国际科技合作与交流专项项目(2009DFA32020)
- 作品数：12 被引量：55H指数：5
- 相关作者：马鸿翔张旭杨丹耿志明张平平更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院南京师范大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学理学更多>>
- 禾谷镰刀菌与亚细亚镰刀菌种型特异性的SCAR标记被引量：1
- 2012年
- 为发掘区分Fusarium asiaticum与Fusarium graminearum这两种赤霉病菌的特异性分子标记,从江淮麦区赤霉病穗上分离获得72个赤霉病菌株,进行种型与化学型鉴定,并利用SRAP引物对F.asiaticum-NIV、F.asiati-cum-3ADON及F.graminearum-15ADON 3种类型的致病菌进行种型及化学型特异性标记筛选。通过对特异性标记进行回收、转化与测序,根据序列设计出3个镰刀菌种型特异性SCAR引物,并用上述72个菌株进行验证。结果显示SCAR标记me1/em2-172仅在F.asiaticum中扩增出172 bp的特异性条带,标记me1/em6-311和me9/em4-639分别只在F.graminearum中扩增出311 bp和639 bp的特异性条带。表明,本研究获得的3个SCAR标记是F.asi-aticum和F.graminearum种型特异性标记,可用于区分这两种镰刀菌,为深入研究其致病机理及防治赤霉病的发生及危害提供了研究基础。
- 周永进马鸿翔余桂红孙晓波张旭李杨瑞
- 关键词：镰刀菌SRAP标记SCAR标记
- 小麦抗赤霉病品种NBS同源序列克隆与分析被引量：4
- 2012年
- 根据二穗短柄草NBS-LRR类基因的保守序列设计同源引物,以小麦抗赤霉病品种苏麦3号、宁7840和望水白基因组DNA为模板,通过PCR扩增,得到43条序列,其中4条为非编码序列或结构域不完整;39条与植物抗病基因同源,其中的7条内部存在终止密码子,可能是假基因,经过比对分析,其余32条具有连续的开放阅读框和保守结构域,推导的氨基酸序列均具有Kinase-1a、Kinase-2和Kinase-3a及GLPL区等几个保守区,在GenBank中均能找到与之高度同源的其他物种的核酸序列,并且Kinase-2的最后一个氨基酸均为色氨酸(W),属于non-TIR类NBS基因。32条序列可分为4大类,它们之间核苷酸同源性为64%-98%,编码氨基酸同源性为22%-98%。根据序列分析随机设计5对不同基因特异性引物,并利用RT-PCR技术进行表达分析,结果表明,7-1、s-3、s-4和w-2均能表达,说明这些片段可能是功能性抗病基因的部分序列;7-13不表达,再次证明属于假基因。32条序列在之前未被报道过,这些RGA可以作为筛选赤霉病功能性抗病基因的候选序列。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：NBS-LRR抗病基因同源序列小麦赤霉病
- 小麦中一个ADF基因克隆与表达分析被引量：7
- 2011年
