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国家自然科学基金(30971142)

作品数：10 被引量：48H指数：5
相关作者：由江峰裴斐徐晓艳郑杰张波更多>>
相关机构：北京大学内蒙古医学院青岛大学医学院附属医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部科学技术研究重大项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 10篇医药卫生

主题

  • 8篇细胞
  • 7篇前列腺
  • 7篇肿瘤
  • 7篇基因
  • 6篇前列腺癌
  • 6篇腺癌
  • 4篇前列腺肿瘤
  • 4篇腺肿瘤
  • 3篇人前列腺癌
  • 3篇前列腺癌细胞
  • 3篇肿瘤转移
  • 3篇腺癌细胞
  • 3篇癌细胞
  • 2篇抑制基因
  • 2篇人前列腺癌细...
  • 2篇生物学
  • 2篇糖脂
  • 2篇体外
  • 2篇鞘糖脂
  • 2篇肿瘤抑制

机构

  • 9篇北京大学
  • 4篇内蒙古医学院
  • 2篇青岛大学医学...
  • 1篇北京大学第三...

作者

  • 9篇裴斐
  • 9篇由江峰
  • 5篇徐晓艳
  • 3篇郑杰
  • 2篇于文娟
  • 2篇张波
  • 2篇王洁良
  • 2篇崔湘琳
  • 2篇王曰伟
  • 2篇邹鹏程
  • 2篇张梦雪
  • 1篇杨京平
  • 1篇钟镐镐
  • 1篇崔湘霖
  • 1篇刘岩
  • 1篇李刚
  • 1篇刘鑫
  • 1篇李绪文
  • 1篇谢志刚
  • 1篇龚苗子

传媒

  • 4篇中华病理学杂...
  • 2篇北京大学学报...
  • 2篇临床与实验病...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇癌症

