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猪链球菌2型MRP和EF双基因共表达重组腺病毒载体的构建: 2013年; 旨在构建猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)双基因共表达重组腺病毒载体。根据猪链球菌2型MRP和EF的基因序列设计合成2对引物,以猪链球菌2型基因组为模板,扩增MRP基因(第1 801-2 513位)和EF基因(第1 783-2 563位)序列,并克隆到pMD18-T载体。然后将MRP基因、IRES元件和EF基因依次定向克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP-IRES-EF,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒载体质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR鉴定。结果表明,克隆的MRP和EF基因测序正确,酶切重组穿梭质粒和腺病毒载体质粒得到特异酶切产物;线性化的重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF转染AD-293细胞6 d后也出现明显的细胞病变(CPE),在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP和EF基因片段。; 汪涛余辉梅钧李兴暖周小鸥赵志军; 关键词：猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白双基因共表达重组腺病毒载体

弓形虫感染对宿主中枢神经系统的影响被引量：4: 2014年; 弓形虫是一种世界范围内广泛分布的机会性致病原虫,能感染包括人在内的所有温血动物,能引起人兽共患的弓形虫病,严重威胁着人类健康和畜牧业生产。目前,脑内弓形虫感染越来越受到重视,论文重点阐述了弓形虫从感染到进入中枢神经系统后感染急性阶段逐渐向慢性阶段转化的整个过程中和中枢神经系统之间的相互作用,并对其导致的相关神经系统症状进行了简要概述,旨在为进一步深入理解弓形虫和宿主之间的关系提供一定的参考,在将来的研究中弓形虫和中枢神经系统之间相互作用的机制也会被进一步揭示。; 汪涛余辉王中平; 关键词：弓形虫中枢神经系统相互作用

地塞米松对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫作用的影响: 2014年; 目的研究地塞米松(Dexamethasone,DXM)对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染的影响。方法采用瑞-姬染色观察弓形虫在与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞内的增殖;以半定量RT-PCR法检测与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-2mRNA的表达,以ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、TNF-α和IL-2的含量。结果弓形虫在DXM孵育的腹腔巨噬细胞内大量增殖,其弓形虫密度0h为(37±7)个/100个细胞,而24h时为(173±32)个/100个细胞(P<0.01);与DXM共孵育大鼠腹腔巨噬细胞24h时的IL-2、IFN-γ和TNF-αmRNA及其蛋白的表达与对照组相比均明显降低(P<0.01),如:DXM孵育组的TNF-α(187.52±39.41pg/ml)与对照组(115.43±22.46pg/ml)相比差异显著(P<0.01)。结论 DXM可诱发腹腔巨噬细胞易感弓形虫,其机制可能与细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2表达下调有关。; 汪涛李金福王伟业李兴暖周小鸥赵志军; 关键词：地塞米松大鼠腹腔巨噬细胞弓形虫细胞因子

弓形虫病:速殖子、包囊和卵囊的传播被引量：7: 2012年; 目的弓形虫是一种世界范围内广泛分布的机会致病原虫,能感染包括人在内的所有温血动物,能引起人兽共患弓形虫病,严重威胁着人类健康和畜牧业生产。本文重点阐述弓形虫速殖子、包囊和卵囊的生物学特性和传播特点。; 汪涛汤自豪; 关键词：弓形虫生物学特性

弓形虫感染与男性不育研究新进展被引量：7: 2013年; 弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,能感染包括人在内的所有温血动物。众所周知弓形虫感染孕妇可导致早产、流产、死胎、畸胎等严重后果,而弓形虫感染导致的男性不育却长期未受到足够重视。本文就近年来有关弓形虫感染致精子、生殖细胞的损伤以及睾酮和一氧化氮(NO)分泌的异常而致男性不育的相关研究进展进行综述。; 汪涛汤自豪; 关键词：弓形虫精子生殖细胞睾酮男性不育

地塞米松对大鼠腹腔巨噬细胞抗弓形虫感染及细胞因子分泌的影响被引量：1: 2014年; 为探讨地塞米松(DXM)对大鼠腹腔巨噬细胞抗刚地弓形虫(T.gondii)和细胞因子分泌的影响,将大鼠随机分为2组,即DXM注射组和空白对照组,连续注射6d,再抽取腹腔巨噬细胞后分为4组,即DXM组和DXM+T.gondii感染组;对照组和T.gondii感染组。通过瑞-吉染色观察T.gondii在巨噬细胞内的增殖;并用半定量RT-PCR检测DXM组和对照组的大鼠腹腔巨噬细胞IFN-γ、TNF-α和IL-2mRNA表达情况用ELISA检测4个试验组细胞培养上清液中3种细胞因子的含量。结果显示,在正常大鼠腹腔巨噬细胞内T.gondii不增殖反而减少,而在DXM注射大鼠后巨噬细胞内T.gondii大量增殖;同时与T.gondii感染免疫密切相关的这3种细胞因子mRNA及其蛋白的表达均被DXM明显抑制。试验表明,大鼠腹腔巨噬细胞对T.gondii具有明显的抗性;但DXM又可诱发腹腔巨噬细胞易感T.gondii,这一结果与细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2表达下调有关。; 汪涛李金福李兴暖梅钧龙锴汤自豪赵志军; 关键词：地塞米松大鼠腹腔巨噬细胞弓形虫细胞因子

含猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因片段的重组腺病毒构建与鉴定: 2013年; 目的构建猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)基因片段的重组腺病毒并对其进行鉴定。方法根据MRP的基因序列,设计合成1对引物,以SS2型基因组为模板,扩增MRP基因片段(467-1351)序列。将PCR产物通过pMD18-T载体克隆后,再连接至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR和Western blot法鉴定。结果重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP转染AD-293细胞8 d后出现明显的细胞病变,在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP基因片段及其表达的蛋白。结论成功构建了SS2型MRP基因片段的重组腺病毒(rAdeno-MRP)。; 汪涛汤自豪周小鸥余辉周英棠; 关键词：猪链球菌2型重组腺病毒

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江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ12624)