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基于肾组织连续切片的三维实体构建被引量：5: 2010年; 目的采用肾组织连续切片探索组织三维实体构建的方法和可行性.方法 C57/BL/6J小鼠,腹主动脉灌流同定,垂直于肾长轴取组织块,锇酸后固定,Epon 812包埋,获取2.5 μm半薄连续切片400张,所有切片采用甲苯胺蓝染色.数字显微图像摄取后进行配准,检验配准正确性,之后进行色彩校正并转化为灰度图像,并做导入前预处理.最后用MIMICS软件进行肾组织三维构建.结果间隔采用拍摄的400张光学显微切片图像作为原始数据,通过主观和客观两方面验证配准结果符合三维重构要求,使用MIMICS软件获得肾组织三维实体,三维实体的体积为51 205 497.02μm^3,表面积为18 650 385.47μm^2.生成的三维实体文件可以用于有限元分析.其组织微细结构经形态学分析正确.结论利用本方法生成的三维实体不仅可以用于可视化、形态学参数的测量等,还可以构建有限元分析的几何模型.; 常世杰沙宪政翟效月; 关键词：连续切片可视化

计算机辅助的小鼠肾连接小管三维重建被引量：1: 2010年; 目的探讨肾连接小管(CNT)过渡为集合管系的空间走行规律。方法灌流固定3只C57/BL/6J小鼠,取肾组织块并树脂812包埋,从肾被膜到肾乳头共得到2000张2.5μm厚的连续切片,显微镜图像数字化并配准,计算机程序追踪38条CNT走行并测量其长度。结果来自长髓袢肾单位的CNT在胃皮质中上行,沿途与5～6条短髓袢肾单位CNT相互吻合成弓形管,弓形管或部分来自最浅表皮质的CNT在皮质浅层与集合管汇合。CNT各自走行约150～500μm,弓形管长度为600～900μm。结论肾单位只在皮质浅层经CNT或经弓形管汇入集合管系,集合管在穿过中层和深层皮质时不再有新的肾单位加入,提示肾小球滤过液在集合管下行过程中不再接受来自于其他肾单位的滤液,重吸收功能不受任何肾单位的影响。; 林庚任昊陈雪翟效月; 关键词：小鼠集合管三维重建

小鼠肾近端小管的三维重建被引量：1: 2010年; 目的研究小鼠肾近端小管三维空间走行的特点及规律。方法 C57/BL/6J小鼠3只,灌流固定后取肾组织块并树脂812包埋,垂直肾长轴连续半薄切片,从肾被膜到肾外髓外带共得到1 200张2.5μm厚的连续切片,显微镜下获取数字图像,计算机配准,C语言编程,追踪并三维重建58条近端小管走行。结果在皮质迷路中,近端小管起始段在离开肾小球后,均先向被膜方向走行约100～1 400μm后返折,在各自肾小球周围盘曲并占据相对独立的区域,很少和其他肾单位近端小管曲部区域重合。浅表皮质肾单位与中间皮质肾单位的近曲小管盘曲紧密,所占空间比近髓肾单位近曲小管小。在髓放线中,近端小管直部的走行有明显的层次:来源于浅表皮质肾单位的近端小管直部走行于中央,来源于皮质深部肾单位的近直小管则依次走行在其外围,皮质最深层的肾单位的近直小管几乎无直部。所有近端小管均止于肾外髓外带与内带的交界处,并移行为髓袢降支细段。结论小鼠近端小管的起始段、曲部和直部在皮质迷路与髓放线都有各自走行区间,其吡邻关系及所处生物学环境不同,这对肾近端小管不同节段对不同物质转运功能的生理及病理评估提供形态依据。; 陈雪任昊杨蓓翟效月; 关键词：近端小管三维重建小鼠