年份

  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 4篇2011
  • 3篇2010
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因的筛选及其对转移性前列腺癌细胞生物学行为的影响被引量：2
2010年
目的筛选肿瘤转移相关新基因，探讨鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因（PAG1）转染对人前列腺癌细胞系PC-3M的高转移亚系PC-3M-1E8体外生物学行为的影响。方法利用PC-3M高转移亚系PC-3M-1E8、低转移亚系PC-3M-284，人肺巨细胞癌细胞系（PG）高转移亚系PG—BE1和低转移亚系PG—LH7cDNA制作4张基因芯片，筛选出PC-3M和PG高、低转移亚系共同差异表达基因。对在两个转移亚系共同表达下调的PAG1基因做进一步研究，采用即时定量PCR及Westernblot验证PAG1在PC-3M细胞系中的表达。构建pcDNA3．0-PAG1真核表达载体，稳定转染PC-3M-1E8细胞。MTT比色实验及软琼脂集落形成实验检测肿瘤细胞体外增殖能力；流式细胞术检测肿瘤细胞周期及凋亡；Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果基因芯片初步筛选出PC-3M高、低转移亚系差异表达基因共327个，上调基因123个，下调基因204个。PG高、低转移亚系差异表达基因共281个，上调基因167个，下调基因114个。PC-3M与PG高转移亚系共同表达下调基因9个、上调基因8个。即时定量PCR及Westernblot证实PAG1在PC-3M高转移亚系中表达低于低转移亚系。MTT比色及软琼脂集落形成实验显示转染pcDNA3．0-PAG1组细胞增殖速度明显低于转染空载体组和未转染组（均P〈0．05）。细胞周期检测转染pcDNA3．0-PAG1组比转染空载体组和未转染组处于G0～G，期的细胞百分数明显增加（P〈0．05）。转染pcDNA3．0-PAG1组与转染空载体组和未转染组相比凋亡细胞百分率无显著差异（P〉0．05）。体外穿膜侵袭实验结果表明转染pcDNA3．0-PAG1组比转染空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少，分别为（35．1±4．9）、（127．6±6．6）和（135．0±5．0）个（P〈0．05）。结论利用同一母系来源的高、低转移亚系制作基因芯片可以摒除转移无关基因的干扰，筛选出差异表
于文娟王曰伟谢志刚由江峰王洁良崔湘琳裴斐郑杰
关键词：肿瘤标记生物学寡核苷酸序列分析
液泡型ATP酶C亚基ATP6V0C在人前列腺癌细胞系中的表达及其意义
2013年
目的探讨液泡型ATP酶C亚基ATP6V0C在不同转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达及其意义。方法采用半定量RT-PCR、荧光实时定量RT-PCR和Western blot法检测ATP6V0C在人不同转移潜能前列腺癌细胞系PC-3M-1E8、PC-3M(高转移潜能)和PC-3M-2B4、PC-3(低转移潜能)中的表达。结果 ATP6V0C在PC-3M-1E8、PC-3M细胞系中的mRNA及蛋白表达量均明显高于在PC-3M-2B4、PC-3细胞系中的表达,其中,ATP6V0C在PC-3M-1E8中的表达最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ATP6V0C在高转移潜能人前列腺癌细胞系中的表达明显高于低转移潜能人前列腺癌细胞系,证明其和肿瘤的转移密切相关,有可能成为判断人前列腺癌侵袭和转移的重要指标及治疗前列腺癌的新靶点。
邹鹏程徐晓艳张梦雪由江峰裴斐
关键词：前列腺肿瘤
RNA沉默LASS2／TMSG1基因促进人前列腺癌细胞侵袭和转移的分子机制被引量：4
2014年
目的探讨LASS2／TMSGl基因沉默对人前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响及其分子作用机制。方法建立稳定表达LASS2／TMSGl-shRNA的低转移潜能人前列腺癌PC-3M-2134细胞系，然后采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）掺人实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、Matrigel穿膜侵袭实验和裸鼠体内成瘤实验研究LASS2／TMSGl的细胞生物学功能；采用Westernblot法、明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2和9（MMP．2和MMP-9）的表达、分泌及活性；并采用V—ATPase活性检测试剂盒检测细胞内V—ATPase活性，以及采用BCECFH＋敏感荧光探针检测细胞外H＋浓度以研究LASS2／TMSGl抑制前列腺癌转移的分子作用机制。