吉林省科技厅资助项目(200505152)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：赵晴杜建时王嘉桔刘卓张静菊更多>>
- 相关机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 下调PAI对HpG2细胞VEGF表达的影响
- 2007年
- 目的探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、westernblot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI siRNA载体后,HpG2细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降(P<0.01)。转染后,细胞中PAI含量降低,V EGF的表达也减少。结论测序结果表明发卡样的PAI siRNA真核表达载体构建成功,转染HpG2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达,PAI siRNA能有效阻断PAI的蛋白合成,同时抑制细胞中V EGF的表达。
- 杜建时赵晴张静菊王嘉桔
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制剂-1小RNA肝癌细胞系
- 下调PAI对HpG2细胞组织型纤溶酶原激活物和尿激酶纤溶酶原激活物的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的发卡样小干扰RNA(siRNA)真核表达载体对人肝癌HpG2细胞组织型纤溶酶原激活物(tPA)和尿激酶PA(uPA)表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中构建重组载体后,采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白对tPA和uPA表达的影响。结果转染后细胞中PAI含量降低,tPA和uPA的表达减少(均P<0.01)。结论测序结果表明发卡样的PAI siRNA真核表达载体转染HpG2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达,PAI siRNA能有效阻断PAI的蛋白合成,同时抑制细胞中tPA和uPA的表达。
- 杜建时赵晴刘卓王嘉桔
- 关键词：纤溶酶原激活物抑制剂-1纤溶酶原激活物肝癌细胞系
