国家自然科学基金(31272096)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：安徽农业大学安庆师范学院更多>>
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- 金龟子绿僵菌MicroRNA在蝉蜕和蚕血淋巴诱导下的差异表达分析
- 2013年
- 金龟子绿僵菌是一类应用广泛的昆虫病原真菌,在害虫的防治中起着重要作用。研究发现MicroRNA能调控基因表达,继而调控生物体生长发育的各个重要环节。本研究采用特异的茎环RT-qPCR方法,对15个绿僵菌miRNA进行不同诱导条件下的差异表达分析;结果表明,在蝉蜕诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达水平呈现下降趋势;在血淋巴诱导过程中,15个绿僵菌miRNA的表达量差异存在以下2种情况:即man-miR-2等表达水平显著升高或者man-miR-6等显著下降。这些显著差异表达的miRNA可能在绿僵菌侵染昆虫的过程与定殖于昆虫体内发挥相应重要的作用。
- 汪章勋周权孟慧敏张军黄勃
- 关键词：金龟子绿僵菌MICRORNA
- 球孢白僵菌DNA甲基转移酶基因Dim-2的克隆及其表达分析被引量：1
- 2014年
- 本研究运用RACE技术,从球孢白僵菌中克隆出完整的DNA甲基转移酶基因Dim-2的编码区序列。该基因c DNA全长4021 bp,5′端非翻译区283 bp,3′端非翻译区303 bp,开放阅读框(ORF)3429 bp,编码1142个氨基酸。蛋白理论分子量为128 k D,理论等电点为6.13。结构域分析显示,该基因编码蛋白含有1个BAH结构域和合成5-甲基胞嘧啶的活性区域。Real-time PCR与HPLC检测表明,球孢白僵菌DNA甲基化程度会随着其生长发育的变化而不断改变。结果显示,球孢白僵菌Dim-2基因的转录表达量与基因组DNA的5-甲基胞嘧啶百分含量在菌体培养初始产孢阶段(即培养第7 d),均出现了1个低谷。这可能意味着球孢白僵菌Dim-2基因所引起的DNA甲基化与其生长发育之间具有内在的联系。本研究将为进一步探索DNA甲基化在虫生真菌生长发育中具体功能机制奠定基础。
- 汪超谢翎黄勃
- 关键词：球孢白僵菌DNA甲基转移酶DNA甲基化表观遗传学
- 蝉棒束孢交配型基因的分析和检测被引量：5
- 2015年
- 蝉棒束孢Isaria cicadae为药用真菌蝉花的无性型,在防治同翅目害虫上具有重要作用。在自然状态下蝉棒束孢多以孢梗束状态存在,其子实体阶段极为少见。交配系统是真菌有性生殖过程中的决定因素,因此可从交配型的角度探究蝉棒束孢有性子实体稀少的原因。本研究运用RACE技术首次从蝉棒束孢中克隆出MAT1-1-1与MAT1-2-1全长c DNA序列,并进行生物信息学分析。根据c DNA序列设计并优化得到蝉棒束孢交配型鉴定引物,并对采集自安徽地区40株蝉棒束孢交配型进行鉴定,结果表明交配型MAT1-1菌株14株、MAT1-2菌株26株,并没有检测到同时含有两种交配型或两种交配型全部缺失的现象,因此蝉棒束孢有性型子实体几无发生的现象并不完全归因于交配型因素。
- 高扬章西黄勃
- 关键词：基因克隆
- 金龟子绿僵菌小RNA通路相关Dicer,Argonaute基因的功能研究
- 金龟子绿僵菌是一类应用广泛的昆虫病原真菌,在害虫的防治中起着重要作用。非编码小RNA(长约20-30核苷酸)广泛存在于动植物体内,其主要功能是基因转录后调控基因的表达,继而调控生物体生长繁殖的重要环节。我们首先对金龟子绿...
- 孟慧敏汪章勋王玉龙黄勃
- 关键词：金龟子绿僵菌DICERARGONAUTE
- 文献传递
- 绿僵菌Argonaute基因片段原核表达载体的构建及其表达被引量：3
- 2013年
- 绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌。研究表明小RNA能够调控基因的表达,其中Argonaute基因在整个小RNA通路中发挥重要的作用。本研究通过RT-PCR的方法从绿僵菌中获得了Argonaute基因的部分功能片段,构建了其重组原核表达载体,将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表达;采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Western blot技术鉴定。结果发现:通过RT-PCR的方法获得长度约为950bp的基因片段;重组原核表达载体经诱导表达后,SDS-PAGE检测发现分子量约为34kDa的目的蛋白条带;诱导5h后蛋白的表达量最高,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,经Western blot技术检测,重组蛋白可与His-tag抗体发生特异性反应。该纯化重组蛋白的获得为将来绿僵菌Argonaute蛋白抗体的制备,并进一步通过该抗体获得绿僵菌体内的小RNA及其靶基因提供了基础。
- 汪章勋孟慧敏周权
- 关键词：绿僵菌原核表达
