广东省科技计划工业攻关项目(2011A020102002)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：郭志勋冯娟马红玲张迪苏友禄更多>>
- 相关机构：上海海洋大学中国水产科学研究院南海水产研究所广东省水生动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省教育部产学研结合项目中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1双重巢式PCR检测方法的建立被引量：11
- 2013年
- 青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)是从近年发生大规模死亡的养殖拟穴青蟹体内分离的、对青蟹具有致病性的两种病毒。它们常常同时存在,给青蟹养殖业带来巨大经济损失。在疾病的防治中,快速高效的病毒检测方法对疾病诊断以及及时采取有效地防治措施具有重要的意义。本研究利用MCRV和MCDV-1基因保守区设计4对引物,建立了可同时检测这两种病毒的双重巢式PCR(duplex-nested PCR)检测方法。研究发现该方法对两种病毒的检测限都可以达到10个拷贝,并与鲍肌肉萎缩病毒(AbSV)、虾类传染性表皮与造血组织坏死症病毒(IHHNV)、大菱鲆红体病虹彩病毒(TRBIV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、鱼类神经坏死病毒(NNV)和贝类急性病毒性坏死症病毒(AVNV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性地检测两种病毒。本方法具有高灵敏度、高特异性和简便快捷等特点,可作为一种快速诊断工具,检测拟穴青蟹中的MCRV和MCDV-1基因。
- 张迪杨铿苏友禄冯娟郭志勋
- 关键词：拟穴青蟹
- 广东省阳江地区野生拟穴青蟹2种病毒感染情况调查被引量：5
- 2013年
- 青蟹双顺反子病毒-1（mudcrabdicistrovirus-1，MCDV-1）和青蟹呼肠孤病毒（mudcrabreovirus，MCRV）是对养殖拟穴青蟹有较强致病性的2种病原，可导致高死亡率。文章采用双重巢式PCR检测法对2012年阳江地区5月-10月捕捞的野生拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）病毒感染情况进行调查。结果显示，阳江地区2012年5月～10月的野生青蟹群体一直保持较高的病毒携带率（44．83％-100％），其中MCDV-1检出率最高的月份为6月、8月和9月，MCRV检出率最高的月份为5月-6月和8月～9月；以单独感染类型为主的月份为5月、7月和10月（〉44．83％），以双阳性感染类型为主的月份为6月、8月和9月（〉82．76％）。由此可见，2种病毒的流行月份为5月～6月和8月～9月；在流行月份期间2种病毒常常协同感染野生拟穴青蟹。
- 张迪苏友禄冯娟马红玲付腾郭志勋
- 关键词：拟穴青蟹
- 青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用被引量：1
- 2015年
- 根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒(MCRV)、鲍肌肉萎缩症病毒(Ab SV)、类疱疹病毒(Ab HV)、白斑综合症病毒(WSSV)、虎纹蛙病毒(TFV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出MCDV-1的灵敏度为8.58×107 copies/μL。采用原位杂交检测方法检测拟穴青蟹组织中MCDV-1的组织分布,结果表明,拟穴青蟹中MCDV-1 RNA的阳性信号主要分布于肝胰腺、神经节、肠道和食管。
- 崔亚婷倪军马红玲许海东冯娟申亚阳郭志勋
- 关键词：拟穴青蟹原位杂交
- 番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子的影响被引量：1
- 2015年
- 【目的】研究番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子活力的影响,为有效提高拟穴青蟹抗病毒病能力及促进拟穴青蟹养殖业健康发展提供理论依据。【方法】以番石榴叶水提物浸泡携带病毒的拟穴青蟹为试验组、不浸泡番石榴叶水提物为对照组,对比两组拟穴青蟹的成活率、病毒检出率及酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)活性。【结果】经番石榴叶水提物浸泡处理的拟穴青蟹平均成活率为53.3%,较对照组提高50.1%,且死亡拟穴青蟹未检测出呼肠孤病毒和双顺反子病毒-1,而对照组死亡拟穴青蟹的这两种病毒检出率分别为100%和60%。随着试验时间的延长,拟穴青蟹血清ACP、AKP、SOD和LSZ等免疫相关酶活性均呈先升高后降低的变化趋势,其中试验组拟穴青蟹血清AKP和LSZ活性于用药后24 h时达最大值(7.5金氏单位/100 m L和5.1 U/m L),且均显著高于对照组(P<0.05,下同),ACP活性于用药后48 h时达最大值(2.8金氏单位/100 m L),SOD活性于用药后64 h时达最大值(27.1 U/m L),两者也均显著高于对照组;用药后72 h时,对照组拟穴青蟹PO活性急剧升高,显著高于试验组,但其余时间点与试验组间差异不显著(P>0.05)。【结论】番石榴叶水提物能增强拟穴青蟹的免疫功能,提高对青蟹病毒病的抵抗能力,且在浸泡后48 h内效果明显。
- 王博李加儿冯娟马红玲申亚阳郭志勋
- 关键词：番石榴叶拟穴青蟹免疫因子抗病毒能力
