浙江省自然科学基金(Y2100855)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：陈林华高英陈晓燕赵月娥江天更多>>
- 相关机构：温州医学院附属眼视光医院温州医科大学温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 两种微量RNA扩增方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法,以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA,扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验,根据PCR结果比较两种不同扩增方法的效率。WT-ovation扩增RNA的效率约为IVT效率的2.8倍;IVT方法扩增后,基因D-C值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均存在正线性相关(P<0.05),即引物距离mRNA的3'端越近、mRNA越短,基因D-Ct值越低。而WT-ovation方法扩增后,基因D-Ct值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均不存在统计学相关性。与IVT方法相比,WT-ovation方法效率更高,扩增时受影响因素较少、更稳定。
- 陈林华赵月娥陈晓燕高英
- 关键词：定量PCR
- 小鼠大脑皮质脊髓投射神经元核糖体蛋白质相关基因表达的研究
- 2014年
- 该研究采用激光显微切割技术从小鼠大脑第五皮层捕获少量皮质脊髓投射神经元,并分析其分子生物学特征。首先,提取神经元微量RNA,再借助WT-ovation试剂盒扩增RNA,随后利用合成的cDNA进行荧光定量PCR实验,分析投射神经元核糖体蛋白相关基因的表达情况。结果发现,与大脑皮层其它皮层组织相比,第五皮层投射神经元内部分核糖体蛋白相关基因的表达相对较高。这表明第五皮层投射神经元可能具有活跃的蛋白质合成功能,是核糖体蛋白质的能量场所,借此维持第五皮层脊髓投射神经元长轴突和大胞体的能量需要。
- 陈林华王丽花王教李雪
- 关键词：投射神经元核糖体蛋白质
- 酸敏感离子通道对海马神经元树突发育的影响
- 2012年
- 目的探讨酸敏感离子通道(ASICs)在海马神经元树突发育中的作用。方法在体外培养第5天的原代海马神经元中转染定位于膜上的绿色荧光蛋白(F-GFP),随后在神经元培养液中加入ASICs拮抗剂Amiloride和ASIC1a选择性拮抗剂Psalmotoxin 1(PcTX1)抑制ASICs的功能,观察体外培养8d和14d这两个时间点海马神经元的树突生长、分支复杂程度。结果 Amiloride(10-5mol/L)和PcTX1(1∶20 000稀释)处理3d对海马神经元树突分支总长度、树突分支总数均无显著影响,表明在海马神经元发育早期短时间抑制ASICs功能不影响树突发育。Amiloride(10-5mol/L)处理9d可以显著降低树突分支总长度和树突分支总数;PcTX1(1∶20 000稀释)处理9d也可以显著降低树突分支总长度,但对树突分支总数无显著影响。实验结果表明,长时间抑制ASICs功能会影响树突发育。结论 ASICs参与调节树突的发育。
- 高英江天
- 关键词：酸敏感离子通道海马神经元原代培养AMILORIDE