结果转染LASS2／TMSGl-shRNA后，PC-3M-284细胞的增殖能力、锚定不依赖生长能力及体外侵袭能力明显提高（P〈0．05），而细胞凋亡率明显下降（P〈0．01），但对细胞周期无影响（P〉0．05）；LASS2／TMSGl基因沉默组移植瘤的体积、质量及淋巴结转移率（5／6）和核增殖指数（0．53±0．05）明显大于空白对照组（0／6，0．13±0．02）和无关阴性对照组（1／6，0．10±0．03；P〈0．05）；LASS2／TMSGl基因沉默组的V—ATPase酶活性（P〈0．01）及细胞外H’浓度明显升高（P〈0．01），而MMP-2及MMP-9的表达量和分泌量无明显变化（P〉0．05），但分泌的MMP-2和MMP-9活性增加（P〈0．05）。结论特异性shRNA沉默LASS2／TMSGl基因能促进人前列腺癌细胞增殖、侵袭和转移能力，其机制可能是沉默LASS2／TMSG1基因后激活液泡型ATPase，从而使细胞外H’浓度升高，进而激活MMP-2和MMP-9有关，提示LASS2／TMSG1基因是一种新的肿瘤转移抑制基因。
徐晓艳由江峰裴斐
关键词：前列腺肿瘤基因沉默
一种新的肿瘤转移抑制基因TMSG—l的研究现状(英文)被引量：15
2010年
TMSG-1 is a newly discovered tumor metastasis suppressor gene,which plays important roles in promoting apoptosis and inhibiting invasion and metastasis of tumor cells.The inhibitory function of TMSG-1 in tumor cells may be related to vacuolar H+-ATPase and ceramide,but the underlying mechanism remains unknown.Studies on TMSG-1 are limited worldwide,and only a research group in Shanghai and our group have recently studied on it.As a new research field,the function of TMSG-1 remains to be explored.This review discusses the discovery of TMSG-1,structure of its encoded protein,its roles and possible mechanism in inhibiting tumor invasion and metastasis.
徐晓艳裴斐由江峰
关键词：肿瘤生物学抑制基因肿瘤转移细胞浸润抑制肿瘤
KLF6和Spl共同促进肿瘤转移抑制基因1的转录激活被引量：5
2011年
目的探讨肿瘤转移抑制基因1（TMSG-1）的基因转录调控机制。方法PCR扩增TMSG．1转录起始位点上游-271bp与下游＋303bp之间不同长度片段，连入荧光素酶报告基因质粒pGL3-basic，各重组质粒转染后对表达的荧光素酶活性进行检测；对重组质粒pGL3-237插入DNA序列的潜在转录因子结合位点进行定点突变，然后检测其荧光素酶活性的变化；运用凝胶迁移阻滞和染色质免疫共沉淀验证转录因子KLF6和Spl与TMSG-1DNA调控区的相互作用；通过免疫共沉淀实验分析转录因子KLF6和Spl之间的相互作用；对人前列腺癌PC-3M不同转移潜能亚系PC-3M-E8、PC-3M．2134，人肺巨细胞癌PG不同转移潜能亚系PG-BEl、PG-LH7通过荧光定量PCR分析TMSG．1和野生型KLF6mRNA水平；将KLF6真核表达质粒转染PC-3M-284后检测TMSG-1蛋白水平及细胞侵袭能力的变化。结果通过荧光素酶报告基因实验鉴定出TMSG．1基因第1号外显子内存在明显促进基因转录的调控区域＋59～＋123bp。对该区域序列定点突变后重组荧光素酶报告基因表达的荧光素酶活性下降，而共转染未突变的荧光素酶报告基因质粒和KLF6或Spl的真核表达质粒则荧光素酶活性上升，差异具有统计学意义（P〈0．01）。凝胶迁移阻滞和染色质免疫共沉淀结果显示，转录因子KLF6和Spl与该区域特定序列存在相互作用。免疫共沉淀结果验证转录因子KLF6与Spl之间存在相互作用。荧光定量PCR结果显示前列腺癌细胞低转移亚系PC．3M-21M中TMSG-1和野生型KLF6mRNA水平均高于高转移亚系PC．3M-1E8（P〈0．05，P〈0．01），同样肺巨细胞癌低转移亚系PG．LH7中TMSG-1和野生型KLF6mRNA水平均高于高转移亚系PG-BEl（均P〈0．01）。PC-3M-284细胞转染KLF6真核表达质粒后检测到TMSG-1蛋白的增加和细胞侵袭能力的下降。结论前列腺癌细胞中转录因子KLF6与Spl共同作用促进肿瘤转移抑制相关基因
龚苗子由江峰裴斐崔湘霖李刚郑杰
关键词：肿瘤转移转录基因肿瘤抑制细胞系肿瘤
