国家自然科学基金(30270414)
- 作品数：5 被引量：10H指数：3
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- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- hsstr2基因转染肿瘤细胞的受体显像研究被引量：7
- 2005年
- 目的将人生长抑素受体2亚型(hsstr2)基因转染至该受体表达阴性的肿瘤细胞,并进行该受体介导的肿瘤显像。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得hsstr2基因并构建真核表达载体,将hsstr2基因转染至肺腺癌A549细胞系(hsstr2表达阴性),用RT—PCR及流式细胞术检测受体表达情况;采用高表达细胞株进行该受体体外结合特性研究,建立裸鼠肿瘤模型,探讨该受体介导的肿瘤显像方法。结果获得经测序完全正确的hsstr2基因,RT-PCR及流式细胞术鉴定选取高表达的细胞株,体外结合实验测得平衡解离常数Kd=5.65×10-10mol/L,最大结合容量Bmax=2.01×104结合位点/细胞,半数抑制浓度IC50=1.88×10-9mol/L。裸鼠肿瘤模型显像示,静脉注射显像剂99Tcm-RC-160后0.5-1 h肿瘤显影明显,24 h后肿瘤部位第2次显影。结论将hsstr2转染至该受体表达阴性的肿瘤细胞并进行受体介导的肿瘤显像是可行的,适宜显像时间为0.5-1 h。
- 王喆汪静贾林涛李国权程时武王喜青杨安钢
- 关键词：转染放射性核素显像肿瘤细胞基因转染受体表达显像研究
- 人生长抑素受体-2和大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶共表达细胞系的建立及其对5-氟胞嘧啶杀伤的敏感性被引量：3
- 2005年
- 目的建立共表达人生长抑素受体2(SSTR2)和大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(CD)的细胞系,为“自杀基因”/前体药物系统联合SSTR2介导的放射性免疫杀伤和显像治疗肿瘤提供细胞模型。方法应用反转录PCR方法从人胚肾293细胞中克隆人sstr2基因,通过基因重叠延伸拼接(SOE)结合PCR方法将CD、内部核糖体进入位点(IRES2)和sstr2连接,并构建表达载体。体外转染人乳腺癌SKBr3细胞并筛选,通过间接免疫荧光检测SSTR2的表达,并研究前体药物5-氟胞嘧啶(5-FC)对上述细胞的杀伤作用。结果成功克隆了人sstr2基因,并构建了CD和sstr2基因的双顺反子表达载体,进一步建立了稳定转染上述表达载体的SKBr3细胞系,间接免疫荧光证实了SSTR2的表达,同时建系细胞能够被前体药物5-FC高效杀伤。结论本研究建立的人乳腺癌细胞系可以共表达sstr2和CD基因,为在体内研究放射性核素标记的SSTR2配体显像和免疫杀伤,并协同CD/5-FC治疗肿瘤奠定基础。
- 贾林涛汪静王喆李国全王智杨安钢
- 关键词：受体生长抑素胞嘧啶脱氨酶
- ^(125)I-RC-160的NBS标记法研究及体内生物学分布特征被引量：3
- 2004年
- 目的 :研究一种12 5I直接标记RC 16 0的简便高效的方法 ,并观察12 5I -RC 16 0在正常小鼠体内的生物学分布特征 .方法 :采用N 溴代琥珀酸亚胺 (NBS)作为氧化剂 ,在RC 16 0定量的反应体系中加入不同量的12 5I与NBS ,探索标记的最佳反应比例 ;纯化后产物进行正常小鼠体内生物学分布检测 .结果 :反应体系最佳比例为RC 16 0∶12 5I∶NBS =10 μg∶7 4MBq∶30 μg ,标记率可达到 76 9 ,经Sep PakC18反相色谱柱纯化 ,放化纯达到 95 7 ;标记产物在血液、心肌、肾脏中清除快 ,肺脏浓集度最高 ,肝、脾、胃肠浓集度较高 .结论 :本方法步骤简便 ,标记率高 ,是一种比较理想的碘标方法 ,标记肽主要经消化系统代谢 .
- 王喆汪静程时武李国权
- 关键词：碘放射性同位素生长抑素类似物同位素标记
