广东省博士启动基金(9451051501003761)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 以短肽K237为配体的靶向脂质体超声造影剂构建方法被引量：2
- 2011年
- 目的探讨以与血管内皮生长因子(VEGF)的主要受体KDR特异性结合的短肽K237(P)为配体制备靶向脂质体超声造影剂(P-Bio-Av-Bio-Mbs)的方法。方法 采用生物素-亲和素桥接法构建P-Bio-Av-Bio-Mbs,流式细胞术筛选最佳配体适配剂量,光镜及荧光显微镜观察靶向微泡与KDR强阳性表达的人大肠癌LOVO细胞结合情况,计算花环形成率。分别以5、50、99ml/h速率水流冲刷,光镜观察靶向微泡与LOVO细胞结合情况。结果 不同亲和素剂量下(0、2、6、10、30μg),微泡表面亲和素携带率差异有统计学意义(P<0.05)。Mavidin=6μg时,携带率增长达平台期;不同短肽剂量下(0、30、40、50、60、70、100μg),微泡表面短肽携带率差异有统计学意义(P<0.05),当MK237=50μg时,微泡表面短肽携带率增长达平台期。光镜下KDR强阳性表达的LOVO细胞周围花环形成率高达90.52%,荧光显微镜下微泡外壳发出明亮绿色荧光。随冲刷速度增加,靶细胞周围黏附的靶向微泡减少,在99ml/h冲刷速度下,靶细胞周围仍可见花环结构。结论 通过生物素-亲和素桥连作用,短肽K237被有效装配在P-Bio-Av-Bio-Mbs表面,体外具有靶向特异性及一定稳定性。流式细胞术是筛选靶向微泡配体适配剂量的可靠方法。
- 何洁杨莉李颖嘉孙学刚刁建新李传刚宾建平龚渭冰
- 关键词：微泡流式细胞术
- 穿膜肽在分子影像学中的应用
- 2011年
- 细胞穿膜肽可携带多种大分子物质进入细胞,将细胞穿膜肽与影像技术相结合可实现细胞内分子显像,为分子影像学的研究提供了新的思路。本文就细胞穿膜肽在分子影像学中的应用进行综述。
- 位红芹文戈李颖嘉
- 关键词：穿膜肽分子影像
- 生物素-亲和素介导以KDR为靶点的脂质体超声造影剂体外靶向实验研究被引量：6
- 2010年
- 目的 以与VEGF的主要受体KDR特异性结合的小肽K237为配体研制靶向脂质体超声造影剂并进行体外性能鉴定.方法 采用＂生物素一亲和素＂桥接法构建靶向微泡（P-Bio-Av-Bio-Mbs）,将KDR不同程度表达的细胞LOVO、HUVECs和LS174T分别与P-Bio-Av-Bio-Mbs孵育,同时另将荧光标记生物素-亲和素桥接靶向脂质体微泡（FITC- P-Bio-Av-Bio-Mbs）、荧光标记的单纯小肽微泡复合物（FITC-P-Mbs）及荧光标记的普通脂质体微泡（FITC-Mbs）分别与LOVO细胞孵育,光镜及荧光显微镜观察微泡与细胞结合的花环形成率及荧光强度;分别以10 ？g、50 ？g的小肽K237预先与LOVO细胞孵育,再将P-Bio-Av-Bio-Mbs与LOVO细胞孵育,观察细胞周围微泡分布.结果 KDR强阳性表达的LOVO细胞周围花环形成率高达90.52%,荧光强度3级,KDR阳性表达的HUVECs周围花环形成率53.46%,荧光强度2级,KDR阴性表达的LS174T细胞周围少数微泡黏附,花环形成率5.57%.荧光强度0～1级,组间花环形成率比较差异有统计学意义（P〈0.05）.FITC-P-Bio-Av-Bio-Mbs、FITC-P-Mbs及FITC-Mbs与LOVO细胞结合,花环形成率分别为89.62%、7.56%、0%,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,荧光强度分别为3级、0～1级、0级.10？g预处理组靶细胞周围花环结构明显减少,50 ？g封闭组靶细胞周围无花环形成.结论 以KDR为靶点携小肽K237的靶向脂质体造影剂通过生物素-亲和素桥介导成功制备,在体外能与靶细胞高效特异结合.针对KDR为靶点进行肿瘤新生血管分子靶向显像可能为肿瘤早期诊断提供新的思路.
- 李颖嘉何洁孙学刚杨莉宾建平文戈
- 关键词：基因打靶
