黑龙江省科技攻关计划项目(GC09C409-1)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：纪艳超翟哲张岩吴波陈曦海更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划项目黑龙江省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的效果验证被引量：11
- 2010年
- 背景:骨髓中的间充质干细胞含量不高,且随着年龄增加或体质衰弱,骨髓间充质干细胞的数量会逐渐减少。目的:验证贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的效果。方法:大鼠麻醉后取双侧股骨和胫骨,剪去骨骺端,暴露骨髓腔,用含小牛血清的DMEM培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞,反复吹打制成单细胞悬液,接种后置于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱内孵育,24h后全量换液,以后每周全量换液1次,筛选易贴壁但贴壁不牢的细胞进行传代培养。观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪及免疫细胞化学染色鉴定骨髓间充质干细胞表面标志的表达。结果与结论:培养24h后细胞能够贴壁生长,呈梭形或三角形;第二三天贴壁细胞迅速增殖;培养15d左右出现致密的贴壁细胞层,呈漩涡状生长或成簇生长。细胞在接种后2d进入对数生长期,12d左右进入平台期,约15d细胞可铺满瓶底。分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞CD90和CD54均呈阳性表达。结果验证了采用贴壁法可在体外成功分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,操作简单,造成污染的环节和机会较少,不需离心,可以更好的保持细胞活性。
- 张岩陈曦海纪艳超翟哲吴波
- 关键词：贴壁法骨髓间充质干细胞
- 胸腺诱导对大鼠肝移植的免疫影响
- 2010年
- 背景:异体肝脏移植由主要组织相容性抗原可诱发免疫排斥反应,免疫抑制剂会对机体产生不良反应,目前通过移植前对供受体进行预处理等策略,可以诱导受体产生免疫耐受,在移植中具有广阔的应用前景。目的:用大鼠胸腺诱导的方法,对大鼠肝移植进行处理,从胸腺诱导方面,研究胸腺诱导与移植免疫排斥反应的关系。方法:供体为清洁级雄性SD大鼠40只,受体为清洁级雄性Wistar大鼠30只和清洁级雄性SD大鼠10只,分为同种基因移植组、同种异基因移植组、环孢素组、胸腺修饰诱导组,各10对。采用改良Kamada二袖套法并加以改进建立稳定的大鼠原位肝移植模型,造模后,环孢素组每天腹腔注射环孢素(50mg/kg),持续5d,胸腺修饰诱导组胸腺左右两叶各注射50μL主要组织相容性抗原,持续5d,其他组不给予任何干预措施,记录各组大鼠生存时间并分别于移植后3,7,14,21,28d进行病理学观察和混合淋巴细胞培养。结果与结论:经胸腺修饰诱导的肝移植大鼠生存时间则显著延长(>60d),移植肝内组织损伤程度显著减轻,肝脏局部免疫排斥反应减少,淋巴细胞减少,肝移植效果与同种基因移植大鼠接近,且优于环孢素干预大鼠(P<0.05)。提示胸腺诱导可减轻大鼠肝移植后产生的免疫排斥反应。
- 张岩陈曦海纪艳超翟哲吴波
- 关键词：免疫排斥肝移植环孢素基因
