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河南省科技攻关计划(122102310633)

作品数:2 被引量:0H指数:0
相关作者:段江波毛烈王霈王云龙张怡青更多>>
相关机构:郑州大学河南师范大学中国药科大学更多>>
发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇肾上腺
  • 2篇肾上腺素
  • 2篇去甲肾上腺
  • 2篇去甲肾上腺素
  • 2篇抗原
  • 2篇甲肾上腺素
  • 2篇半抗原
  • 1篇杂交
  • 1篇杂交瘤
  • 1篇杂交瘤细胞
  • 1篇杂交瘤细胞株
  • 1篇载体蛋白
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞筛选
  • 1篇小鼠
  • 1篇小鼠体内
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫效果

机构

  • 2篇郑州大学
  • 1篇中国药科大学
  • 1篇河南师范大学

作者

  • 2篇毛烈
  • 2篇段江波
  • 1篇张怡青
  • 1篇王云龙
  • 1篇王霈

传媒

  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2013
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
一种改进的分泌抗半抗原抗体杂交瘤细胞株筛选方法
2014年
目的:研究解决半抗原分子单克隆抗体制备技术路径中遇到的在阳性杂交瘤细胞株筛选时无法排除载体蛋白间交叉反应影响的问题,以半抗原去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)为例。方法:在NE完全抗原免疫小鼠实施细胞融合后,分别包被牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)、BSA-NE、OVA-NE等4种不同抗原的酶标板平行检测细胞培养上清液;挑选BSA、OVA检测结果为阴性,BSA-NE、OVA-NE检测结果为阳性的孔内细胞进行克隆化筛选单克隆细胞。结果:本筛选方法可一次性从8板96孔板中筛选到13个符合要求的阳性孔,经3次克隆化后获得6株特异性强的杂交瘤细胞株。结论:本方法避免了载体蛋白间交叉反应对筛选的影响,改进了传统的单一指标筛选方法,筛选效率更高。
王云龙段江波李恒思王霈毛烈张怡青王国强王继创
关键词:半抗原去甲肾上腺素
去甲肾上腺素完全抗原的制备、鉴定及小鼠体内免疫效果的观察
2013年
目的制备鉴定去甲肾上腺素完全抗原为制备高灵敏度和特异性抗去甲肾上腺素(NE)单克隆抗体提供条件。方法分别用戊二醛法(GA)和碳化二亚胺法(EDC)在pH4.5和pH9.0条件下将NE与载体蛋白(BSA、OVA)耦联制备完全抗原,采用紫外全波长扫描、SDS.PAGE和FeCl,显色反应3种方法进行鉴定;完全抗原腹腔注射小鼠并监测血清抗体效价。结果3种方法鉴定结果表明NE完全抗原制备成功,与pH4.5相比,在pH9.0条件下随着耦联时间的延长,NE的耦联比增加显著。间接ELISA结果显示,“检测抗原”和“免疫抗血清”配组测定时,当包被的“检测抗原”测定同种耦联方法制备的“免疫抗原”免疫小鼠后获得的“免疫抗血清”时,血清抗体滴度观测值高于与“检测抗原”制备方法不同的免疫小鼠抗血清,如:A组(BSA-NE-GA)测定C组抗血清(OVA.NE.GA)时测定结果高于A组测定G组抗血清(OVA—NE—EDC)。结论用制备的NE完全抗原免疫小鼠成功产生了抗NE抗体。
王云龙段江波李玉林程蕾王继创张慧茹毛烈王国强
关键词:去甲肾上腺素半抗原
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