国家科技攻关计划(2004BA719A15) 作品数:7 被引量:91 H指数:6 相关作者: 王洁 李劲松 温占波 赵建军 鹿建春 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 中国生物技术发展中心 更多>> 发文基金: 国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
生物安全柜的使用选择和生物防护性能检测及评价 被引量:16 2008年 目的:通过介绍各种类型生物安全柜的特点以及检测,实现对安全柜的正确评价和使用。方法:按照标准中规定的方法,使用微生物气溶胶进行评价,测试了正常标称风速下及增大污染机会的情况下的人员保护、产品保护和交叉污染。结果:每次测试阳性对照培养皿>300cfu。人员保护测试评价每次全部撞击式采样器的采样菌落数不大于10cfu,所有狭缝采样器的采样菌落数不大于5cfu。产品保护实验中所有培养皿上的枯草芽孢杆菌数不大于5cfu。交叉污染实验中距被检测侧壁36cm外的培养皿上的菌落数不大于2cfu。结论:本次测试的Ⅱ级B2型安全柜生物防护性能型式测试符合标准的要求。 温占波 赵建军 王洁 毕建军 鹿建春 李劲松关键词:生物安全柜 两株大肠杆菌烈性噬菌体的分离与生物学特征研究 被引量:6 2008年 目的:以大肠杆菌285为宿主菌从医院污水中分离噬菌体,对其生物学特点进行研究,并与亿噬菌体的生物学特点进行比较。方法:四步法污水分离噬菌体;单、双层平板噬菌斑实验筛选烈性噬菌体并观察噬菌斑形态;纯化后2%磷钨酸染色电镜观察;利用双层平板噬菌斑实验测定最佳感染复数;紫外线照射观察耐受时间。结果:成功分离出大肠杆菌285烈性噬菌体2株(EcP1、EcP2),EcP1噬菌斑直径3—5mm(培养12h),逆光观察噬菌斑呈全透明状,该噬菌体有一个长多面体立体对称的头部,头长径(L)约47nm,头横径(W)约35nm,L/W=1.34,无囊膜,有一短尾,尾长约20nm;EcP2噬菌斑直径约1mm(培养12h),逆光观察噬菌斑呈全透明状,该噬菌体有一个长多面体立体对称的头部,头长径(L)约89nm,头横径(W)约54nm,L/W=1.65,无囊膜,有一长尾,有尾鞘,尾长约81nm。EcP2可噬大肠杆菌8099形成直径约1mm的圆形噬菌斑。记噬大肠杆菌285形成圆形直径2~3mm的噬菌斑,逆光观察噬菌斑呈全透明状,f2呈微球形,直径51~113nm。EcP1和EcP2最佳感染复数分别为10和0.1,在紫外灯(光强221μW/cm^2)下暴露8和4min可全部失活。结论:按照国际病毒分类委员会分类标准,所分离的两株噬菌体分属于短尾噬菌体科(EcP1)和肌尾噬菌体科(EcP2)烈性噬菌体,按照Bradley和Ackermann形态分类法分属于C2亚群和近似A2亚群;其中EcP2为一株宽噬噬菌体。两株噬菌体头部大小较呼吸道病毒中流感病毒、副黏病毒、冠状病毒都小。 于龙 王洁 赵建军 温占波 杨文慧 李娜 鹿建春 李劲松关键词:大肠杆菌 噬菌体 生物学 形态学 应用气溶胶发生法评价空气微生物采样器采样效率 被引量:20 2009年 目的建立可控性强的实验室微生物气溶胶发生系统,用以科学评价空气微生物采样器的采样效率。方法规范气溶胶发生系统参数,采用粘质沙雷菌气溶胶,以六级安德森采样器为标准,对5种空气微生物采样器进行平行采样并比较采样效率。结果采用本研究微生物气溶胶发生系统产生的粘质沙雷菌气溶胶颗粒的中值直径为1.60±0.08μm。在所试验的6种微生物采样器中,以二级安德森空气微生物采样器采样效率最高,其次是六级安德森采样器,另外4种空气微生物采样器采样效率明显偏低。结论本实验所建立的实验室气溶胶发生法可以有效控制指示菌粒径分布,在相同气溶胶环境下不同采样器的采样效率有明显差异;二级安德森采样器的采样效率高于六级安德森采样器,其他4种采样器的采样效率均明显低于六级安德森采样器。 杨文慧 温占波 于龙 赵建军 王洁 李劲松关键词:采样效率 粘质沙雷菌 气溶胶 一株粘质沙雷氏菌烈性噬菌体污水分离及特性 被引量:14 2008年 【目的】以粘质沙雷氏菌(8039)为宿主菌从医院污水中分离噬菌体并对其基本生物学特点进行研究。