浙江省重大科技专项基金(2012C12003-2)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：李肖梁方维焕张涵淞张毅扈鸿霞更多>>
- 相关机构：浙江大学贵州大学更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金宁波市农业科技攻关项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 抗PRRSV和PCV-2-Cap蛋白特异性IgY抗体对保育猪生长和免疫的影响被引量：1
- 2013年
- 应用特异性抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV-2）Cap蛋白卵黄免疫球蛋白（IgY）饲喂保育猪,观察其对保育猪生长和免疫性能的影响。经抗体检测表明,53日龄时,PRRSV和PCV-2抗体阴性率0.5%,试验组比对照组分别高15%和5%。在53日龄和60日龄时,保育猪PRRSV阳性抗体S/P均值,试验组比对照组分别低15.59%和24.53%。保育猪46日龄-60日龄之间,阳性PCV-2抗体S/P均值试验组比对照组分别低15.42%、19.66%和12.70%。保育猪转栏时,试验组比对照组平均末重高12.74%（P〈0.01）,平均日增重提高16.90%（P〈0.01）,成活率高1.67%。免疫组化结果显示,相对于空白组,添加组空肠和小肠组织中的PRRSV抗原的阳性表达几乎为0。试验结果为特异性抗体用于PRRSV和PCV-2的防控提供了参考。
- 鲍伟华周雪荣卢黎明孙鹏烈樊莉方维焕李肖梁
- 关键词：卵黄免疫球蛋白保育猪
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞中非结构蛋白Nsp2表达分析被引量：4
- 2013年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白Nsp2对病毒复制和致病具有重要作用,本研究旨在分析Nsp2在Marc-145细胞内的分布与表达。构建nsp2含PL2区域基因片段的原核表达载体,重组蛋白纯化后作为免疫抗原,制备Nsp2特异性单克隆抗体。将携带nsp2基因的真核表达载体转染至Marc-145及HEK293细胞,或将PRRSV感染Marc-145细胞后不同时间点收集细胞样品。免疫荧光观察Nsp2在转染细胞中的亚细胞定位,免疫印迹分析Nsp2在真核细胞中的表达。筛选获得了1株稳定分泌特异性抗Nsp2的单克隆杂交瘤细胞株,能用于免疫荧光和印迹分析。重组真核表达质粒转染Marc-145与HEK293细胞后,Nsp2主要定位于细胞质中,免疫印迹检测到约为120与50ku的蛋白条带。PRRSV感染Marc-145细胞4h即可检测到Nsp2的表达,主要定位于细胞核周围,随着感染时间延长Nsp2分布范围逐渐扩大至整个细胞质。病毒感染8h,可检测到120ku左右的Nsp2蛋白条带,感染后12h可检测到70和50ku左右的Nsp2蛋白,且蛋白表达量随感染时间延长显著增多。PRRSV感染细胞中Nsp2的表达与剪切分析,为深入研究该蛋白在病毒复制和致病中的功能奠定了基础。
- 温贵兰张涵淞扈鸿霞章先张毅王晓杜李肖梁方维焕
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
