国家自然科学基金(90409002)
- 作品数：18 被引量：89H指数：7
- 相关作者：梁清华熊新贵陈疆萧梅芳曾年菊更多>>
- 相关机构：中南大学浏阳市集里医院解放军第163医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省重点学科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 镇肝熄风汤对脑出血肝阳化风证患者外周血单个核细胞蛋白质组学的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:观察镇肝熄风汤治疗脑出血肝阳化风证(方证相应)前后外周血单个核细胞蛋白质双向凝胶电泳图谱的动态变化,探讨脑出血肝阳化风证的蛋白质表达规律,寻找镇肝熄风汤所作用的蛋白及疗效机制。方法:利用固相梯度双向凝胶电泳技术建立脑出血(10例)肝阳化风证镇肝熄风汤治疗10日前后及健康对照组(10例)外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,经PDQuest8.0软件分析,选取差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪获得肽质量指纹图谱,用Mascot软件搜索数据库鉴定部分差异蛋白质。结果:筛选出22个差异表达蛋白质点,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较有20个差异表达蛋白质点,8个表达下调,7个表达上调,5个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较4个表达下调,5个表达上调,2个缺失,9个表达与健康人无明显差异;在挖取的20个蛋白质点中有8个得到鉴定,其中脑出血肝阳化风证与健康对照组比较6个表达下调,1个表达上调,1个缺失;脑出血肝阳化风证经镇肝熄风汤治疗后与健康对照组比较2个表达下调,1个蛋白缺失,5个表达与健康人无明显差异。结论:初步建立了脑出血肝阳化风证外周血单个核细胞蛋白双向凝胶电泳图谱,初步鉴定了部分与脑出血肝阳化风证相关的蛋白及镇肝熄风汤可能的多靶点蛋白调节机制,这些蛋白功能涉及细胞代谢、信号转导、电子传递、细胞骨架等。
- 赵艳梁清华熊新贵范荣梁湘辉杨波关勇军
- 关键词：外周血单个核细胞镇肝熄风汤蛋白质组学
- 脑梗死肝阳化风证外周血淋巴细胞相关蛋白质鉴定和分析被引量：2
- 2008年
- 目的应用比较蛋白质组学方法分析并鉴定脑梗死肝阳化风证和阴虚生风证的相关蛋白质,探讨中医肝阳化风证及阴虚生风证的本质内涵。方法设计选择脑梗死肝阳化风证、阴虚生风证患者及健康人各15例,提取外周静脉血淋巴细胞总蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,PDQuest V7.3.1软件比较分析3组双向凝胶电泳图谱并识别差异表达蛋白质,对有意义的蛋白进行质谱分析和数据库检索鉴定。结果经比较分析,发现肝阳化风证组与阴虚生风证组差异蛋白质点23个,鉴定出22个共15种蛋白质,相同表达蛋白质点8个,鉴定出6个蛋白质点共5种蛋白质。包括代谢酶类、信号传导蛋白、细胞骨架蛋白、抗氧化蛋白等多类蛋白质表达异常。结论脑梗死肝阳化风证与阴虚生风证具有相同蛋白和差异蛋白,提示二者具有相同的物质基础和不同的本质内涵。
- 曾年菊梁清华熊新贵区健刚萧梅芳张雨星梁相辉赵艳杨波刘维
- 关键词：肝阳化风证脑梗死质谱分析蛋白质组学
- 肝阳上亢与肝阳化风证大鼠模型脾淋巴细胞的蛋白质组学分析被引量：4
- 2013年
- 目的建立高血压肝阳上亢证(简称肝阳上亢证)与出血性中风、缺血性中风肝阳化风证脾淋巴细胞双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定肝阳上亢证与肝阳化风证相同与差异表达的蛋白,探讨二证的本质内涵。方法将SD大鼠随机分为正常组、肝阳上亢证、缺血化风组及出血化风组,从大鼠一般情况、血压测定、行为学与形态学及氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评价模型,分离大鼠脾淋巴细胞,进行双向凝胶电泳,蛋白质组双向电泳图像(PDQUEST)软件分析,目标蛋白质点用基质辅助激光解析电离质谱进行鉴定。结果成功复制3种证型动物模型。肌动蛋白β等4个蛋白在3组模型组中均较正常组表达上调,肝阳化风组较肝阳上亢组表达上调;膜联蛋白Ⅲ等3个蛋白在3组模型组中均较正常组表达下调,肝阳化风组较肝阳上亢组表达下调;膜联蛋白Ⅲ等7个蛋白在出血性化风组与缺血性化风组比较表达无明显差异;还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶在缺血性化风组较出血性化风组表达下调。结论肝阳上亢证与化风证既有相同的蛋白质表达又有差异的蛋白质表达,提示二证既有相同的物质基础又有不同的本质内涵,为肝阳上亢证与肝阳化风证本质研究提供了科学依据。
- 张扬熊新贵陈疆梁清华吴丹祝皓张永
- 关键词：蛋白质组学肝阳化风脾淋巴细胞
- 高血压脑出血肝阳化风证与阴虚风动证的蛋白质组学比较研究
- 目的动态观察高血压脑出血患者急性期肝阳化风证(简称肝阳化风证)、恢复期阴虚风动证(简称阴虚风动证)外周血单个核细胞的蛋白质差异表达变化,分析脑出血不同发病阶段不同中医证型的蛋白质表达规律,探讨脑出血肝阳化风证、阴虚风动证...
