新疆维吾尔自治区自然科学基金(2009211B22)
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 相关作者：李佳王玉杰彭彧王祝迁木拉提·热夏提更多>>
- 相关机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠触须毛囊干细胞的分离培养和鉴定被引量：14
- 2011年
- 背景:毛囊干细胞在体内膀胱及周围组织环境作用下有可能向尿路上皮细胞和平滑肌细胞分化,成为目前研究较新的干细胞之一。目的:建立一种高效简单的分离培养和鉴定毛囊干细胞的方法。方法:取大鼠触须部皮肤组织,体式显微镜下分离出毛囊组织,中性蛋白酶Ⅱ与胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液"两步酶法"消化;所得细胞悬液中添加含体积分数10%胎牛血清的角质细胞无血清培养基,Ⅳ型胶原差速贴壁法筛选毛囊干细胞,20min以内贴壁的细胞作为实验组,未贴壁的细胞作为对照组;待筛选后的细胞生长至70%～80%汇合后,进行传代培养。结果与结论:筛选后的细胞形态均匀一致,折光性强,呈典型的"铺路石状"。透射电镜显示细胞处于原始状态。流式细胞仪检测实验组CD34和β1整合素的表达分别为(39.52±19.57)%和(93.46±4.73)%,对照组相应为(19.20±11.53)%和(63.57±14.42)%,两组间差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明联用显微分离技术、二步酶法及差速贴壁法筛选可以获得纯度较高的毛囊干细胞。CD34和β1整合素表达是较理想的鉴定方法。
- 王祝迁木拉提.热夏提李佳王玉杰
- 关键词：毛囊干细胞差速贴壁CD34Β1整合素
- 兔膀胱脱细胞基质负载大鼠毛囊干细胞的体外培养
- 2013年
- 背景:组织工程学的兴起为泌尿系组织或器官的修复和重建开辟了新的途径,膀胱脱细胞基质是较好的泌尿系组织工程修复的替代材料。目的:构建毛囊干细胞与异种膀胱脱细胞基质为支架的细胞支架复合物,体外培养观察细胞在支架上的生长状态。方法:制备新西兰兔膀胱脱细胞基质,通过扫描电镜和Masson染色检测材料脱细胞效果,采用二次沉淀法将第3代毛囊干细胞静态接种于膀胱脱细胞基质表面,倒置显微镜下观察细胞生长状态,并绘制细胞生长曲线,组织学检测和扫描电镜观察细胞在材料表面的生长状况。结果与结论:制备的膀胱脱细胞基质为白色半透明膜状,扫描电镜下观察为纤维网状结构,未见细胞残留。Masson染色提示膀胱脱细胞基质为胶原结构,无明显细胞残留。细胞材料体外复合培养48 h后倒置显微镜下观察膀胱脱细胞基质周围毛囊干细胞生长状态良好,1周后扫描电镜下观察毛囊干细胞伸展、黏附于支架表面。结果可见毛囊干细胞与膀胱脱细胞基质体外培养具有良好的生物相容性。
- 彭彧彭彧王玉杰李佳
- 关键词：生物材料细胞外基质材料干细胞膀胱脱细胞基质毛囊干细胞国家自然科学基金
- 不同体积分数富血小板血浆与大鼠毛囊干细胞的增殖被引量：2
- 2012年
- 背景:研究发现富血小板血浆在促进骨再生、软组织修复以及组织工程研究中种子细胞的增殖分化方面有着重要的作用。目的:观察不同制备方法、不同体积分数富血小板血浆对体外培养大鼠毛囊干细胞增殖的影响。方法:联合采用显微分离技术,两步酶法及差速贴壁法获取纯度较高、生长状态较好的第3代大鼠毛囊干细胞。采用2次离心法和3次离心法获取大鼠富血小板血浆,分别按1.0%,2.0%,4.0%不同浓度稀释于K-SFM培养基中,以加入含不同体积分数富血小板血浆培养基组为实验组,并以未加入富血小板血浆的培养基为对照。结果与结论:联合采用显微分离技术,两步酶法及差速贴壁法能获取纯度较高的毛囊干细胞。培养前2d各实验组与对照组的比较差异无显著性意义(P>0.05),实验组加入富血小板血浆干预2d后,毛囊干细胞出现较高的增殖活性,第4天开始进入生长对数期,细胞第5天即达到70%-80%汇合,培养六七天细胞进入平台期。高剂量富血小板血浆组对细胞增殖效果优于低剂量组,体积分数相同的情况下3次离心法制备所得富血小板血浆对毛囊干细胞增殖作用明显高于2次离心法,以加入3次离心法制备且体积分数为4.0%的富血小板血浆组毛囊干细胞增殖效果最明显。
- 彭彧王玉杰李佳木拉提.热夏提
- 关键词：富血小板血浆毛囊干细胞增殖