- 肌动蛋白在植物防御真菌侵染过程有重要作用,有众多基因调节肌动蛋白表达变化,肌动蛋白解聚因子(Actin-depolymerizing factor,ADF)是其中一个重要调节因子。利用同源序列设计引物进行PCR扩增后,通过电子克隆技术得到一个新的TaADFcDNA全长,在小麦望水白和Alondra两个品种中分别得到一个827bp和818bp的核苷酸序列,开放阅读框均为145aa,预测编码蛋白大小为13.14kD。编码氨基酸的保守性分析发现均有4个保守位点,分别为磷酸化位点(phosphorylation site)、肌动蛋白结合位点(actin binding site)、核定位信号(nuclear location signal)和F-Actin结合位点(F-Actin binding site)。将此基因与其他几个物种的ADF蛋白保守性和亲缘关系进行分析表明,该基因氨基酸序列非常保守,与水稻等作物亲缘关系密切。经过Real-Time PCR分析其在小麦各个组织的表达,叶中表达量最高,根中表达量最低。利用禾谷镰刀菌侵染后分析在抗赤霉病病品种望水白和感病品种Alondra中穗部的表达发现,两者ADF在72h内均上调表达。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：肌动蛋白解聚因子小麦禾谷镰刀菌REAL-TIMEPCR
- 利用响应面法研究改良剂对宁麦15面条品质的影响被引量：3
- 2012年
- 为了研究不同改良剂对宁麦15面条品质的影响,以宁麦15面粉为基础粉,采用响应面法中心组合试验设计,研究了谷朊粉、瓜尔豆胶和羟丙基淀粉含量对面条感官得分的影响,并建立了面条感官得分与因素变量的二次回归模型方程,该模型回归显著。响应面分析结果表明,最佳配粉工艺条件为:谷朊粉含量1.2%、瓜尔豆胶含量1.5%、羟丙基淀粉含量2.5%。在此工艺条件下面条感官得分预测值为80.9分,验证值为80.2分,与预测值的相对误差为0.87%。因素之间的交互作用显著影响面条感官得分,与不使用改良剂的感官评分70分相比提高了14.6%。
- 杨丹马鸿翔耿志明姚金保姚国才张旭张平平张鹏杨学明
- 关键词：改良剂面条品质响应面法
- 三氟甲烷磺酸水解-HPLC法测定小麦中结合态脱氧雪腐镰刀菌烯醇
- 2012年
- 目的建立三氟甲烷磺酸水解?高效液相色谱(HPLC)测定小麦中结合态脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)含量的分析方法。方法通过3因素4水平正交试验,确立三氟甲烷磺酸水解小麦中结合态DON的最佳条件。结果水解温度60℃,酸浓度1.0mol/L,时间60min为最佳检测条件。检测了7个小麦样品中的结合态DON含量,在DON污染的小麦样品中均检出有结合态DON,其含量与游离态DON之比为0.20～0.36。结论所建方法具有良好的可靠性和实用性。
- 耿志明杨丹张平平张旭杨学明马鸿翔
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇高效液相色谱法
- 江淮流域小麦赤霉病菌的遗传多样性被引量：7
- 2010年
- 小麦赤霉病是温暖潮湿和半潮湿地区麦类作物的重要病害。小麦感染赤霉病后,不仅减产严重、品质变劣,而且病菌产生的毒素还会对人畜健康产生危害。引起小麦赤霉病的镰刀菌至少有20种,鉴定病原菌及种群结构对赤霉病的防治具有重要意义。针对我国江淮流域江苏、河南、安徽、湖北省的赤霉病菌株,利用7对种属特异性引物进行种属鉴定,在此基础上依据RAPD和AFLP分子标记进行遗传多样性分析。研究结果表明,所有供试菌株均属于禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schw),分子标记Shannon多样性指数(I)以及Nei氏基因多样度(h)均显示江淮流域禾谷镰刀菌具有较为丰富的遗传多样性。遗传标记相似系数变异范围为0.57～0.99,表明菌株间存在明显的遗传多样性。以相似系数0.63为阈值,可将供试菌株划分为3类,亚类分析表明江淮流域收集菌株具有一定的地域性分布。
- 张旭邢锦城马鸿翔温云平陆维忠袁生
