吉林省发改委资助课题(JF2012C008-3)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 大鼠脑源性神经营养因子的克隆及原核重组表达载体的构建
- 2013年
- 目的:构建重组表达载体pGEX-脑源性神经营养因子(BDNF),探讨其原核表达BDNF的可行性。方法:大鼠BDNF进行密码子优化,人工合成BDNF的全基因序列,经回收、纯化、酶切后连接到pGEX原核表达载体中,将重组质粒pGEX-BDNF转化大肠杆菌BL21细胞中,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,利用ELISA方法鉴定其表达的活性。结果:PCR鉴定及测序显示BDNF序列完全正确,BDNF基因的克隆和表达载体构建成功,IPTG诱导表达目的蛋白经ELISA检测,其表达的目的蛋白具有一定的活性。结论:经密码子优化后经人工合成得到BDNF基因片段并成功构建pGEX-BDNF重组表达载体,具有一定的生物活性。
- 何玉梅邢影常春娣侯玲玲
- 关键词：大鼠脑源性神经营养因子密码子优化表达载体构建ELISA检测
