中国博士后科学基金(20070410874)
- 作品数：10 被引量：39H指数：5
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- 相关机构：河南农业大学河南省林业科学研究院更多>>
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- 硫酸二甲酯处理豫杂一号泡桐丛枝病幼苗的形态变化及其SSR分析被引量：5
- 2011年
- 以豫杂一号泡桐丛枝病幼苗为材料,研究了硫酸二甲酯处理对其幼苗形态和基因组DNA的SSR扩增位点的影响。结果表明,质量浓度为15 mg.L-1的硫酸二甲酯处理3 h幼芽形成的幼苗仍呈现丛枝病幼苗症状,而质量浓度等于15 mg.L-1、处理5 h或大于25 mg.L-1、处理超过3 h的幼芽形成的幼苗形态上均呈现健康状态,但15 mg.L-1硫酸二甲酯处理5 h的幼苗内仍有植原体存在。此外,豫杂一号泡桐丛枝病幼苗、健康幼苗、15、125 mg.L-1硫酸二甲酯处理幼苗的DNA在SSR水平上扩增位点相同。
- 范国强赵改丽翟晓巧曹喜兵
- 关键词：豫杂一号泡桐丛枝病幼苗形态硫酸二甲酯
- 毛泡桐悬浮细胞培养及其植株再生被引量：2
- 2010年
- 先将毛泡桐叶片在MS,WPM,KM8P和B5等液体基本培养基中进行悬浮培养,然后建立毛泡桐叶片悬浮细胞培养及其体外植株再生体系.结果表明,毛泡桐叶片愈伤组织悬浮诱导最适培养基为改良MS+0.2 mg.L-1NAA+8 mg.L-1BA;细胞悬浮培养的最佳起始密度为6.67×106个.mL-1;悬浮愈伤组织芽诱导和根诱导的最适培养基分别为MS+0.3 mg.L-1NAA+17 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA.
- 翟晓巧胡文远范国强
- 关键词：悬浮细胞培养体外植株再生愈伤组织诱导率芽诱导细胞悬浮培养
- 甲基磺酸甲酯处理的豫杂一号泡桐丛枝病幼苗的生长及SSR分析被引量：10
- 2010年
- DNA甲基化在基因表达、细胞分化以及系统发育中起着重要的调节作用（陆光远等,2005;Meyeret al.,1994;Ulian et al.,1996;Rossi et al.,1997）。在植物生长发育过程中,DNA甲基化水平过高或过低,都会导致植物形态发生异常。
- 翟晓巧曹喜兵范国强
- 关键词：豫杂一号泡桐丛枝病SSR
- 泡桐AFLP反应体系的建立及引物筛选被引量：9
- 2010年
- 以豫杂一号泡桐为材料,通过对影响AFLP技术体系的各主要因素的研究,建立了适于泡桐AFLP分析的技术体系.结果表明最佳酶切体系(20μL)为500 ng模板DNA,3 U的PstI和M seI,在37℃下双酶切3 h;20μL最佳连接体系中为酶切产物15μL,0.25μmol.L-1PstI接头,2.5μmol.L-1M seI接头,1μL 10×T4 Buff-er,2 U T4连接酶,22℃连接18 h;20μL最佳预扩反应体系中5μL稀释10倍的连接产物,100μmol.L-1dNTP,2 U Taq酶,250μmol.L-1PstI和M seI引物(P+AGT/M+AGT),2μL 10×PCR Buffer.20μL最佳选择性扩增反应体系中5μL稀释20倍预扩增产物,100μmol.L-1dNTP,2 U Taq酶,350μmol.L-1PstI和M seI引物(P+AGT/M+AGT),2μL 10×PCR Buffer.最后,筛选出了97对适宜于泡桐AFLP分析的引物.
- 曹喜兵何佳翟晓巧范国强
- 关键词：泡桐AFLP引物筛选
- 2种泡桐的丛枝病器官体外植株再生系统的建立被引量：2
- 2009年
- 以毛泡桐及白花泡桐丛枝病叶片、叶柄和茎段为外植体,建立了其体外植株再生系统.结果表明,毛泡桐丛枝病叶片、叶柄和幼嫩茎段在MS+NAA1.1 mg.L-1+6-BA8 mg.L-1,MS+NAA0.1 mg.L-1+6-BA 4mg.L-1和MS+NAA0.5 mg.L-1+6-BA 12 mg.L-1培养基上,最高芽诱导率分别为73.88%,42.11%和25.00%;而白花泡桐的丛枝病不同器官的最适培养基分别为MS+NAA 0.3 mg.L-1+6-BA 12 mg.L-1,MS+NAA0.9 mg.L-1+6-BA16 mg.L-1和MS+NAA0.7 mg.L-1+6-BA20 mg.L-1,最高芽诱导率分别为91.11%,32.78%和13.33%.此外,1/2MS+NAA0.5 mg.L-1和1/2MS+NAA0.3 mg.L-1可分别作为毛泡桐和白花泡桐丛枝病幼芽根诱导的最适培养基.