- 关键词：小麦赤霉病禾谷镰刀菌RAPDAFLP
- 小麦赤霉病拮抗菌的筛选及应用被引量：15
- 2012年
- 为了探索生物防治赤霉病的方法,本试验利用稀释涂布平板法、平板对峙法从多种植物体内及其土壤中分离、筛选抗小麦赤霉病的拮抗菌,并在盆栽和大田条件下研究拮抗菌对小麦赤霉病的防治效果。研究结果显示:分离获得了300株菌株,其中30株菌株对禾谷镰刀菌有明显的抑制作用,菌株NS-QCT的抑菌活性最强。对NS-QCT菌株PCR扩增获得的16S rDNA基因进行测序、比对,发现NS-QCT菌株与Streptomyces malaysiensisMJM1968菌株相似性为99%,表明其应该是一株链霉菌(S.malaysiensis)。盆栽和田间试验结果表明,NS-QCT菌株对小麦赤霉病有一定的抑制作用。
- 管章玲辛海峰李建宏马鸿翔张旭
- 关键词：赤霉病拮抗菌生物防治
- 改良剂对面团流变学性质的影响被引量：3
- 2012年
- 为了探讨小麦粉改良剂对面团流变学性质的影响,以宁麦15面粉为原料,分别加入不同比例的谷元粉、瓜尔豆胶和变性淀粉,用粉质仪和拉伸仪研究其对面团流变学特性的影响,以期生产出符合市场需求的面条专用粉。利用响应面法中心组合试验设计,采用综合加权评分法评估改良剂对多指标流变学性质的影响。结果表明:各因素对综合加权评分值的影响程度为谷元粉>变性淀粉>瓜尔豆胶,两两因素之间存在相互作用。适宜配粉条件为:谷元粉1.4%、瓜尔豆胶1.5%,变性淀粉2.2%。在此条件下流变学指标的综合加权评分预测值为0.869,验证值为0.856,与预测值的相对误差为1.5%。表明添加适量的改良剂能够显著提高宁麦15面粉的品质特性。
- 杨丹马鸿翔耿志明姚金保姚国才张旭张平平张鹏杨学明
- 关键词：改良剂流变学性质
- 一株萎缩芽孢杆菌在小麦中的定植及对赤霉病的防治被引量：12
- 2013年
- 从小麦的叶片中筛选获得了一株抗赤霉病菌株XM5,经16S-23SrDNAITS序列的扩增比对,鉴定其为萎缩芽孢杆菌(Bacillusatrophaeus)。通过逐步提高抗生素浓度驯化,使该菌株获得了利福平和链霉素的双抗性标记,同时针对其ITS序列的特异性区段,设计了特异性引物L6SF、L6SR。采用抗抗生素和特异性PCR双重标记,研究了XM5在小麦中的内生定植状况,发现根施的XM5能长期定植于室内小麦苗和室外植株中,但定植菌的数量随时间呈递减趋势。为研究穗部的防治效果,分别以XM5的菌悬液和发酵液喷施幼穗,结果表明:10d后两个处理组在穗部表面残余的活菌数量均已不足起始量的5%,但在喷施菌悬液组,麦穗内部定植的XM5的数量不断增加,由5.2×103持续增加至4.8×104cfu·穗-1,其对赤霉病的防效在7d时可达到68.3%。
- 辛海峰孟艳艳李建宏马鸿翔张旭
- 关键词：小麦赤霉病内转录间隔区生物防治
- 小麦抗赤霉病品种宁7840中抗病基因TaLRG的cDNA克隆和特性分析
- 2011年
- 为探索小麦NBS-LRR类抗病基因的克隆方法、功能及作用机制,从小麦抗赤霉病品种宁7840中通过RT-PCR和RACE技术(末端快速扩增技术)得到一个新的NBS-LRR类抗病基因同源序列,命名为TaLRG,开放阅读框3 063 bp,编码1 021个氨基酸,具有NBS保守结构域和多个亮氨酸重复序列。聚类分析发现其编码蛋白质与水稻Pib在同一进化枝上。结构分析表明其编码蛋白质序列有4个疏水结构域,二级结构以卷曲和螺旋为主。用禾谷镰刀菌处理小麦赤霉病抗病和感病品种穗部后,利用RT-PCR进行半定量表达分析,发现该基因在病原菌侵染后上调表达显著,但在抗、感品种之间差别不显著。
- 魏芳马鸿翔
- 关键词：小麦
