中国博士后科学基金(20070410882)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：黑龙江八一农垦大学东北林业大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金黑龙江省教育厅资助项目国家自然科学基金更多>>
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- 抗黄曲霉毒素B1重链IgG2b亚型单克隆抗体的制备及应用被引量：1
- 2009年
- 目的制备抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的重链IgG2b亚型单克隆抗体,并建立黄曲霉毒素B1的间接竞争ELISA检测方法。方法采用AFB1-BSA偶联物为免疫抗原,AFB1-STI偶联物为检测抗原,利用间接竞争ELISA筛选分泌抗AFB1单抗的细胞株,并对抗体进行鉴定。结果筛选到1株能分泌特异性抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其染色体数目为(90±10)条;所分泌的单抗亚类重链为IgG2b,轻链为λ;间接ELISA检测该株杂交瘤细胞分泌上清效价在1∶12800～1∶25600,纯化腹水效价为1∶105～1∶106。传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;建立的间接竞争ELISA检测方法的最低检出限为0.001ng/ml,校正曲线的线性范围为0.005～5ng/ml,IC50为0.01ng/ml;与AFB1的结构类似物AFM1和化学结构有差异的脱氧雪腐镰刀菌烯醇的交叉反应率分别为1.4%和<1%。结论所制备的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体具有高度特异性和稳定性,可应用于间接竞争ELISA检测方法。
- 裴世春李玉花张园园才琳
- 关键词：黄曲霉毒素B1单克隆抗体酶联免疫试验
- 黄曲霉毒素B1检测ELISA条件的优化
- 采用黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白偶联物(AFB1—BSA)抗原免疫Balb/C小鼠获得特异性抗体。以AFB1—STI为检测抗原,利用此抗体,进行间接竞争ELISA法试验。通过正交实验确定了最佳抗原包被反应质量浓度为1.0...
- 才琳张甄钱丽丽张园园裴世春
- 关键词：黄曲霉毒素B1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
- 文献传递
- 黄曲霉毒素B1检测ELISA条件的优化被引量：7
- 2009年
- 采用黄曲霉毒素B1与牛血清白蛋白偶联物(AFB1—BSA)抗原免疫Balb/C小鼠获得特异性抗体。以AFB1—STI为检测抗原,利用此抗体,进行间接竞争ELISA法试验。通过正交实验确定了最佳抗原包被反应质量浓度为1.0μg/mL;最佳抗原包被条件为:4℃过夜,一抗和酶标二抗IgG—HRP;最佳稀释度为1∶200000和1∶5000。在此优化条件下制备的抗体检测黄曲霉毒素B1具有很高的特异性和灵敏性,具有实际应用价值。
- 才琳张甄钱丽丽张园园裴世春
- 关键词：黄曲霉毒素B1酶联免疫吸附测定单克隆抗体
