国家自然科学基金(81000476)
- 作品数：3 被引量：22H指数：1
- 相关作者：张传汉张登文姚文龙胡榕王学仁更多>>
- 相关机构：华中科技大学武警湖北省总队医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 突变型Cdh1基因真核表达质粒的构建及鉴定
- 2013年
- 背景:细胞周期末期促进复合物调节亚基Cdh1的活性受到磷酸化调节,磷酸化的Cdh1不能与细胞周期末期促进复合物结合,从而抑制细胞周期末期促进复合物的活性。目的:构建突变型Cdh1基因真核表达质粒及鉴定。方法:采用RT-PCR方法,从大鼠海马组织扩增出Cdh1基因编码序列。通过限制性内切酶EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切PCR回收产物和pBluescript质粒将Cdh1基因克隆到pBluescript质粒上。根据定点突变技术原理,以含Cdh1编码序列的pBluescript-Cdh1质粒为模版,针对Cdh1第40、151、163位丝氨酸(S)和第121位苏氨酸(T)设计4对突变引物,将4个氨基酸位点全部突变为丙氨酸(A)。最后通过测序鉴定。结果与结论:经电泳鉴定PCR扩增产物大小约为1500bp,包括Cdh1基因完整的编码序列、编码序列两端引入的酶切位点以及KOZAK序列,与预期相符。重组质粒pBluescript-Cdh1经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定与预期结果符合。DNA测序比对发现Cdh1(BC162059.1)编码序列第930位碱基A在重组质粒pBluescript-Cdh1上突变为G,但氨基酸无变化,为同义突变,其他DNA序列无突变。经测序鉴定pBluescript-Cdh1-4A40、121、151、163突变质粒第40、121、151、163位氨基酸全部突变为丙氨酸。提示实验成功构建磷酸化位点突变型Cdh1基因真核表达质粒。
- 李立石小云张登文张传汉姚文龙
- 关键词：CDH1定点突变聚合酶联反应真核表达质粒神经损伤修复
- 阿片类药物在慢性非癌性疼痛中的规范化应用被引量：21
- 2015年
- 慢性非癌性疼痛不仅发病率高,发病机制复杂,其治疗目标也存在差异。因此,临床上需要规范慢性非癌性疼痛的管理模式。而在众多治疗方法中,药物治疗是主要手段之一,其中阿片类药物被广泛应用,其临床指南是规范临床实践的有效途径。本文综述了近年来西方国家的慢性非癌性疼痛管理指南中阿片类药物的应用规范,旨在整合已有的研究和临床数据,以便提高患者的结局,并为中国临床医师提供指南推荐的管理策略。
- 胡榕张传汉
- 关键词：慢性疼痛慢性非癌性疼痛阿片类药物
- 骨癌痛大鼠脊髓背角TRESK表达水平的变化被引量：1
- 2013年
- 目的探讨骨癌痛大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK(TWIK-related spinal cord K+channel,TRESK)表达水平的变化。方法雌性SD大鼠(体重150～180g),随机分为假手术组(Sham组)和骨癌痛组(BCP组)。在术前1d、术后3、5、9、14d分别测量各组大鼠机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)的变化,于第14天取腰段脊髓免疫荧光染色及Western blot检测各组大鼠腰段脊髓背角神经元TRESK的表达变化。结果手术前两组大鼠MWT值差异无统计学意义(P>0.05);BCP组在手术后5dMWT值开始降低,与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色显示TRESK的表达主要位于脊髓背角。Western blot检测结果显示,BCP组的TRESK蛋白表达较Sham组明显减少(P<0.05)。结论骨癌痛大鼠脊髓背角神经元TRESK表达降低,这种表达的改变可能与骨癌痛发生机制相关。
- 张登文吴焕兵张传汉夏辉徐林姚文龙田玉科王学仁
- 关键词：骨癌痛脊髓背角
