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近缘新对虾cyclin B基因的克隆与原核表达被引量：2: 2013年; 采用RACE技术,克隆了近缘新对虾cyclin B基因,该序列全长1 667 bp,编码区1 209bp共编码402个氨基酸,所推导的氨基酸序列N端不存在信号肽。BLAST比对后发现,其氨基酸序列与刀额新对虾的同源性达90%。经RT-PCR检测,cyclin B基因在近缘新对虾的卵巢和肌肉中表达水平最高,胸神经节和心脏次之,鳃、眼柄神经节、肝胰腺几乎没有表达。推测主要与cyclin B在细胞周期中调控细胞分裂的功能有关。原核表达结果显示,pET32a表达载体在0.2 mmol/L IPTG、25℃诱导4 h条件下可得到纯度较高的分子量约67 ku的蛋白。; 杨亚男黄辉洋黄小帅叶海辉李少菁; 关键词：CYCLIN B基因克隆原核表达

水生动物细胞周期蛋白研究进展被引量：5: 2006年; 细胞周期蛋白是真核细胞周期循环中主要的调控因子,参与细胞周期的精密调控,维持细胞正常生长及发育平衡.本文简述了细胞周期蛋白与水生动物卵子发生、早期胚胎发育的关系以及细胞周期蛋白在生殖过程的表达与调控.; 虞晋晋叶海辉黄辉洋; 关键词：细胞周期蛋白分子机制

卵巢发育过程拟穴青蟹前脑神经分泌细胞超微结构的变化被引量：3: 2008年; 利用透射电镜,比较观察了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)卵巢未发育期、将成熟期和成熟期前脑神经分泌细胞的超微结构.结果表明:在未发育期,前脑神经细胞尚未观察到神经分泌颗粒.在将成熟期,前脑Ⅱ型、Ⅲ型细胞均出现大量的神经分泌颗粒.在成熟期,Ⅱ型、Ⅲ型细胞神经分泌颗粒大量释放.拟穴青蟹卵巢成熟发育过程前脑Ⅱ型、Ⅲ型细胞超微结构的变化,提示Ⅱ型、Ⅲ型细胞可能是促性腺激素细胞,参与生殖内分泌调控.; 叶海辉黄辉洋王桂忠李少菁; 关键词：神经分泌细胞生殖拟穴青蟹前脑

刀额新对虾周期蛋白B基因的分子克隆及序列分析被引量：3: 2012年; 周期蛋白B(cyclin B)是真核生物细胞周期的一种重要调控原件,通过调节周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase,CKD)的活性可以控制细胞周期.运用RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆了刀额新对虾(Metapenaeus ensis)cyclin B基因.刀额新对虾cyclin B的cDNA全长为1 681bp,5′端非编码区为111bp,3′端非编码区为355bp,开放阅读框为1 215bp,编码404个氨基酸,平均分子质量为45 767.9u,pI为8.81.Blast比对后发现,其氨基酸序列与斑节对虾(Penaeus monodon)的同源性达约90%.基于cyclin B序列所绘制的进化树基本上能反映出各物种间的进化关系.半定量RT-PCR结果显示,刀额新对虾的cyclin B基因在不同组织表达中具有明显的组织特异性,在鳃、卵巢和心脏中有较高的表达量,在眼柄神经节和胸神经节中表达量较低.推测该差异性主要与cyclinB在细胞周期中调控细胞分裂的功能有关.; 杨亚男叶海辉尚丽丽黄辉洋李少菁; 关键词：刀额新对虾基因克隆

长毛对虾和凡纳对虾Cyclin B的分子克隆与序列分析: 以长毛对虾和凡纳对虾的卵巢为材料,提取RNA,反转录合成出cDNA。根据已报道序列设计简并引物,扩增得到两种虾的Cyclin B cDNA片段。利用cDNA末端快速扩增和基因克隆等分子生物学技术,分别克隆出长毛对虾和凡纳...; 虞晋晋黄辉洋叶海辉李少菁王桂忠; 关键词：CDNA 长毛对虾凡纳对虾; 文献传递

中国鲎β-actin基因的克隆与组织表达被引量：1: 2015年; 中国鲎(Tachypleus tridentatus)是一种古老的海洋动物.利用RT-PCR和RACE等分子生物学技术,获得中国鲎β-肌动蛋白基因(中国鲎β-actin,简称为TTBA)全长cDNA序列,总共1 515bp,包括70bp 5′非编码区(untranslated regions,UTR)、314bp 3′UTR和一个1 131bp的开放阅读框(open reading frame,ORF).ORF可编码376个氨基酸残基,总分子质量约为41 807.7u.同源蛋白的序列比较结果显示,TTBA推导氨基酸序列与其他物种具有很高的相似性,推测β-actin基因具有很高的遗传保守性.而基于β-actin蛋白序列比对而绘制的系统进化树显示中国鲎与其他节肢动物具有较高的相似性,此结果与其现行的分类地位基本一致.以Real-time RT-PCR法检测表明,在卵子发生各期的卵巢组织中TTBA表达量保持稳定(p>0.05),可作为定量检测的内参基因.; 李文杏黄静茹叶海辉黄辉洋李少菁; 关键词：中国鲎 Β-ACTIN基因克隆

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国家自然科学基金(40406030)