(高糖siPTH1R组)细胞活力、细胞凋亡情况及Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果随着葡萄糖浓度升高,PTH1R mRNA水平增高,其中25mmol/L葡萄糖处理后PTH1RmRNA水平最高(均P<0.01);高糖siPTH1R组细胞活力(P<0.05,P<0.01及P<0.01)及Bcl-2表达(均P<0.01)低于对照组、高糖组及高糖siPTH1R-NC组;高糖siPTH1R组中细胞凋亡水平及Bax表达高于对照组、高糖组及高糖siPTH1R-NC组(均P<0.01);与对照组比较,高糖组细胞活力(P<0.01)及Bcl-2表达(P<0.01)增高,而Bax表达(P<0.01)降低。结论高糖状态下PTH1R表达水平与SHZ-88细胞增殖能力有关,抑制PTH1R表达可能为糖尿病合并乳腺癌治疗有效靶点之一。
- 梁华晟钟宇华
- 关键词：细胞存活葡萄糖
- 罗格列酮对高糖及间歇性高糖诱导NRK-52E细胞NF-κB及肿瘤坏死因子-α上调的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨罗格列酮对高糖及间歇性高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E中NF-κB及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的抑制作用。方法:作用72h后,Westernblot检测空白组(0mmol/L葡萄糖)、正常葡萄糖组(5mmol/L葡萄糖)、高糖干预组(25μmol/L葡萄糖)、间歇性高糖干预组(5mmol/L葡萄糖/25mmol/L葡萄糖交替)、罗格列酮干预组(20μmol/L罗格列酮)、罗格列酮高糖干预组(20μmol/L罗格列酮预处理后在高糖培养)、罗格列酮间歇性高糖干预组(20μmol/L罗格列酮预处理后在间歇性高糖培养)中NF-κB及TNF-α及在NRK-52E细胞的表达。细胞ROS含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果:高浓度葡萄糖及间歇性高糖均上调NF-κB及TNF-α表达,ROS含量显著上升,其中在间歇性高糖作用更显著。应用罗格列酮干预后可以下调高糖或间歇性高糖中NF-κB及TNF-α表达,细胞ROS含量下降。结论:罗格列酮可下调高糖及间歇性高糖诱导NRK-52E细胞NF-κB及TNF-α表达。
- 钟宇华梁华晟苏会璇
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α间歇性高糖高糖NRK-52E细胞NF-ΚB罗格列酮
- 甲状旁腺素相关肽对INS-1细胞株增殖的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨甲状旁腺素相关肽(PTHrP)对大鼠胰岛β细胞瘤株INS-1胰岛素分泌的促进作用。方法:分别应用不同浓度PTHrP干预INS-1细胞,应用MTT法检测细胞生长活力,然后应用Western blot检测细胞Ki67、PDX-1、Bax及Bcl-2的表达,BrdU免疫荧光检测细胞增殖情况。结果:PTHrP具有浓度依赖性的促进INS-1细胞增殖,PTHrP显著上调Ki67、PDX-1及Bcl-2表达,下调Bax表达,PTHrP干预后细胞BrdU表达增高。结论:PTHrP可以促进胰岛β细胞增殖。
- 梁华晟薛耀明钟宇华
- 关键词：细胞增殖甲状旁腺素相关肽INS-1
- 高糖诱导NRK-52E细胞甲状旁腺素相关肽及其受体1表达及氯沙坦干预研究被引量：2
- 2010年
- 为探讨甲状旁腺素相关肽（PTHrP）及其受体1（PTH1R）在高糖诱导大鼠。肾小管导管上皮细胞株NRK-52E表达及氯沙坦对其表达干预作用。应用RT—PCR及Western印迹检测空白组（0mmol／L），正常葡萄糖组（5mmol／L）、中高浓度葡萄糖组（16．7mmol／L）及高浓度葡萄糖组（25mmol／L）中PTHrP及PTH1R在NRK-52E细胞表达。然后10μmoL／L氯沙坦及25mmol／L葡萄糖分别干预72h，应用Western印迹检测PTHrP及PTH1R表达情况。结果发现高浓度葡萄糖能上调PTHrP／PTHlR蛋白（PTHrP：0．63±0．12，0．68±0．06，1．02±0．11和1．04±0．08；PTH1R：0．88±O．05，0．87±0．10，1．05±0．11和1．12±0．09）及mRNA表达（PTHrP：0．66±0．08，0．84±0．13，1．57±0．15和1．73±0．21；PTH1R：0．26±0．08，0．28±0．07，2．35±0．10和2．47±0．05）。氯沙坦能显著下调高浓度葡萄糖状态下PTHrP及PTH1R表达（PTHrP0．74±0．15，PTH1R0．98±0．06，均P〈0．01）。提示氯沙坦可以抑制高浓度葡萄糖诱导PTHrP／PTH1R的表达水平，从而可能影响肾小管导管上皮转分化。
- 梁华晟钟宇华
- 关键词：甲状旁腺素相关肽氯沙坦NRK-52E细胞
