国家自然科学基金(81160326) 作品数:13 被引量:25 H指数:4 相关作者: 吴勇 付帅 陈文飞 岳万远 吴勇 更多>> 相关机构: 昆明医科大学 昆明医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省科技计划项目 云南省科技厅科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27细胞侵袭性作用的实验研究 被引量:2 2020年 目的研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人舌鳞癌Cal-27细胞侵袭影响及其作用机制。方法制备0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L的GAA作用于人舌鳞癌Cal-27细胞,通过Transwell实验检测GAA对人舌鳞癌Cal-27细胞侵袭能力的影响;通过qRT-PCR及Western blot实验检测GAA对人舌鳞癌Cal-27细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrix Metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA及蛋白的表达变化。结果Transwell实验显示:GAA对人舌鳞癌Cal-27细胞细胞侵袭产生抑制作用,实验组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR实验及Western blot显示,实验组人舌鳞癌Cal-27细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白的表达降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论GAA能抑制人舌鳞癌Cal-27细胞的侵袭性,并降低人舌鳞癌Cal-27细胞MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白表达水平,这可能是GAA抑制肿瘤侵袭作用的机制之一。 陈思宇 付帅 吴勇关键词:人舌鳞癌 醋酸棉酚 细胞侵袭 基质金属蛋白酶-2 醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞生长及人类错配修复基因1甲基化水平的影响 2014年 目的研究醋酸棉酚(GAA)对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响和对人类错配修复基因1(hMLHl)甲基化水平的影响,初步探讨其抗肿瘤机理。方法应用MTT法检测GAA对Tca8113细胞生长的影响;应用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nMSP)检测Tca8113细胞在GAA作用48、72h后hMLHl基因甲基化状态的改变情况。结果MTT检测显示,作用24~72h,GAA对Tca8113细胞生长具有抑制作用;nMSP检测显示,以终浓度30、15μmol·L-1的GAA作用于Tca8113细胞48、72h后,hMLH1基因甲基化条带的平均光度值降低,与未经药物处理组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论GAA能抑制舌鳞癌细胞的生长,并能降低hMLH1基因的甲基化水平。GAA去甲基化作用可能是其具有抗肿瘤作用的机制之一。 付帅 吴勇 彭庆芳 陈文飞关键词:TCA8113细胞 棉酚 甲基化 醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞P16基因甲基化及mRNA表达的影响及其意义 被引量:1 2014年 目的研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人腺样囊性癌ACC-M细胞P16基因甲基化及mRNA表达的影响,初步探讨醋酸棉酚的抗肿瘤作用机制.方法 (1)应用甲基化特异性PCR(MSP)检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后P16基因甲基化状态的改变情况;(2)应用实时荧光定量法(RFQ-PCR)检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后P16基因mRNA的表达变化.结果 (1)MSP检测结果显示:分别以19、10μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后,P16甲基化条带的平均灰度值低于对照组(P<0.05);(2)RFQ-PCR检测显示:分别以19、10μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后细胞中P16mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05).结论 GAA可降低P16基因的甲基化水平,且能增强P16基因mRNA表达,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一. 岳万远 陈文飞 付帅 吴勇关键词:醋酸棉酚 P16 DNA甲基化 醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1基因甲基化和mRNA表达的影响 被引量:5 2014年 目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞hMLH1基因甲基化及mRNA表达的影响。方法:应用MTT法检测GAA对人舌癌Tca8113细胞增殖的作用。应用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)检测Tca8113细胞在GAA作用48、72 h后hMLH1甲基化状态的改变情况。应用实时荧光定量法(RFQ-PCR)检测Tca8113细胞在GAA作用72 h后hMLH1 mRNA的表达变化。结果:GAA作用Tca8113细胞24、48和72 h后,细胞增殖受到抑制。30、15μmol/L的GAA作用Tca8113细胞48、72 h后,hMLH1甲基化条带的平均光度低于对照组(P<0.05)。5、10、15和20μmol/L GAA作用Tca8113细胞72 h后,细胞中hMLH1 mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:GAA能抑制Tca8113细胞增殖,能降低hMLH1基因的甲基化水平,增强hMLH1基因mRNA表达,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一。 陈文飞 付帅 岳万远 吴勇关键词:人舌鳞癌 棉酚 舌鳞癌Cal27裸鼠移植瘤模型的建立及其意义 被引量:4 2015年 目的为抑癌药物的临床研究建立人舌鳞癌动物模型.