国家自然科学基金(81160330)
- 作品数：12 被引量：60H指数：5
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- Ras信号传导通路与肿瘤的关系被引量：7
- 2013年
- 在肿瘤的发病机制中，一些信号传导通路的异常激活起着重要的作用，目前发现Ras信号传导通路与人类绝大多数肿瘤的发生、发展过程密切相关，该通路中的任何组分发生突变都会影响肿瘤细胞增殖、分化及凋亡，因此，对Ras信号传导通路的深人研究不仅对认识肿瘤的发生发展及预防有重要意义，而且还可以通过干扰该通路的过度激活而达到在基因水平上治疗肿瘤的目的。本文就Ras通路的激活以及与肿瘤的关系进行综述。
- 徐艳朋俞松
- 关键词：肿瘤细胞增殖抑制剂
- 体外培养血管瘤内皮细胞中p110、p-Akt、Akt的表达及调控被引量：5
- 2013年
- 目的观察LY294002、雷帕霉素、曲安奈德对体外培养血管瘤内皮细胞中p110、t〉Akt、Akt调控的影响，探讨调控P13K／Akt信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用。方法用组织块结合酶消化法培养血管瘤内皮细胞，建立血管瘤血管内皮细胞系，并用第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定。待细胞处于对数生长期，换无血清培养液孵育48h使细胞同步化，然后加入25μmol／L LY294002、10nmol／L雷帕霉素、1．0g／L的曲安奈德继续孵育24h，检测血管瘤内皮细胞中p110、p-Akt及Akt的蛋白表达水平，同时检测血管瘤内皮细胞周期分布及细胞凋亡率，分析p110、p-Akt及Akt的表达水平与体外培养血管瘤内皮细胞周期分布及凋亡的相关性。结果干预24h后，LY294002组p110和p-Akt的表达水平分别为0．188±0．012和0．091±0．021，雷帕霉素组p110和p-Akt的表达水平分别为0．145±0．007和0．093±0．004，与对照组0．371±0．036和0．224±0．013比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；曲安奈德组干预24h后p110蛋白表达水平为0．100±0．004，与对照组比较，差异有统计学意义（P％0．01），而p-Akt蛋白则未见表达。细胞周期阻滞于G／01期的比例增高：LY294002组为（93．813±2．656）％、雷帕霉素组为（88．307±3．667）％、曲安奈德组为（92．937±0．595）％，与对照组（60．883±6．231）％比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。凋亡细胞比例增加：LY294002组（11．243±2．347）%，雷帕霉素组（14．407±1．771）%，曲安奈德组（3．983±0．666）％，与对照组（0．507±0．035）％比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。而总Akt蛋白表达水平无变化。结论P13K／Akt信号通路可能参与体外培养血管瘤内皮细胞凋亡的调控。LY294002、雷帕霉素、曲安奈德可能通过干预P13K／Akt信号通路中相应的靶点，抑制p110激活，
- 李堂江俞松罗宇徐艳朋彭刚谢祎姜福贵
- 关键词：血管瘤细胞周期细胞周期蛋白质类
- p110、磷酸化蛋白激酶B及蛋白激酶B在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达及意义被引量：5
- 2013年
- 目的观察磷脂酰肌醇-3-激酶（PISK）催化亚基p110及磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、蛋白激酶B（Akt）在体外培养血管瘤内皮细胞中的表达，探讨其与血管瘤内皮细胞周期分布和凋亡的关系。方法用组织块法培养血管瘤内皮细胞，同步化培养血管瘤内皮细胞后，采用Western blot法检测血管瘤内皮细胞PI3K p110、p-Akt及Akt蛋白的表达水平，同期用流式细胞仪检测血管瘤内皮细胞周期及凋亡的变化，并分析PI3K p110、p-Akt及Akt蛋白的表达水平与血管瘤内皮细胞周期分布与凋亡的相关性。结果p110、p-Akt蛋白的表达水平低时（0．19±0．01、0．09±0．02），G0／G1期细胞比例为（94．00±3．00）％，细胞总凋亡率为（11．24±2．34）％，p110、p-Akt蛋白的表达水平高时（0．37±0．04、0．22±0．01），G0／G1期细胞比例为（61．00±6．00）％，细胞总凋亡率为（0．51±0．03）％，二者比较差异均有统计学意义（t=-8．42、-35．48，P均〈0．01），而总Akt蛋白表达不变（0．72±0．00）。结论体外培养的血管瘤内皮细胞中有p110、p-Akt及Akt蛋白的表达。p110、p-Akt参与体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡的调节。
- 李堂江俞松罗宇徐艳朋彭刚姜福贵谢祎
- 关键词：血管瘤血管内皮细胞磷酸化蛋白激酶B蛋白激酶B