小鼠肾脏发生发育中BAX的表达: 2011年; 目的探讨小鼠肾脏发育过程中促凋亡蛋白BAX的表达。方法选取胚龄16、18d和出生后1、3、5、7、14、21d的小鼠共54只,应用免疫组织化学、免疫荧光技术并结合体视学分析方法观察树脂切片上小鼠不同发育时期BAX的表达。结果 BAX的表达主要出现在近端小管,随着发育的不断进行,BAX的表达由皮质的近髓质区逐渐发展到中层皮质区,最后出现在浅层皮质区。BAX的面数密度从E16d到P3d逐渐升高,随后下降,在P7d又逐渐升高。结论小鼠肾脏发育过程中BAX的表达与近端小管的发育密切相关,可能影响近端小管的存活、分化和成熟。; 宋小峰任昊陈雪翟效月; 关键词：BAX 肾脏发生发育体视学免疫荧光小鼠

降低肾脏免疫组化染色背景着色的方法被引量：3: 2011年; 传统的免疫组织化学染色从最初的PAP法发展到S-ABC法和SP法,特异性和灵敏度越来越高。最近几年发展的PV法又称为两步法使得免疫组化更加简单快速,背景更加清晰。但是有时还是因为染色背景过高而影响结果判定。本文介绍一种新的染色方法,在＂两步法＂基础上大大降低肾脏组化片的染色背景,从而提高结果判定的准确性。; 马云胜宁斌翟效月任昊; 关键词：免疫组织化学

小鼠肾发育过程中增殖与凋亡相关蛋白在树脂切片上的表达被引量：3: 2011年; 在石蜡切片或冷冻切片上做免疫组织化学实验经常遇到组织结构不全的问题。树脂包埋的组织可以展示保存良好的形态结构，但树脂包埋所采用的醛类固定剂可以和组织抗原交联，同时环氧树脂也掩盖了抗原的共价键，因此树脂切片上的抗原表达很弱[1]。; 宋小峰宁斌翟效月; 关键词：冷冻切片凋亡相关蛋白发育过程小鼠组织抗原

小鼠肾发育中的细胞凋亡被引量：4: 2012年; 目的：探讨小鼠肾发育过程中细胞凋亡的发生规律。方法：在树脂切片上，应用原位末端标记技术，观察昆明小鼠发育不同时期的肾中凋亡细胞的分布及量的变化。结果：在肾发生发育的过程中，肾皮质和髓质内几乎所有结构都有凋亡细胞散在分布。其中，肾小体的凋亡指数在生后14d达到高峰，而肾小管的凋亡指数从生后7d之后变化不大。同时，髓质中的间质细胞也发生了明显的凋亡变化。结论：伴随着肾各种结构的发生发育而出现的细胞凋亡是肾发育的一个基本特征，此过程延续到生后2周。肾单位的数量虽然在生后7d已经不再增加，但是肾小体结构的成熟和分化还在继续进行，可能将进一步促进肾小体滤过功能的成熟。; 宋小峰任昊陈雪翟效月; 关键词：细胞凋亡发育 TUNEL

小鼠肾发育中肾乳头区的细胞凋亡被引量：1: 2012年; 目的探讨小鼠肾发育中肾乳头区细胞凋亡的演变规律。方法应用原位末端标记技术并结合体视学分析方法检测小鼠肾发育中肾乳头区细胞凋亡的演变规律。结果 E16和E18 d时,肾髓质乳头区可见少量凋亡细胞;P1 d时,此区的凋亡细胞增多;P3 d和P5 d时,肾乳头下半部的凋亡细胞多于上半部;P7 d时,肾乳头上半部的凋亡细胞增多,多于下半部的凋亡细胞;P14和P21 d时,乳头区的凋亡细胞少见。结论发育早期肾乳头区主要通过细胞凋亡来完成形态的转变,随后管状结构增生,细胞凋亡减少,从而完成肾乳头结构的演变。; 宋小峰任昊翟效月; 关键词：肾乳头细胞凋亡发生发育体视学

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国家自然科学基金(30871313)