吉林省科委基金(20080218)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：吉林出入境检验检疫局吉林农业大学辽宁出入境检验检疫局更多>>
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- 利用PCR方法检测锦鲤疱疹病毒3个主要靶基因被引量：8
- 2011年
- 为建立锦鲤疱疹病毒(KHV)多靶基因PCR检测方法,本实验将KHV接种鲤鱼鳍条细胞,收获病变细胞悬液,提取DNA,根据GenBank中登录的KHV基因序列及出入境检验检疫行业标准推荐的基因(ORF7),设计合成3对特异性引物,针对胸苷激酶基因(TK)、聚合酶基因(Sph)和ORF7基因进行PCR检测。通过优化后的反应体系进行特异性、敏感性试验和样品检测。结果表明:3对引物能够分别特异性扩增出409bp、292bp和484bp片段;敏感性试验表明对TK基因检测的敏感性高于Sph和ORF7基因,其最低检测量为1.9×106copies/μL;采用优化的3个PCR方法对8个有临床症状的样品进行检测,其中3份样品的3个基因PCR扩增结果均为阳性。因此,本研究选取的3个基因均可用于KHV的检测及确证实验。
- 孟庆峰张琼宋战昀肖成蕊刘阳蔡阳张艳钱爱东王伟利
- 关键词：锦鲤疱疹病毒PCR
- 锦鲤疱疹病毒双基因检测方法的研究被引量：3
- 2012年
- 为建立锦鲤疱疹病毒(KHV)双基因检测方法,本研究根据KHV聚合酶基因(Sph)和胸苷激酶基因(TK)的保守序列设计2对引物,建立两基因同时检测的PCR方法。结果表明,利用双基因同时检测KHV,可以同时特异扩增出570 bp和155 bp片段,而与鲤春病毒血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤鱼疱疹病毒无扩增反应。而且所建立的双基因检测方法对临床样品的检测结果与单一PCR方法比较符合率为100%。为进一步研究KHV以及诊断方法奠定了基础。
- 孟庆峰刘阳刘金华宋战昀吕文雪王伟利钱爱东
- 关键词：锦鲤疱疹病毒TK基因