通过模拟与人体内环境及生物学特性相似的动物模型,观察肿瘤细胞的生物学、病理学行为及转移情况.方法选4~6周BALB/C-nu裸鼠,将体外培养的人舌鳞癌Cal27细胞接种于裸鼠右腋皮下,观察裸鼠体质量、皮下成瘤情况、肿瘤体积;待裸鼠体质量下降至原体质量的25%时,用颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离瘤体组织进行解剖学观察及病理学观察.结果实验裸鼠在接种Cal27细胞第7~12 d后右腋下出现肿瘤,接种浓度为每只0.1 m L约2×10^6个细胞,成瘤率为86.7%.HE染色示肿瘤组织呈典型鳞癌表现;淋巴结及主要脏器未见转移.结论成功建立舌鳞癌Cal27裸鼠移植瘤模型.此动物模型能较客观地反映人舌鳞癌的生物学行为,为进行抑癌药物的临床研究与治疗打下良好基础. 吴京蔓 吴勇关键词:舌鳞癌 裸鼠 移植瘤 动物模型 醋酸棉酚对人舌鳞癌Cal-27细胞ER基因甲基化和mRNA表达的影响 2018年 目的通过醋酸棉酚(GAA)与Cal-27 (人舌鳞癌细胞)的体外培养,评价醋酸棉酚对癌细胞ER基因的甲基化程度和m RNA的表达水平,从分子水平初步研究醋酸棉酚的抗肿瘤机制。方法 (1)应用CCK-8法观察GAA对人舌癌Cal-27细胞生长的作用;(2) GAA作用Cal-27细胞48 h后,用甲基化特异性PCR法评价ER甲基化的程度;(3)应用实时荧光定量法(RFQ-PCR)检测Cal-27细胞在GAA作用48 h后ER m RNA的表达变化。结果 (1) CCK-8法检测显示:GAA作用Cal-27细胞24、48和72 h后,细胞的生长受到抑制;(2)MSP检测结果显示:分别以5.0、10.0μmol/L的GAA作用Cal-27细胞48 h后,ER甲基化条带的平均光度低于对照组(P<0.05);(3) RFQ-PCR检测显示:2.5、5、10μmol/L GAA作用Cal-27细胞72 h后,细胞中ER的m RNA的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论 GAA能抑制Cal-27细胞生长,同时能降低ER基因的甲基化水平,且能增强ER基因m RNA表达,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一。 陈思宇 杨乐 陈黄鸿 付帅 吴勇关键词:人舌鳞癌 棉酚 雌激素受体 涎腺腺样囊性癌中相关抑癌基因的研究进展 被引量:1 2013年 涎腺腺样囊性癌(ACC)是一种发病率较高的涎腺恶性肿瘤,具有嗜神经侵袭和肺转移特性,其发生和发展是多个基因及产物共同作用的结果。传统治疗的效果并不理想,大量的临床研究已初步证实,ACC的癌细胞中存在多个抑癌基因启动子区的高甲基化,从而使细胞失去调控呈无限增殖。目前所研究的基因大多涉及癌细胞的发生、黏附、周期调控和信号转导等方面,对这些基因的研究关系到肿瘤的诊断、治疗及预后评价。 岳万远 吴勇关键词:涎腺腺样囊性癌 抑癌基因 DNA甲基化 醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞E-cadherin基因mRNA表达的影响及意义 2014年 目的研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人腺样囊性癌ACC-M细胞增殖及E-cadherin基因mRNA表达的影响,初步探讨GAA的抗肿瘤作用机制。方法本研究于2013年4—7月在昆明医科大学附属口腔医院(云南省高校口腔医学重点实验室)完成。(1)应用四唑盐比色(MTT)法观察GAA对ACC-M细胞生长的作用。(2)应用实时荧光定量(RFQ-PCR)法检测ACC-M细胞在GAA作用48、72 h后E-cadherin基因mRNA的表达变化。结果 (1)MTT法检测显示:GAA作用ACC-M细胞24、48和72 h后,细胞的生长受到抑制。(2)RFQ-PCR法检测显示:分别以19、10μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72 h后,细胞中E-cadherin mRNA的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论 GAA能抑制ACC-M细胞生长,增强E-cadherin基因mRNA表达。 岳万远 陈文飞 付帅 吴勇关键词:醋酸棉酚 醋酸棉酚对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡及DNA甲基转移酶1表达的影响 被引量:3 2013年 目的:探讨醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人舌鳞癌Tca8113细胞体外生长、凋亡以及DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)mRNA表达的影响。方法:不同浓度GAA作用Tca8113细胞后,MTT法和FCM法检测细胞增殖和细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测Tca8113细胞中DNMT1mRNA的表达水平。结果:GAA作用Tca8113细胞24、48和72h后,细胞的生长受到抑制;30μmol/LGAA作用48h和15μmol/LGAA作用72h后,Tca8113细胞的凋亡率明显高于GAA未作用的对照组(P<0.05);5、10、15和20μmol/LGAA作用Tca8113细胞48h后,细胞中DNMT1mRNA的表达水平低于对照组(P<0.05)。结论:GAA能抑制人舌鳞癌Tca8113细胞的生长、诱导细胞凋亡,并下调Tca8113细胞中DNMT1mRNA的表达水平。 陈文飞 付帅 岳万远 吴勇关键词:甲基转移酶类 细胞凋亡 醋酸棉酚 醋酸棉酚对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长及E-cadherin基因甲基化的影响 被引量:1 2014年 目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对体外培养的人腺样囊性癌ACC-M细胞生长及Ecadherin基因甲基化的影响。方法:应用四唑盐比色法(MTT)观察GAA对人腺样囊性癌ACC-M细胞生长的作用。应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测ACC-M细胞在GAA作用48、72h后E-cadherin基因甲基化状态的改变情况。结果:MTT法检测显示:GAA作用ACC-M细胞24、48和72h后,细胞的生长受到抑制。MSPCR检测结果显示:分别以19、10μmol/L的GAA作用ACC-M细胞48、72h后,E-cadherin甲基化条带的平均灰度值低于对照组(P<0.05)。结论:GAA能抑制ACC-M细胞生长,降低E-cadherin基因的甲基化水平,这可能是GAA抗肿瘤作用的机制之一。 岳万远 陈文飞 付帅 吴勇关键词:醋酸棉酚 抑癌基因