广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600102)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 相关作者：郭国庆张吉凤纪志盛李斌陈万群更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 坍塌反应调节蛋白5促进海马神经元突起生长
- 2014年
- 目的探讨坍塌反应调节蛋白5(CRMP5)对神经元突起生长的作用。方法构建CRMP5真核表达载体,采用基因转染、实时定量PCR和免疫印迹技术评估CRMP5基因表达;以空载体为对照组,设3个复孔,用时差成像技术和突起提取技术观察和检测原代培养海马神经元突起的生长。结果成功构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签蛋白的CRMP5的真核表达载体。脂质体转染技术可成功把CRMP5基因导入细胞,转染的细胞CRMP5表达高于空载体对照组;CRMP5蛋白表达于神经元的胞体和突起,尤其是胞体、突起起始处和突起末端高表达。过表达CRMP5可明显促进突起生长,主要表现为突起的生长,并形成丰富的侧枝;定量结果显示,CRMP5过表达的细胞突起的长度逐渐延长,而且较空载体转染细胞增多,差异显著(P<0.01)。导入CRMP5的细胞突起提取液的吸光度较对照细胞明显升高(P<0.01)。结论 CRMP5能促进神经元突起及其分支的生长。
- 陈克恩王圆圆张吉凤李斌郭国庆
- 关键词：神经元突起基因转染真核表达免疫印迹法
- 生长锥细胞骨架的运动
- 2012年
- 神经组织是神经元树突和轴突通过突触连接形成的神经纤维网络,而树突和轴突之所以能准确到达其特定靶结构并与之建立结构和功能联系则取决于突起末端生长锥的运动。生长锥能依据周围环境的生长和导向信号而改变自身的形状,具有高度的能动性。其动力来源在于其本身微管和微丝丰富而准确的运动,无论是突起的生长,还是其损伤后的再生,生长锥内微管和微丝的不断聚合和解聚,二者相互作用并不断发生独特的空间和位置变化,从而改变生长锥的生长行为,以及神经元的形态和它们之间形成的网络结构。对生长锥细胞骨架工作模式的认识,有助于理解突起的生长和再生过程。
- 郭国庆高媛纪志盛
- 关键词：生长锥细胞骨架突起神经元
- CRMPs对神经元突起生长的调控被引量：2
- 2011年
- 神经元突起是建立神经网络的物质基础,其生长为生长信号启动胞内信号促使神经元不断极化的过程。作为Rho GTPases的下游信号,CRMPs富集于神经系统,参与神经元的发育过程,可作为不同信号通路的共同受体后分子,通过改变细胞骨架的运动调控突起生长。其不同亚基的功能分化、不同亲和性特点显示其具有突起生长调控的分子开关特征,有效地控制突起的生长不仅是发育神经生物学的基本问题,也为重建因神经损伤和退行性疾病受到破坏的神经网络提供可行的作用靶点。
- 郭国庆张吉凤纪志盛
- 关键词：神经元细胞骨架突起
- 大鼠CRMP1基因siRNA的筛选
- 2010年
- 目的:筛选有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。方法:化学合成3对针对大鼠CRMP1基因的特异性siRNA,用脂质转染胺(lipofectamine)LTX转染大鼠海马神经元,通过流式细胞仪检测转染效率,使用RT-PCR与实时PCR检测CRMP1基因mRNA的表达,从而筛选抑制效率最高的siRNA。结果:流式细胞仪检测转染效率为52.5%。通过RT-PCR的初步检测和实时PCR的定量检测结果显示,与对照组相比,所设计的3对siRNA均能不同程度抑制CRMP1基因mRNA的表达,其中CRMP1-249 siRNA抑制效果最佳,抑制率达84.3%。结论:成功筛选出1对能有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。
- 张忠其李斌陈万群张文斌龚晓兵郭国庆
- 关键词：小干扰RNA实时荧光定量PCR
