中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(XDJK2009C163)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 氯化锶对去透明带卵母细胞孤雌激活效果及孤雌胚胎体外发育体系的研究
- 2012年
- 本实验以昆明小鼠为研究对象,探讨了5 mmoL/L、10 mmoL/L及20 mmoL/L氯化锶(SrCl2)激活去透明带MⅡ期卵母细胞的效果,并比较了孤雌激活卵母细胞在普通DMEM培养液与添加有10 ng/mL有白血病抑制因子(LIF)的DMEM培养液中的体外发育率,旨在探讨去透明带卵母细胞适宜的SrCl2孤雌激活浓度及孤雌胚胎体外培养体系。结果表明:10 mmoL/L与5 mmoL/L SrCl2作用6 h所得激活率差异不显著(46.00%vs 40.38%,P>0.05),但显著高于20 mmoL/L SrCl2的激活率(46.00%vs 24.62%,P<0.05);将10 mmoL/L SrCl2激活处理6 h后得到的激活胚胎分别以DMEM培养液和LIF+DMEM培养液培养48 h,其桑葚胚分化率分别为44.00%及84.62%,组间差异显著(P<0.05)。因此,宜采用10 mmoL/L SrCl2激活去透明带MⅡ期卵母细胞,并移入到10 ng/mL LIF+DMEM培养液进行体外培养。
- 何允肖雄邓玉金赵海龙李跃民
- 关键词：孤雌激活氯化锶
- 昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响
- 2012年
- 本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4～5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3～4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1～2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显著降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3～4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。
- 张翠平邱小燕肖雄赵海龙邓玉金李跃民
- 关键词：胚龄培养液ICM昆明小鼠
- 不同体细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响
- 2011年
- 为研究小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、颗粒细胞及子宫内膜细胞共培养体系对小鼠胚胎早期发育的影响,试验采用将小鼠体内受精2-细胞与这些体细胞共培养的方法。结果表明,第3代MEF共培养组的桑囊胚发育率、囊胚孵化率及囊胚细胞数显著高于第1或第6代MEF共培养组(P<0.05);颗粒细胞、子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的过2-细胞阻滞率和桑囊胚发育率均显著高于对照组(P<0.05);子宫内膜细胞或第3代MEF共培养组的囊胚孵化率和囊胚细胞数均显著高于颗粒细胞共培养组和对照组(P<0.05),但前两共培养组的上述指标差异不显著(P>0.05)。
- 赵芳肖雄李跃民赵海龙邓玉金张建娜
- 关键词：胎儿成纤维细胞颗粒细胞子宫内膜细胞共培养