- 腰政懋曹喜兵翟晓巧范国强
- 关键词：泡桐丛枝病培养基体外植株再生
- 适用于AFLP分析的泡桐DNA提取方法研究被引量：17
- 2009年
- 分别采用3种方法提取了豫杂一号泡桐组培苗叶片DNA,并对其得率和质量进行了检测.结果表明,DNAkit,CTAB-Ⅰ和CTAB-Ⅱ法提取DNA的得率分别为0.250,0.284,0.312 mg.g-1;CTAB法提取的DNA片段大于DNAkit法;利用CTAB-Ⅱ法得到的DNA可被EcoRI,MspI和HpaⅡ完全酶切,该DNA经AFLP-PCR扩增电泳后,产物带型清晰,稳定,重复性好.CTAB-II法为泡桐DNA提取的最佳方法.
- 张延召曹喜兵翟晓巧范国强
- 关键词：泡桐DNA提取限制性酶切AFLP
- 甲基磺酸甲酯处理毛泡桐丛枝病幼苗的形态变化及SSR分析被引量：5
- 2012年
- 在真核生物中，DNA甲基化可导致基因特异表达、细胞分化和染色体失活等，可在不改变DNA碱基排列顺序的同时，阻断遗传信息的传递，
- 曹喜兵范国强翟晓巧
- 关键词：SSR分析泡桐丛枝病甲基磺酸幼苗
- 硫酸二甲酯对毛泡桐丛枝病幼苗植原体及SSR扩增位点的影响被引量：7
- 2012年
- 通过形态观察、巢式PCR和SSR分析,研究了不同浓度硫酸二甲酯(DMS)处理对毛泡桐丛枝病幼苗植原体及泡桐DNA的SSR扩增位点变化的影响。结果表明:质量浓度为15 mg/L的硫酸二甲酯处理5 h或质量浓度大于25 mg/L的硫酸二甲酯处理3 h以上仍成活的幼苗其形态上可转变为健康幼苗,但15 mg/L硫酸二甲酯处理5 h时形态健康的幼苗仍有丛枝病植原体的存在,而其余浓度处理后存活的幼苗内则检测不到植原体;质量浓度大于150 mg/L的硫酸二甲酯处理3 h以上的幼苗全部死亡。此外,毛泡桐丛枝病幼苗、健康幼苗和DMS处理后形态健康幼苗DNA的SSR扩增位点相同。
- 范国强赵改丽翟晓巧曹喜兵
- 关键词：毛泡桐丛枝病
- 甲基磺酸甲酯对毛泡桐丛枝病苗DNA甲基化的影响被引量：2
- 2014年
- 分别采用扩增片段长度多态性(AFLP)和甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术,研究不同浓度甲基磺酸甲酯(MMS)处理毛泡桐丛枝病幼苗后DNA碱基序列及其甲基化的变化,并对发病相关特异DNA片段对应蛋白的功能进行预测。结果表明:健康和丛枝病幼苗及MMS处理后丛枝病幼苗的DNA碱基序列在AFLP水平上相同。随着MMS浓度的升高,处理后丛枝病幼苗的总DNA甲基化水平逐渐升高,但最大浓度(100 mg·L-1)MMS处理后的DNA甲基化水平仍低于健康苗。与毛泡桐丛枝病幼苗相比,MMS处理后丛枝病幼苗的DNA去甲基化多态性皆低于DNA甲基化多态性。序列同源性功能分析结果表明特异DNA甲基化片段对应蛋白功能可能涉及物质和能量代谢、转录和转运、信号转导及致病相关。毛泡桐丛枝病发生可能与其DNA甲基化水平降低和DNA甲基化模式变化密切相关。
- 曹喜兵赵振利范国强邓敏捷董焱鹏
- 关键词：毛泡桐丛枝病DNA甲基化AFLPMSAP
- 豫杂一号泡桐茎尖的玻璃化法超低温保存方法研究被引量：1
- 2011年
- 以豫杂一号泡桐健壮组培苗为研究材料,从低温锻炼时间、预处理时间、装载液处理时间、玻璃化液处理时间及液氮保存时间5个方面研究其茎尖玻璃化法超低温保存方法。结果表明,豫杂一号泡桐茎尖玻璃化法超低温适宜的保存方法为,2 cm的茎尖在附加0.4 mol·L-1甘油和0.3 mol·L-1蔗糖的MS培养基上预培养2天,然后剥取2～3 mm的茎尖,用装载液(MS+2 mol·L-1甘油+0.4 mol·L-1蔗糖)装载60 min,再用玻璃化溶液(PVS2)于0℃下处理1.5 h,换1次玻璃化溶液后迅速投入液氮,保存l h后于40℃水浴中化冻70 s,再转到室温下用去装载液(MS+1.2 mol·L-1蔗糖)洗涤2次,每次10 min。以TTC法检测,豫杂一号泡桐茎尖成活率最高可达85.74%,保存效果较好。
- 翟晓巧程斐张晓申
- 关键词：豫杂一号泡桐茎尖超低温保存玻璃化法成活率