- 甲状旁腺激素受体1在糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的观察甲状旁腺激素受体1(PTH1R)在糖尿病合并乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测32例糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者及71例非糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者组织PTH1R表达,并结合临床预后进行对比分析。结果乳腺浸润性导管癌组织中,糖尿病患者PTH1R阳性表达率高于非糖尿病患者(P<0.05)。PTH1R表达水平随着糖尿病合并乳腺浸润性导管癌患者预后不良而升高。结论糖尿病状态下PTH1R表达水平与乳腺浸润性导管癌预后有关,抑制PTH1R表达可能为糖尿病合并乳腺癌治疗有效靶点之一。
- 黄宇梁华晟钟宇华韦海明
- 关键词：糖尿病
- 特异性针对大鼠甲状旁腺激素受体1基因siRNA表达载体构建及鉴定被引量：4
- 2010年
- 目的:构建并筛选携带针对大鼠甲状旁腺激素受体1基因的pSUPERretro-GFP/Neo干扰逆转录病毒载体及鉴定。方法:根据Genbank筛选甲状旁腺激素受体1基因3个阳性克隆及1个阴性克隆序列,定向克隆入逆转录病毒载体pSUPERretro-GFP/Neo,并用RT-PCR和测序鉴定,将其转染至胰岛素-1细胞中,Westernblot观察甲状旁腺激素受体1基因表达,鉴定其转染效率。结果:菌落RT-PCR及基因测序鉴定结果表明序列正确,并能成功转染到胰岛素-1细胞株中,Western blot筛选最佳抑制基因。结论:成功构建并筛选出特异性沉默大鼠甲状旁腺激素受体1基因的pSUPERretro-GFP/Neo干扰逆转录病毒载体,为深入探讨大鼠甲状旁腺激素受体1基因的抗凋亡作用奠定了试验基础。
- 梁华晟薛耀明钟宇华
- 关键词：小分子干扰RNA转染RNA干扰
- 不同浓度葡萄糖对INS-1细胞PTHrP及PTH1R表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨不同浓度葡萄糖对INS-1细胞PTHrP/PTH1R表达的影响以及对细胞增殖的作用。方法将大鼠胰岛细胞瘤细胞株根据不同干预条件分为空白对照组,正常葡萄糖组(5mmol/L)组及高浓度葡萄糖(30mmol/L)组,培养96h应用MTT检测各组细胞活力,应用Western blot及RT-PCR检测PTHrP/PTH1R蛋白及mRNA表达。结果空白对照组及高浓度葡萄糖组细胞活力比正常葡萄糖组下降,高浓度葡萄糖组细胞活力低于无糖组,PTHrP和PTH1R蛋白或mRNA在高浓度葡萄糖组中表达显著下调。结论不同浓度葡萄糖可以通过调控PTHrP/PTH1R的水平从而影响INS-1的增殖。
- 梁华晟薛耀明钟宇华
- 关键词：甲状旁腺素相关肽Β细胞葡萄糖
- 甲状旁腺激素相关肽在高糖诱导NRK-52E细胞转分化中的作用
- 2010年
- 目的探讨甲状旁腺素相关肽在高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E转分化作用。方法应用RT-PCR及Western blot检测无糖组(无糖培养基培养),正常葡萄糖组(含5mmol/L葡萄糖DMEM培养基培养)组及高浓度葡萄糖组(含16.7mmol/L葡萄糖DMEM培养基培养)中甲状旁腺素相关肽(parathyroid hormone-related peptide,PTHrP)及其受体1在大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E表达。10pmol/L PTHrP及16.7mmol/L葡萄糖分别干预72h,应用Western blot检测转化因子β、金属蛋白酶2、Ⅰ型胶原及α平滑肌肌动蛋白表达情况。ROS含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果与空白组和正常葡萄糖组相比,高浓度葡萄糖能显著上调PTHrP(P<0.05,P<0.01)和甲状旁腺激素受体1(Type1receptor parathyroid hormone-related protein,PTH1R)(P<0.01,P<0.05)蛋白及PTHrP mRNA(P<0.01)表达,PTH1R mRNA在高浓度及正常葡萄糖浓度组的表达高于空白组(P<0.01)。对比空白组,PTHrP能显著上调NRK-52E细胞转化因子β1(P<0.01)、Ⅰ型胶原(P<0.01)及α平滑肌肌动蛋白(P<0.01)表达,而在高浓度葡萄糖状态下,其表达上调更显著(P<0.05,P<0.01)。金属蛋白酶2在PTHrP及高浓度葡萄糖共同干预下表达上调(P<0.01)。PTHrP及高血糖均可以升高NRK-53E细胞ROS含量(P<0.01,P<0.01)。结论高浓度葡萄糖可能通过调控PTHrP/PTH1R的水平从而影响肾小管导管上皮转分化。
- 梁华晟钟宇华
- 关键词：细胞转分化NRK-52E细胞体外研究
- 氯沙坦对高糖诱导NRK-52E细胞甲状旁腺素相关肽及其受体1表达的影响被引量：1
- 2009年
- 甲状旁腺素相关肽（PTHrP）及其相关受体甲状旁腺激素受体1（PTH1R）在近年来被发现参与了肾小球及肾间质纤维增殖进程。我们观察大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E中PTHrP及PTH1R在高糖状态下的表达情况，并探讨氯沙坦对其影响。
- 梁华晟钟宇华
- 关键词：甲状旁腺素相关肽氯沙坦高糖诱导纤维增殖