【方法】四步法污水分离噬菌体;单、双层平板噬菌斑实验筛选烈性噬菌体并观察噬菌斑形态;纯化后2%磷钨酸染色电镜观察;手工法提取噬菌体核酸酶切后琼脂糖凝胶电泳分析;利用双层平板噬菌斑实验测定最佳感染复数和完成一步生长实验。【结果】从医院污水中成功分离出粘质沙雷氏菌烈性噬菌体一株(SM701),该噬菌体有一个正多面体立体对称的头部,头径约64nm,无囊膜,有一长尾,无收缩尾鞘,尾长约143nm;基因组核酸能被双链DNA内切酶BamHⅠ及HindⅢ切开,大小约57kb;噬菌斑圆形透明,直径1mm左右(培养12h),边界清楚;当感染复数(multiplicity of infection,MOI)为10时,子代噬菌体滴度较高;按照一步生长实验结果绘制出一步生长曲线,可知感染宿主菌的潜伏期是约为30min,爆发期约100min,平均爆发量约为63。【结论】按照国际病毒分类委员会分类标准,该噬菌体属于长尾噬菌体科(siphoviridae)烈性噬菌体,按照Bradley和Ackermann形态分类法属于B1亚群;噬菌斑与周围红色细菌生长区,颜色差异明显,非常便于观察和计数;噬菌体头部大小和形态与呼吸道病毒中的呼肠病毒和腺病毒最为接近;国内尚未见粘质沙雷氏菌噬菌体相关报道。 于龙 温占波 杨文慧 李娜 王洁 鹿建春 李劲松关键词:粘质沙雷氏菌 噬菌体 生物学 形态学 口罩滤材对非生物颗粒气溶胶和微生物气溶胶过滤效率的评价 被引量:21 2009年 目的评价不同类型口罩滤材对非生物颗粒气溶胶和微生物气溶胶过滤效率。方法采用人工气溶胶和仪器采样方法,对医用外科口罩和医用防护口罩滤材滤除不同气溶胶的效率进行了评价。结果经过恒温恒湿(温度38℃和相对湿度85%)处理的医用外科口罩材料对氯化钠溶液雾化颗粒气溶胶过滤效率为41.46%,未经恒温恒湿处理的该口罩材料过滤效率为41.14%,二者差异不显著(P>0.05)。医用防护口罩滤材对氯化钠溶液雾化颗粒气溶胶过滤效率为99.45%。医用外科口罩材料对金黄色葡萄球菌气溶胶过滤效率为94.78%,医用防护口罩滤材对金黄色葡萄球菌气溶胶的过滤效率为99.73%。结论外科口罩材料对非生物颗粒气溶胶过滤效率均在50%以下,医用防护口罩对非生物颗粒气溶胶和细菌气溶胶过滤效率均达到99%以上。 温占波 鹿建春 李劲松 赵建军 王洁 李娜 于龙关键词:医用口罩 气溶胶 细菌 医用外科口罩细菌气溶胶过滤效果评价 被引量:19 2007年 目的评价不同企业生产的医用外科口罩对细菌气溶胶阻留效果。方法采用人工发生细菌气溶胶和定量空气采样方法进行了过滤效率测试。结果2004年国内某企业生产的口罩对金黄色葡萄球菌气溶胶颗粒平均过滤效果达到98%,依照标准规定合格率达到100%。2005年抽检国内5个企业生产的口罩,其中有4个企业产品对金黄色葡萄球菌气溶胶过滤效率合格率达到100%。2006年抽检国内6个企业生产的口罩,只有1个企业生产的口罩全部符合标准要求;其中有2个企业生产的口罩全部不合格。结论连续检测2004~2006年12个企业生产的医用外科口罩,其对细菌气溶胶过滤效率全部达标的企业只有6个;不同企业生产的医用外科口罩质量参差不齐。 温占波 陈洁君 赵建军 王洁 鹿建春 李劲松生物安全柜更换过滤器后防护性能的评价 被引量:2 2008年 目的测试与评价生物安全柜更换高效过滤器后对操作人员保护、产品保护和交叉污染的防护性能。方法制备枯草芽孢气溶胶发生液,按照标准中规定的测试方法,对安全柜的3种生物学评价指标,即人员保护、产品保护和交叉污染的防护性能进行测试,3种测试分别重复3次。结果3次测试中,人员保护每次6个液体撞击式采样器的枯草芽孢杆菌培养菌落数之和不超过10 cfu,2个固体采样器的培养菌落数之和不超过5 cfu。产品保护每次所有培养皿上的枯草芽孢杆菌落数不超过5 cfu。交叉污染每次测试中被检测侧壁36 cm外的所有培养皿上的枯草芽孢杆菌菌落数不超过2 cfu。结论该安全柜更换过滤器后,人员保护、产品保护和交叉污染的防护性能均良好,符合标准的要求。 温占波 赵建军 王洁 毕建军 鹿建春 李劲松关键词:生物安全柜 高效空气过滤器