云南省应用基础研究计划面上项目(2009ZC184M)
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 相关作者：禹文海和占龙陈丽雄王俊斌鲁帅尧更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院昆明理工大学云南农业大学更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目云南省技术创新人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 转移因子(TF)对幼年猕猴生理生化指标的影响被引量：1
- 2010年
- 目的分析人用转移因子(TF)对幼年实验猕猴的影响,探索其在实验猕猴中应用的效果,为开发和制备实验猕猴专属制品提供科学依据。方法采用全自动血液分析仪和全自动生化仪对幼龄实验猕猴(5♂,5♀)部分血液生理生化指标进行测定和分析。结果血液生理指标在对照组和实验组之间比较,MCH指标有极显著性差异(P<0.01),MCHC指标有显著性差异(P<0.05);在实验组内各组间比较,MCH指标有极显著性差异(P<0.01),WBC、PCT、Mid#、RDW、PLT、PDW有显著性差异(P<0.05)。血液生化指标在对照组和实验组之间比较,ALT指标有显著性差异(P<0.05),TG、UA、AST、AKP、LDH指标有极显著性差异(P<0.01);在实验组内各组间比较,LDH、AKP、AST有显著性差异(P<0.05)。其它各项指标没有显著性差异。结论人用转移因子对幼年实验猕猴的部分生理生化指标有显著的影响,为合理利用TF和开展动物专属制品研究提供了基础。
- 禹文海和占龙黄芬陈丽雄鲁帅尧赵远王俊斌杨竟凯杨亮宇
- 关键词：猕猴生理生化指标
- PCR方法检测猕猴奇异变形杆菌被引量：6
- 2013年
- 目的利用PCR检测猕猴奇异变形杆菌,为该病菌的鉴定、临床诊断、治疗及流行病学调查等提供参考。方法从猕猴粪便中分离奇异变形杆菌并进行鉴定,纯培养后提取基因组DNA,经PCR扩增、凝胶电泳检测、基因序列测序后,序列提交BLAST比对分析。用该菌株检验PCR方法的特异性和敏感度,利用PCR方法和传统分离培养法同时对80只猕猴进行检测。结果在分离得到的猕猴奇异变形杆菌中扩增出225bp的基因序列(GenBank登录号为JQ040548,其与GenBank中奇异变形杆菌AM942759的同源性为98.2%),而其它5株非奇异变形杆菌的PCR扩增结果为阴性,表现出极好的特异性。纯化培养的奇异变形杆菌利用PCR方法检测灵敏性,其敏感度达80cfu/mL。在80只猕猴中,共检测出了2份阳性样品,阳性率为2.5%,检测结果与传统培养方法一致。结论该PCR方法能迅速、准确地检测猕猴奇异变形杆菌,在临床具有良好的实用性。
- 禹文海赵远黄芬杨凤梅鲁帅尧李艳艳陈丽雄王俊斌和占龙
- 关键词：猕猴奇异变形杆菌PCR检测
- 一株恒河猴克罗诺杆菌(阪崎肠杆菌)的分离鉴定及序列分析被引量：1
- 2014年
- 目的对恒河猴粪便中分离到的一株克罗诺杆菌进行鉴定,为实验恒河猴疾病检测、鉴别诊断和治疗提供参考依据。方法通过细菌培养特性、菌落形态观察及微生物鉴定系统(ID32 E)生化试验进行菌落鉴定;并进行抗生素敏感试验和小白鼠致病性试验;用PCR方法扩增分离菌株的23S rRNA基因并测序,并将其与GenBank上参考菌株23S rRNA基因核苷酸序列进行同源性分析。结果经细菌形态学和生化鉴定该细菌为克罗诺杆菌,23S rRNA基因序列与GenBank中分离自婴幼儿配方奶粉中的阪崎克罗诺杆菌(CP004091)同源性为98%。药敏试验表明该菌对甲硝哒唑耐药,对其他15种抗生素敏感。致病性试验证明该分离菌株对小白鼠有强致病性。结论该株从恒河猴中分离到的克罗诺杆菌具有较强的致病性,对实验恒河猴饲养及相关研究人员有潜在的危害,因此,在恒河猴饲养及研究过程中应引起重视。头孢、庆大霉素和诺氟沙星等药物可作为治疗恒河猴克罗诺杆菌感染的临床用药。
- 禹文海赵远鲁帅尧乞素冬沈冬李艳艳杨凤梅陈丽雄王俊斌和占龙
- 关键词：恒河猴
- 基于微卫星DNA标记的恒河猴遗传多样性研究被引量：5
- 2013年