前列腺癌细胞系中TMSG-1的表达及其意义被引量：10
2011年
目的探讨一种新的肿瘤转移抑制基因TMSG-1(tumor metastasis suppressor gene 1,TMSG-1)在不同转移潜能前列腺癌细胞系中的表达及其意义。方法采用半定量RT-PCR、Western blotting、细胞爬片免疫组化PV-9000法来检测TMSG-1在人不同转移潜能前列腺癌细胞系PC-3M-2B4(低转移潜能)和PC-3M-IE8(高转移潜能)中的表达情况。结果 TMSG-1在PC-3M-2B4(低转移潜能)细胞系中的mRNA及蛋白表达量均明显高于在PC-3M-IE8(高转移潜能)细胞系中的表达,具有统计学意义(P<0.05)。结论 TMSG-1在低转移潜能前列腺癌细胞系中的表达明显高于在高转移潜能前列腺癌细胞系中的表达,证明它是一种肿瘤转移抑制基因,有可能成为判断前列腺癌细胞浸润及转移的重要预后指标。
徐晓艳由江峰裴斐
关键词：前列腺肿瘤半定量RT-PCRWESTERNBLOTTING
95例非小细胞肺癌患者的间变性淋巴瘤激酶融合基因表达情况、临床病理特点及预后被引量：7
2014年
目的:研究非小细胞肺癌患者的间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因的表达情况和临床病理特点。方法:从北京大学第三医院随机选择了有随访资料的95例非小细胞肺癌患者,采用ALK+插入式抗体强化免疫组织化学法(intercalated antibody-enhanced polymer,iAEP)和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测患者ALK融合基因的表达情况,并分析ALK融合基因阳性患者的临床病理特点、生存期和EGFR/KRAS基因突变情况。结果:采用ALK+iAEP法共筛选出8例ALK阳性病例,其中4例经FISH法证实存在ALK融合基因,检出率为4.2%(4/95),其中2例女性肺癌患者的组织学类型是实体性肺腺癌伴印戒细胞形态,另2例男性肺癌患者是腺鳞癌。4例肺癌患者中3例为非吸烟者,均无EGFR/KRAS基因突变,且均存活,其中有2例患者已存活超过5年。结论:ALK+iAEP法较常规ALK免疫组织化学法能明显提高肺癌患者ALK的检出率,可以作为初筛ALK阳性病例的方法,且阳性细胞的比例较阳性强度更重要。ALK融合基因在非小细胞肺癌患者中的检出率较低(<5%),同时可能提示预后较好。
张梦雪裴斐王田力韩翔由江峰邹鹏程王月琪李绪文刘鑫钟镐镐刘岩王玉湘王华张波
关键词：间变性淋巴瘤激酶基因融合
鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白基因影响高转移人前列腺癌细胞体外生物学行为的机制探讨被引量：1
2010年
目的 探讨鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白（PAG1）基因对高转移人前列腺癌细胞系PC-3M-1E8细胞体外生物学行为影响的机制.方法 异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导JM109细菌中GST-Raf1-Ras结合域（GST-Raf1-RBD）融合蛋白的表达,其中Raft-RBD能特异性的与活性Ras（GTP-Ras）结合,聚丙烯酰胺凝胶电泳和考马斯亮蓝染色观察融合蛋白诱导表达结果.GST-pull down实验检测稳定转染PAG1基因、转染空载体及未转染的PC-3M-1E8细胞中活性Ras水平.Western blot检测Ras信号通路相关蛋白表达变化.用异硫氰酸四甲基罗丹明（TRITC）耦联的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,激光扫描共聚焦显微镜观察肿瘤细胞形态和细胞内F-肌动蛋白排列变化.收集人前列腺及前列腺腺癌组织标本,通过免疫组织化学PV9000法检测PAG1蛋白的表达.结果 GST-Raft-RBD融合蛋白诱导表达结果显示,经IPTG诱导后在相对分子质量约33 000处出现较亮的GST-Raf1-RBD融合蛋白条带.GST-pull down结果显示PC-3M-1E8细胞稳定转染PAG1基因后,活性Ras蛋白表达明显减少,总Ras蛋白表达无明显变化.Western blot检测结果显示PC-3M-1E8细胞稳定转染PAG1基因后,磷酸化胞外信号调节激酶（ERK）表达明显减少,总ERK表达无明显变化;细胞周期素D1（cyclin D1）表达明显减少;p21WAF1/CIP1蛋白及磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）表达无明显变化.TRITC耦联的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白结果显示稳定转染PAG1基因的PC-3M-1E8细胞F-肌动蛋白骨架结构紊乱,丝网状结构不明显,细胞呈长梭形,细胞表面伪足明显较少.免疫组织化学检测结果显示正常前列腺组织PAG1蛋白表达阳性率较高,前列腺腺癌组织中随着Gleason分级的增加,PAG1蛋白表达阳性率降低.结论 PC-3M-1E8细胞中PAG1表达上调能降低Ras活性,抑制ERK活化,进一步抑制cyclin D1的表达而引起细胞周期阻滞,抑制细胞增殖.PAG1表达上调可引起PC-3M-1E8细胞运动�
于文娟王曰伟由江峰王洁良崔湘琳裴斐郑杰
RNA沉默LASS2基因促进人前列腺癌细胞体外侵袭及其机制研究被引量：11
2011年
目的:研究特异性沉默人源性长寿保障基因2(homosapiens longevity assurance homologue 2,LASS2,亦称TMSG1)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人前列腺癌细胞系低转移潜能亚系PC-3M-2B4的体外侵袭能力的影响及相关机制。方法:通过脂质体转染法将特异性沉默LASS2基因的siRNA转染入PC-3M-2B4细胞。分别用实时荧光定量PCR(real-time fluorogenetic quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western blot方法检测LASS2siRNA对PC-3M-2B4细胞LASS2基因和蛋白表达的抑制作用,筛选有效的siRNA片段;运用液泡型ATPases(vacuo-lar H+-ATPases,V-ATPases)活性测定试剂盒来检测PC-3M-2B4细胞的V-ATPases活性;运用BCECF氢离子敏感荧光探针检测PC-3M-2B4细胞外氢离子浓度;采用Western blot方法分析PC-3M-2B4细胞的基质金属蛋白酶2(ma-trix metalloproteinase 2,MMP-2)的表达及分泌情况;应用明胶酶谱法检测PC-3M-2B4细胞上清液中MMP-2的活性;利用细胞划痕修复实验和Transwell法检测细胞体外迁移及侵袭能力。结果:通过RFQ-PCR和Western blot筛选后,siRNA-2能显著抑制PC-3M-2B4细胞LASS2基因mRNA和蛋白的表达,对mRNA表达的抑制率可达84.5%,对蛋白表达的抑制率可达60%。PC-3M-2B4细胞转染LASS2 siRNA-2后,其V-ATPases的活性及细胞外氢离子浓度明显升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化,但分泌的MMP-2的活性形式增加,与空白对照组相比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞的体外迁移及侵袭能力明显高于空白对照组(P<0.05)。结论:特异性siRNA沉默LASS2基因能促进人前列腺癌细胞体外侵袭能力,其机制与沉默LASS2基因后激活V-ATPase,从而使细胞外氢离子浓度升高,进而激活MMP-2有关,提示LASS2基因是一新的肿瘤转移抑制基因。
徐晓艳由江峰裴斐张波
关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移
TMSG-1在人前列腺癌细胞株与前列腺癌组织中的表达及临床意义被引量：7
2011年
目的探讨肿瘤转移抑制基因-1（TMSG-1，亦称LASS2）在人不同转移潜能前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）及细胞爬片免疫荧光组织化学方法，检测TMSG-1在人不同转移潜能前列腺癌细胞株低转移潜能（PC-3M-284）和高转移潜能（PC-3M—IE8）中的表达。并采用免疫组织化学方法检测TMSG-1在人前列腺增生及前列腺癌组织中的表达，同时探讨其与临床病理特征之间的关系。结果TMSG-1在PC-3M-284细胞株中的mRNA及蛋白表达（2．70±0．30、75．26±2．68）均明显高于在PC-3M—IE8细胞株中的表达（1．10±0．20、38．08±1．84），差异有统计学意义（P〈0．05）。通过免疫组织化学观察表明TMSG．1在前列腺增生及前列腺癌组织中均有表达，但在前列腺增生中的阳性表达率（32／40）明显高于在前列腺癌中的阳性表达率（21／60），两者差异有统计学意义（P〈0．05）。并且TMSG-1在前列腺癌组织中的表达与年龄、Gleason分级、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P〈0．05），而与肿瘤的大小无明显相关。结论TMSG-1在低转移潜能前列腺癌细胞株中的mPtNA及蛋白表达明显高于在高转移潜能前列腺癌细胞株中的表达，证明它是一种肿瘤转移抑制基因。TMSG-1在人前列腺增生与前列腺癌组织中的表达之间差异有统计学意义，并且TMSG-1在前列腺癌中的表达与年龄、Gleason分级、淋巴结转移及TNM分期密切相关。
徐晓艳张燕杨京平由江峰裴斐
关键词：前列腺癌免疫组织化学
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