- 磷脂酰肌醇3激酶和磷酸化蛋白激酶B在小儿血管瘤中的表达及意义被引量：2
- 2013年
- 目的探讨P13K／Akt信号通路在小儿血管瘤的发生、发展及消退过程中的作用。方法收集未经其他治疗、单纯手术切除并病理诊断为血管瘤的标本，结合Mulliken分类法与增殖细胞核抗原（PCNA）表达对血管瘤进行分类和分期，抽取增生期与消退期血管瘤各20例，免疫组化检测增生期血管瘤和消退期血管瘤组织中磷脂酰肌醇3激酶（P13K，p85）和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的表达水平，其中液氮冻存的增生期和消退期血管瘤标本各11例，应用RT-PCR检测p85、p-Akt的mRNA表达情况，并分析其相关性。结果增生期血管瘤p85、p-Akt的表达率和表达强度均高于消退期血管瘤（P〈0．05，P％0．01）；增生期血管瘤p85、p-Akt的积分光密度分别为191．23±40．45、178．73±38．49，消退期血管瘤p85、p-Akt的积分光密度分别为46．63±13．08、64．93±21．22，差异有统计学意义（P〈0．01）；p85与p-Akt的表达之间呈正相关关系（r=0．5530，P％0．05）。增生期血管瘤p85mRNA、p-AktmRNA的相对表达值分别为0．0807±0．0136、0．0841±0．0137，消退期血管瘤p85、P-Akt的相对表达值分别为0．0203±0．0098、0．0324±0．0178，差异有统计学意义（P〈0．01）；p85mRNA、p-AktmRNA的表达之间呈正相关关系（r=0．5503，P％0．01）。结论d＇Jh增生期和消退期血管瘤组织中p85、p-Akt及其mRNA表达有差异，P13K／Akt信号通路可能在~l,Jh血管瘤的病理演变中发挥作用。
- 姜福贵俞松罗宇徐艳朋彭刚李堂江谢祎
- 关键词：血管瘤磷脂酰肌醇3激酶磷酸化蛋白激酶B
- mTOR信号通路与肿瘤研究进展被引量：11
- 2015年
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是1991年从酵母中分离出的一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是多条信号通路的关键蛋白分子，在体内参与多种细胞增殖、分化、自噬、凋亡及周期调控，是近年来在肿瘤领域的研究热点并已取得很大进展。本文就其与常见肿瘤的关系作一综述。
- 陆建国俞松
- 关键词：信号传导基因
- 普萘洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察普萘洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡的影响。方法取婴幼儿增殖期血管瘤标本,用组织块法原代培养血管瘤内皮细胞,并用第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定。待细胞处于对数生长期,换无血清培养基孵育48 h,使细胞同步化,然后分别加入0.5μmol·L-1和1.0μmol·L-1的普萘洛尔作为干预组,而对照组不加任何干预因素,继续孵育24 h,检测血管瘤血管内皮细胞凋亡率。结果血管瘤内皮细胞于组织块接种后3～4 d开始贴壁生长,内皮细胞呈多角形态,3～4周细胞开始快速生长,并铺满板底。培养细胞第Ⅷ凝血因子相关抗原表达为阳性。普萘洛尔作用24 h后,0.5μmol·L-1普萘洛尔组和1.0μmol·L-1普萘洛尔组血管瘤内皮细胞凋亡率分别为(22.42±0.83)%、(24.36±1.42)%,较对照组[(15.72±0.59)%]均明显升高(Pa<0.01)。结论普萘洛尔可以促进体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡或抑制其增殖。
- 魏珩俞松姜富贵李堂江谢祎罗宇彭刚徐艳朋
- 关键词：血管瘤血管内皮细胞细胞培养普萘洛尔凋亡
- PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂对体外培养血管瘤内皮细胞的影响被引量：9
- 2018年
- 目的以PI3K/Akt/mTOR信号转导通路为靶点,观察PBK抑制剂LY294002和mTOR抑制剂RAD001对体外培养血管瘤内皮细胞增殖与凋亡的影响,并检测PI3K/Akt/mTOR信号轴中效应分子以探讨血管瘤消长的分子机制。方法采用组织块结合酶消化法培养血管瘤内皮细胞、传代培养,并用第Ⅷ凝血因子相关抗原对其鉴定。待细胞处于对数生长期,使用无血清培养孵育48h行同步化处理后,分别加入RAD001、LY294002及RAD001+LY294002作为干预组,加入完全内皮细胞培养基作为空白对照组。以上4组继续孵育24h后收集细胞,采用蛋白免疫印迹方法检测各组细胞p-Akt、p-mTOR、p-ERK及p-eIF4E蛋白的表达,流式细胞仪检测各组细胞的周期分布及凋亡率;分析p-Akt、p-mTOR、p-ERK及p-eIF4E蛋白的表达水平与血管瘤内皮细胞周期及凋亡变化的相关性。结果1.RAD001、LY294002及RAD001+LY294002干预24h后,内皮细胞凋亡率分别为(13.80±1.73)%、(15.03±1.05)%、(36.06±2.67)%,较对照组(3.90±0.2b)%有明显升高,差异具有统计学意义(￡=一9.82,一18.03,一20.82,P