- 目的分析评估恒河猴遗传多样性水平,为建立标准化的恒河猴监测方法提供基础资料。方法利用19个微卫星DNA标记对恒河猴遗传多样性进行分析,经基因组DNA提取、PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳等,用POPGENE 1.32软件及Excel进行统计分析。结果 19个微卫星座位均呈现出了高度多态性,共检测到了等位基因164个,各座位的观察等位基因数在6～11个之间,平均为8.6316个;各基因座位的有效等位基因数在3.5727～8.9416个之间,平均为6.0709个;各微卫星座位的观察杂合度在0.2560～0.6364之间,群体平均值为0.4309;期望杂合度在0.7230～0.9010之间,群体平均值为0.8270;多态信息含量在0.6771～0.8874之间,群体平均值为0.7979;香隆信息指数在1.4249～2.2662之间,群体平均值为1.8901;本研究检测的19个微卫星座位均偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。结论所研究的恒河猴群体遗传多态性比较丰富,本实验为今后建立恒河猴质量监测方法提供理论依据。
- 禹文海和占龙鲁绍雄鲁帅尧赵远杨凤梅李艳艳陈丽雄王俊斌沈冬
- 关键词：微卫星标记恒河猴
- 云南地区恒河猴线粒体DNA控制区遗传多态性研究
- 2012年
- 目的从分子水平探讨云南地区恒河猴遗传多样性,为今后开展恒河猴遗传资源的保护及合理利用提供借鉴和背景资料。方法采用PCR直接测序法测定云南地区恒河猴96份样品的线粒体DNA控制区全序列,用Mege 4.0和DNA SP软件对变异位点数、简约信息位点数、单倍型、单倍型多样度、核苷酸多样度等遗传信息进行分析,基于邻接法(neighbor-joining,NJ)和最小进化法(minimum-evolution,ME)构建系统发生树。结果在96份样品中,共检测出了149个多态性位点,定义了46种单倍型,单倍型多样度(Hd)为0.968±0.007,核苷酸多样度(Pi)为0.020。结论云南地区恒河猴存在着较丰富的遗传多态性。
- 禹文海黄芬杨凤梅鲁帅尧赵远王俊斌陈丽雄李艳艳和占龙
- 关键词：恒河猴线粒体DNA单倍型遗传多态性
- 云南高峰牛MHC-DQB基因外显子2遗传多态性分析被引量：3
- 2011年
- 本研究采用PCR直接测序和PCR-RFLP法研究了云南高峰牛MHC-DQB基因外显子2(DQB.2)的遗传多态性,并利用DNAMAN软件分析了云南高峰牛与部分物种DQB.2相应核苷酸序列的同源性。结果发现,共检测到了17个等位基因,其中HaeⅢ酶切位点存在10种基因型,由A、B、C、D和E 5个复等位基因控制;RsaⅠ酶切位点存在22种基因型,由A、B、C、D、E、F、G、H、I、J和K共11个复等位基因控制;TaqⅠ酶切位点只出现了1种基因型。分析发现,云南高峰牛DQB.2基因的12、25、63、96、106、126、152、156、165、204位的碱基表现出了多态性。所分析的物种该基因片段大小相同均为270bp,云南高峰牛第224位碱基缺失及236位碱基插入现象。云南高峰牛与人、猪、马、绵羊、黄牛×瘤牛的核苷酸序列的同源性分别为81.4%、83.3%、78.1%、87.7%、86.6%。经χ2检验结果表明,HaeⅢ和TaqⅠ酶切位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而RsaⅠ酶切位点则未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。
- 禹文海鲁绍雄和占龙刘红文陆润峰金建斌
- 关键词：外显子2遗传多态性
- 云南某农村猪戊型肝炎病毒分子流行病学调查被引量：7
- 2012年
- 目的了解云南农村散养猪群HEV感染情况,为HEV防控提供理论依据。方法利用逆转录巢式聚合酶链反应(RT-nested PCR)技术,对所采集云南猪群78份粪便样品进行HEV ORF2基因部分片段扩增,经琼脂糖凝胶电泳后对目的条带进行回收纯化及克隆测序。序列利用DNAStar和MEGA4.0软件进行同源性比较和系统进化树构建。结果 RT-nested PCR方法扩增出了350bp目的基因序列,该序列与GenBank中HEV各型的同源性在77.4%～97.4%之间,与基因4型同源性最高(97.4%),与3型同源性最低(77.4%)。系统进化树显示测定的序列与基因4型聚为一支,表明该序列属于基因4型。本次实验共检测了78份猪粪便样品,其中8份为阳性,阳性率为10.26%。结论云南农村人群存在感染HEV的风险,应该加以防控以免HEV暴发流行。
- 黄芬禹文海马天武井申荣曾韦锟
- 关键词：猪戊型肝炎病毒分子流行病学