- 杨波梁清华熊新贵萧梅芳
- 关键词：高血压脑出血肝阳化风证阴虚风动证外周血单核细胞蛋白质组学
- 泛素羧基末端水解酶在肝阳化风证中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的比较泛素羧基末端水解酶在不同证中的表达及其意义。方法SD大鼠分为正常组,肝阳上亢组,肝阳化风组(包括出血性中风肝阳化风和缺血性肝阳化风)正常组不做处理,肝阳上亢组大鼠加灌附子汤4周复制肝阳上亢证动物模型,脑出血肝阳化风组大鼠加灌附子汤4周后用Ⅶ胶原酶诱导脑出血模型,复制成脑出血肝阳化风模型。脑缺血肝阳化风组大鼠加灌附子汤4周后用线栓法造成脑缺血模型,复制成缺血性肝阳化风模型。PCR法检测正常组,肝阳上亢组,肝阳化风组泛素羧基末端水解酶的基因表达情况。结果与正常组与肝阳上亢组比较,肝阳化风组泛素羧基末端水解酶表达显著下降(P<0.01)。结论泛素羧基末端水解酶在生理情况下降解突变、损伤和错误折叠蛋白质的主要途径,肝阳化风证泛素羧基末端水解酶的下降明显,提示肝阳化风证的泛素的再利用受阻,导致蛋白质异常聚积,泛素羧基末端水解酶可能成为判断疾病发展到某一阶段的标志。
- 谢映梁清华熊新贵蒋勇前王娟鄢东红陈疆刘爱萍范荣
- 关键词：肝阳化风证
- 大定风珠治疗脑出血阴虚动风证证效关系的蛋白质组学研究
- 目的：通过鉴定并分析脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)阴虚动风证患者大定风珠对证、镇肝熄风汤非对证治疗与健康对照组比较外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclea...
- 梁清华陈疆张扬熊新贵赵艳
- 关键词：脑出血大定风珠单个核细胞蛋白质组
- 原发性高血压肝阳上亢患者血清双向凝胶电泳图谱的建立
- 目的建立高血压肝阳上亢证候血清双向凝胶电泳图谱,初步分析其蛋白质表达情况。方法双向凝胶电泳(2-DE)分离高血压肝阳上亢证血清标本,考马斯亮兰染色, PD-QUEST图像分析系统分析,从胶中选取分离较好的蛋白质点,基质辅...
- 梁清华
- 关键词：双向凝胶电泳高血压肝阳上亢证蛋白质组
- 文献传递
- 高血压脑出血肝阳化风证与肝阳上亢证患者血清蛋白质组学研究
- 目的初步建立高血压脑出血肝阳化风证、高血压肝阳上亢证及健康对照的血清蛋白质组表达图谱,初步鉴定其差异表达的蛋白质。方法各组血清均以试剂盒去除白蛋白及IgG,以BCA法测血清蛋白浓度。以双向凝胶电泳分离各组血清蛋白质,考马...
- 熊新贵梁清华侯俊良陈疆刘爱平鄢东红关勇军
- 关键词：脑出血肝阳化风证蛋白质组血清
- 文献传递
- 椎动脉缺血型颈椎病肝阳化风证患者外周血淋巴细胞蛋白质组学研究被引量：2
- 2010年
- 目的采用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,建立椎动脉缺血型颈椎病肝阳化风证和肝阳上亢证高分辨率的二维凝胶电泳图谱,从蛋白质组学角度探讨椎动脉缺血型颈椎病中医肝阳化风证和肝阳上亢证的本质内涵。方法设颈椎病肝阳化风证组、颈椎病肝阳上亢证组及健康人对照组3组,取外周静脉血分离淋巴细胞提取蛋白质,经双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色获取凝胶图谱,以PDQuestV7.3.1软件对三组表达图谱进行差异分析,选定差异蛋白点进行质谱分析和SWISS-PROT数据库检索鉴定蛋白质。结果建立了颈椎病肝阳化风证组、肝阳上亢证组、健康人组外周静脉血淋巴细胞2-DE图谱;通过分析比较,发现16个蛋白质点在肝阳化风证组中异常表达,12个蛋白质点在肝阳上亢证组中异常表达,肝阳化风证组与肝阳上亢证组比较,分析发现16个差异蛋白点,3个相同蛋白质点。结论颈椎病(椎动脉缺血型)肝阳化风证与肝阳上亢证有差异蛋白又有相同的蛋白,提示同病异证在共同的物质基础上存在着不同的本质内涵。
- 陈疆张雨星熊新贵梁清华曾年菊区健刚萧梅芳赵艳范荣
- 关键词：椎动脉缺血型颈椎病肝阳化风证二维电泳蛋白质组学
- 高血压性脑出血肝阳化风证大鼠模型的建立被引量：10
- 2007年
- 目的建立一种病证结合动物模型——高血压性脑出血肝阳化风证大鼠模型。方法将45只SD大鼠随机分为正常组、高血压肝阳上亢证组、高血压脑出血肝阳化风证组,采取饮用高渗盐水(1.5%)同时灌服附子汤造成高血压肝阳上亢证模型,在肝阳上亢证模型基础上采取脑内注入Ⅶ型胶原酶法诱导大鼠脑出血,造成高血压性脑出血肝阳化风证,采用症状和体征观察、神经功能评估、组织学检查等方法对所建模型进行评价。结果模型大鼠均出现血压明显升高,烦躁、易激惹、眼结膜深红、头晕、口渴、大便干结等症状或体征,肝阳化风组大鼠并出现脑血肿、脑水肿等出血性脑损伤病理改变与偏瘫等神经缺损体征,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),与肝阳上亢组比较血压进一步升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论该模型能够部分模拟人类高血压性脑出血肝阳化风证的病因病机和临床症候,具有病证结合的特点。
- 熊新贵梁清华陈疆谢映范荣刘爱平鄢东红
- 关键词：肝阳化风证模型建立高血压脑出血附子