- 闰陶然俞松李堂江徐艳朋赵兴苏凯
- 关键词：血管瘤细胞MTOR抑制剂
- 调控P13K／Akt信号通路对裸鼠移植血管瘤的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察人血管瘤裸鼠移植模型中P13Kp85、p-Akt表达，并进行正负调控，探讨PDK／Akt信号通路在小儿血管瘤演变过程中的作用。方法建立血管瘤裸鼠移植模型，生长45d后，将移植成功标本48例，按区组随机平均分成3组。其中，对照组每个瘤体内注射生理盐水0．05ml;正性调控组每个瘤体内注射0．5μmol／L的胰岛素样生长因子0．05ml；负性调控组每个瘤体内注射25μmol／L的LY2940020．05ml。于药物注射当日（用药前）、注射后3d、1周、2周肉眼大体观察移植瘤形态变化，光镜观察移植瘤组织结构变化，同期免疫组化检测P13Kp85、p-Akt蛋白的分布及表达情况，RT-PCR检测PDKp85mRNA、p-AktmRNA的表达情况。结果负性调控组P13Kp85、p-Akt阳性表达率分别为80．00％和86．67％，而对照组及正性调控组P13Kp85及p-Akt阳性表达率均为100％。负性调控组PDKp85、p-Akt表达均较对照组降低，差异有统计学意义（P〈0．05或0．01），瘤体呈消退表现；正性调控组P13Kp85、p-Akt表达均较对照组增高，差异有统计学意义（P〈0．05或0．01），血管瘤瘤体呈增生表现；P13Kp85与p-Akt的表达呈正相关。结论P13K／Akt信号通路可能参与了裸鼠移植血管瘤增生与消退的调控；LY294002、胰岛素样生长因子可以通过干预P13K／Akt信号通路中相应的靶点，抑制或激活P13K／Akt信号通路来促使瘤体消退及增生。
- 彭岗俞松陆建国闫陶然卓金伟柳望舒徐艳朋
- 关键词：血管瘤动物信号传递基因表达调控
- mTOR、p70S6K在体外培养血管瘤血管内皮细胞中的表达及意义被引量：11
- 2012年
- 目的 观察mTOR、p70S6K在体外培养血管瘤血管内皮细胞中的表达,探讨其与血管瘤血管内皮细胞周期分布的关系.方法 用组织块法培养血管瘤内皮细胞,同步化培养血管瘤内皮细胞后,采用Western blot法检测血管瘤内皮细胞mTOR、p70S6K-α的表达水平,同期用流式细胞仪检测血管瘤血管内皮细胞周期的变化；并分析mTOR、p70S6K-α的表达水平与血管瘤血管内皮细胞周期分布的关系.结果 mTOR蛋白表达水平较高0.20±0.01,p70S6K-α蛋白表达水平较低时0.25±0.01,处于G0/G1期的细胞较少（55.95±4.38）％; mTOR蛋白表达水平下降至0.16±0.02,p70S6K-α蛋白表达水平升高至0.29±0.01,处于G0/G1期的细胞明显增多（77.86±8.18）％；二者比较差异有统计学意义（t=- 5.781,P＜0.01）.结论 mTOR和p70S6K参与了体外培养的血管瘤血管内皮细胞细胞周期G0/G1阻滞.
- 吕欣俞松刘远梅魏珩谢祎姜富贵李堂江
- 关键词：血管瘤血管内皮细胞MTORP70S6K细胞周期
- 普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-2表达的影响被引量：8
- 2012年
- 目的观察普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶一2的影响，探讨普萘洛尔治疗血管瘤的机制。方法用组织块结合酶消化法原代培养血管瘤内皮细胞，并用第Ⅷ凝血因子相关抗原进行鉴定。待细胞处于对数生长期，换无血清培养基孵育48h使细胞同步化，然后分别加入0．5μmol／L和1μmol／L的普萘洛尔作为干预组，而对照组不加任何干预因素，继续孵育24h，用Real—timePCR法检测血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的表达水平，同期检测血管瘤血管内皮细胞凋亡率，并分析血管内皮生长因子mRNA、基质金属蛋白酶-2mRNA的表达水平与血管瘤血管内皮细胞凋亡的相关性。结果0．5μmol／L普萘洛尔组和1．0μmol／L普萘洛尔组血管瘤内皮细胞凋亡率分别为（22．42±0．83）％，（24．36±1．42）％，比对照组（15．72±0．59）％明显升高（P〈0．01）；血管内皮生长因子mRNA相对表达量分别为1．02±0．42、0．93±0．22，比对照组1．61±0．52降低（P〈0．05），基质金属蛋白酶-2mRNA相对表达量分别为0．77±0．18、0．67±0．27，比对照组1．47±0．57降低（P〈0．05），但0．5μmol／L普萘洛尔组血管内皮生长因子mRNA、基质金属蛋白酶-2mRNA与1．0μmol／L普萘洛尔组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论普萘洛尔可以促进体外培养的血管瘤内皮细胞凋亡，其机制可能是通过下调血管瘤内皮细胞血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2的表达，从而促进血管瘤内皮细胞凋亡。
- 魏珩俞松姜富贵李堂江谢祎罗宇彭刚徐艳朋
- 关键词：血管瘤普萘洛尔血管内皮生长因子基质金属蛋白酶2
